Name: revealing neural circuit topography in multi-color
Uploaded: 2011-11-14T12:00:00
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이 작품은 RVS로 시작 자금 예시바 대학 의과 알버트 아인슈타인 대학에서 새로운 조사에 의해 지원되었다.

1. 멸균 수술을 이용하여 생체내에 추적기를 제공하는 (제 1.1-1.16) 절차 전반에 걸쳐 우리는 표준 불임 수술 기법을 사용하시는 것이 좋습니다. 이것은 멸균 장갑, 가운, 그리고 안면을 사용하여 포함됩니다. 도구는 역시 사용하기 전에 autoclaved하거나 물 그리고 에탄올과 철저히 청소해야합니다. 수술하는 동안, 특히 사이에 동물, 뜨거운 구슬 살균기 (Steri 250 고양이. # 180...

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	<li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Grishkat, H. L., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+prenatal+mouse.">Development of the spinocerebellar projection in the prenatal mouse.</a> J. Comp. Neurol. 363, 93-108 (1995).</li><li>Mesulam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tracing neural connections with horseradish peroxidase. , (1982).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine+regulated+transcript+(CART)+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine regulated transcript (CART) peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> Journal of Comparative Neurology. , (2011).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain. Struct. Funct. , (2011).</li><li>Sillitoe, R. V., Stephen, D., Lao, Z., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+determine+the+organization+of+Purkinje+cell+sagittal+stripe+gene+expression+in+the+adult+cerebellum.">Engrailed homeobox genes determine the organization of Purkinje cell sagittal stripe gene expression in the adult cerebellum.</a> J. Neurosci. 28, 12150-12162 (2008).</li><li>Sillitoe, R. V., Vogel, M. W., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+regulate+establishment+of+the+cerebellar+afferent+circuit+map.">Engrailed homeobox genes regulate establishment of the cerebellar afferent circuit map.</a> J. Neurosci. 30, 10015-10024 (2010).</li><li>Vig, J., Goldowitz, D., Steindler, D. A., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+reeler+cerebellum:+segregation+and+overlap+of+spinocerebellar+and+secondary+vestibulocerebellar+fibers+and+their+target+cells.">Compartmentation of the reeler cerebellum: segregation and overlap of spinocerebellar and secondary vestibulocerebellar fibers and their target cells.</a> Neuroscience. 130, 735-744 (2005).</li><li>Vogel, M. W., Prittie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topographic+spinocerebellar+mossy+fiber+projections+are+maintained+in+the+lurcher+mutant.">Topographic spinocerebellar mossy fiber projections are maintained in the lurcher mutant.</a> J. Comp. Neurol. 343, 341-351 (1994).</li><li>Voogd, J., Broere, G., van Rossum, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medio-lateral+distribution+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+anterior+lobe+and+the+simple+lobule+in+the+cat+and+a+comparison+with+some+other+afferent+fibre+systems.">The medio-lateral distribution of the spinocerebellar projection in the anterior lobe and the simple lobule in the cat and a comparison with some other afferent fibre systems.</a> Psychiatr. Neurol. Neurochir. 72, 137-151 (1969).</li><li>Wu, H. S., Sugihara, I., Shinoda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projection+patterns+of+single+mossy+fibers+originating+from+the+lateral+reticular+nucleus+in+the+rat+cerebellar+cortex+and+nuclei.">Projection patterns of single mossy fibers originating from the lateral reticular nucleus in the rat cerebellar cortex and nuclei.</a> J. Comp. Neurol. 411, 97-118 (1999).</li></ol>

우리는 성공 axonal와 dendrite 신속하게 개발하고 성인 생쥐의 신경 전망을 라벨에 대한 소설 형광 기반의 접근법을 사용 추적에 필요한 수술과 기술 세부 사항을 설명합니다. WGA - 알렉사를 사용하여 우리는 추적기와 마커는 높은 해상도로 패턴 회로 지형을 분석하고 3 차원에 사용할 수있는 방법을 보여줍니다. 대부분의 추적기는 콜레라 독소의 subunit의 B, Biocytin, Neurobiotin, Phas...

<table border="1"><tbody><tr><td> 장비 / 시약 </td><td> 모델 / 카탈로그 번호를 </td><td> 회사 </td></tr><tr><td> 비드 살균기 </td><td> 모델 250 고양이를 Steri. # 18000-45 </td><td> 파인 과학 도구 </td></tr><tr><td> Cauterizer </td><td> 고양이. # 18000-00 </td><td> 파인 과학 도구 </td></tr><tr><td> Borosilicate 유리 모세관 </td><td> 고양이. # 300056 </td><td> 하버드 장치 </td></tr><tr><td> 듀얼 스테이지 유리 Micropipette 풀러 </td><td> 모델 001 - PC - 10 </td><td> Narishige </td></tr><tr><td> 마이크로 미터 주사기 </td><td> 고양이. # GS - 1100 </td><td> Gilmont 인 스트 루먼트 </td></tr><tr><td> 작은 동물 Stereotaxic 악기 </td><td> 모델 940 - A </td><td> Kopf 계측 </td></tr><tr><td> 전극 속이는 사람 </td><td> 모델 960 </td><td> Kopf 계측 </td></tr><tr><td> Vetcare 챔버 </td><td> 고양이. #340,508 </td><td> 하버드 장치 </td></tr><tr><td> 손난로 </td><td> 고양이. # 341241 </td><td> 하버드 장치 </td></tr><tr><td> Leica DFC360 FX 카메라 </td><td> DFC360 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC490 카메라 </td><td> DFC490 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DM5500 현미경 </td><td> DM5500 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC3000 FX 카메라 </td><td> DFC3000 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica MZ16 FA 현미경 </td><td> MZ16 FA </td><td> Leica </td></tr><tr><td> CY3 필터 </td><td> 모델 # 11600231 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> FITC 필터 </td><td> 모델 # 11513880 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> A4 DAPI / UV 필터 </td><td> 모델 # 11504162 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> 밀 배아 agglutinin, 알렉사 형석 488 공액 </td><td> 고양이. # W11261 </td><td> Invitrogen </td></tr><tr><td> 밀 GERm agglutinin, 알렉사 형석 555 공액 </td><td> 고양이. # W32464 </td><td> Invitrogen </td></tr></tbody></table>

revealing neural circuit topography in multi-color

신경 회로는 기능 지형지도로 구성되어 있습니다. 복잡한 회로 아키텍처를 시각화하기 위해 우리는 여러 지형 예측의 글로벌 patterning을 안정적으로 라벨 접근 방식을 개발했습니다. 소뇌는 신경 회로의 질서 배열을 연구하는 이상적인 모델입니다. 예를 들어, spinocerebellar 이끼 낀 섬유의 compartmental 조직은 이끼 낀 섬유 patterning을 연구를위한 필수적인 시스템으로 입증되었습니다. 우리는 최근 그 알렉사 555 및 488에 복합 밀 배아 agglutinin (WGA)이 개발하고 성인 마우스에 spinocerebellar 이끼 낀 섬유 계획을 추적 사용할 수 있습니다 보여주었다 (Reeber 외. 2011)를. 우리는 신경 전망을 라벨에 대한 WGA - 알렉사 추적하는 바람직한 도구를 만드는 세 가지 주요 속성을 발견했습니다. 첫째, 알렉사의 fluorophores은 집중하고 자신의 밝기를 직접 추적 후 wholemount 이미징을 허용합니다. 둘째, WGA - 알렉사 추적기 개발과 성인 신경 projectio의 전체 궤도 레이블을NS. 셋째, WGA - 알렉사으로 추적은 빠르게 역행하고 anterograde 두 방향으로 수송됩니다. 여기, 우리는 추적기와 기타 필요한 도구, spinocerebellar 추적에 대한 수술을 수행하는 방법과 최상의 방법을 3 차원에 투영 이미지를 추적하기 위해 준비하는 방법을 자세히 설명합니다. 요약에서, 우리는뿐만 아니라 소뇌에서뿐만 아니라 대뇌 피질, brainstem 및 척수의 기능지도의 조직과 연결성을 파악하는 데 유용할 수있는 단계별로 추적 프로토콜을 제공합니다.

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Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

우리는 제공 추적기에 대한 실질적인 가이드를 제공합니다<em&gt; 생체내에</em&gt;와 생쥐에서 성공의 연결 회로 분석을위한 필수적인 단계를 보여주는 모델 시스템으로 spinocerebellar 경로를 사용합니다. 우리는 자세히 알렉사의 fluorophores에 복합 밀 배아 agglutinin (WGA)를 이용하는 우리의 다목적 추적 프로토콜을 설명합니다.

멀티 컬러의 신경 회로 지형을 공개

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

배아 척수에서 뉴런의 Commissural 해부와 문화

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

연구

신경과학

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

행동 내분비학 및 실험 경제학을 결합 : 테스토 스 테론과 사회 의사 결정

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

개발 Zebrafish Forebrain에 Clonally 관련 신경 전구 세포의 시간 경과 라이브 영상

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

내생 NADH 형광의 2 광자 이미징에 의한 마우스 대뇌 피질의 Microregional Hypoxia의 탐지

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

의미 심장한 복잡한 두뇌 지형에 대한 Wholemount Immunohistochemistry

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

작은 동물의 만성 신경 레코딩을위한 초경량 동력 Microdrive의 설계 및 조립

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust Schistocerca Americana Olfactory Circuits

메뚜기에 신경 활동을 특성화하기 위해 다중 단위 기록 방법 (<em&gt; Schistocerca 아메리카나</em&gt;) 강한 회로

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Neural Circuit Recording from an Intact Cockroach Nervous System

신경 회로 녹화 본래대로 바퀴벌레 신경계에서

The cockroach ventral nerve cord preparation is a tractable system for neuroethology experiments, neural network modeling, and testing the physiological ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

의 애벌레 먹이 회로의 기능적 분석 초파리</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

미세 전극 배열에서 신경 세포 배양의 자극에 대한 네트워크 반응의 시간 의존적 증가

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...