Name: revealing neural circuit topography in multi-color
Uploaded: 2011-11-14T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color at JoVE.com

Эта работа была поддержана новым следователем стартовый капитал от Альберта Эйнштейна Медицинского колледжа университета Ешива в РВС.

1. Доставка трейсеров в естественных использованием стерильных хирургии (разделы 1.1-1.16) На протяжении процедуры мы рекомендуем стандартные стерильные хирургические методы использовать. Это включает в себя стерильные перчатки, халат и маску. Инструменты должны быть ...

<ol>
	<li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+cortical+organization:+a+one-map+hypothesis.">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li><li>Grishkat, H. L., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+prenatal+mouse.">Development of the spinocerebellar projection in the prenatal mouse.</a> J. Comp. Neurol. 363, 93-108 (1995).</li><li>Mesulam, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tracing neural connections with horseradish peroxidase. , (1982).</li><li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine+regulated+transcript+(CART)+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex.">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine regulated transcript (CART) peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> Journal of Comparative Neurology. , (2011).</li><li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions.">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain. Struct. Funct. , (2011).</li><li>Sillitoe, R. V., Stephen, D., Lao, Z., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+determine+the+organization+of+Purkinje+cell+sagittal+stripe+gene+expression+in+the+adult+cerebellum.">Engrailed homeobox genes determine the organization of Purkinje cell sagittal stripe gene expression in the adult cerebellum.</a> J. Neurosci. 28, 12150-12162 (2008).</li><li>Sillitoe, R. V., Vogel, M. W., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engrailed+homeobox+genes+regulate+establishment+of+the+cerebellar+afferent+circuit+map.">Engrailed homeobox genes regulate establishment of the cerebellar afferent circuit map.</a> J. Neurosci. 30, 10015-10024 (2010).</li><li>Vig, J., Goldowitz, D., Steindler, D. A., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentation+of+the+reeler+cerebellum:+segregation+and+overlap+of+spinocerebellar+and+secondary+vestibulocerebellar+fibers+and+their+target+cells.">Compartmentation of the reeler cerebellum: segregation and overlap of spinocerebellar and secondary vestibulocerebellar fibers and their target cells.</a> Neuroscience. 130, 735-744 (2005).</li><li>Vogel, M. W., Prittie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topographic+spinocerebellar+mossy+fiber+projections+are+maintained+in+the+lurcher+mutant.">Topographic spinocerebellar mossy fiber projections are maintained in the lurcher mutant.</a> J. Comp. Neurol. 343, 341-351 (1994).</li><li>Voogd, J., Broere, G., van Rossum, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medio-lateral+distribution+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+anterior+lobe+and+the+simple+lobule+in+the+cat+and+a+comparison+with+some+other+afferent+fibre+systems.">The medio-lateral distribution of the spinocerebellar projection in the anterior lobe and the simple lobule in the cat and a comparison with some other afferent fibre systems.</a> Psychiatr. Neurol. Neurochir. 72, 137-151 (1969).</li><li>Wu, H. S., Sugihara, I., Shinoda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projection+patterns+of+single+mossy+fibers+originating+from+the+lateral+reticular+nucleus+in+the+rat+cerebellar+cortex+and+nuclei.">Projection patterns of single mossy fibers originating from the lateral reticular nucleus in the rat cerebellar cortex and nuclei.</a> J. Comp. Neurol. 411, 97-118 (1999).</li></ol>

Мы описали хирургических и технических деталей, необходимых для успешного аксонального и дендритов трассировку новых флуоресцентных подход для быстрой маркировки нейронные прогнозы в области разработки и взрослых мышей. Использование WGA-Alexa мы покажем, как индикаторы и маркеры могут...

<table border="1"><tbody><tr><td> Оборудование / Реагенты </td><td> Модель / Номер по каталогу </td><td> Компания </td></tr><tr><td> Бусы стерилизатор </td><td> Модель Steri 250 Кат. # 18000-45 </td><td> Инструменты изобразительных наук </td></tr><tr><td> Cauterizer </td><td> Кат. # 18000-00 </td><td> Инструменты изобразительных наук </td></tr><tr><td> Боросиликатного стекла капилляров </td><td> Кат. # 300056 </td><td> Гарвардский аппарата </td></tr><tr><td> Двухуровневые Стекло микропипетки Puller </td><td> Модель 001-ПК-10 </td><td> Narishige </td></tr><tr><td> Микрометр шприц </td><td> Кат. # GS-1100 </td><td> Gilmont инструменты </td></tr><tr><td> Малый Инструмент стереотаксической животных </td><td> Модель 940- </td><td> Kopf инструментария </td></tr><tr><td> Электрод Манипулятор </td><td> Модель 960 </td><td> Kopf инструментария </td></tr><tr><td> Vetcare камеры </td><td> Кат. #340508 </td><td> Гарвардский аппарата </td></tr><tr><td> Грелка-подушка </td><td> Кат. # 341241 </td><td> Гарвардский аппарата </td></tr><tr><td> Leica DFC360 FX камеры </td><td> DFC360 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC490 камеры </td><td> DFC490 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DM5500 микроскопом </td><td> DM5500 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC3000 FX камеры </td><td> DFC3000 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica MZ16 FA микроскопом </td><td> MZ16 FA </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Cy3 фильтра </td><td> Модель # 11600231 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> FITC фильтра </td><td> Модель # 11513880 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> A4 DAPI / УФ-фильтром </td><td> Модель # 11504162 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Зародыши пшеницы агглютининов, Alexa Fluor 488 сопряженных </td><td> Кат. # W11261 </td><td> Invitrogen </td></tr><tr><td> Пшеница герм агглютининов, Alexa Fluor 555 сопряженных </td><td> Кат. # W32464 </td><td> Invitrogen </td></tr></tbody></table>

revealing neural circuit topography in multi-color

Нейронных цепей организованы в функциональные топографических карт. Для того, чтобы визуализировать сложную архитектуру схему мы разработали подход к этикетке надежно глобальных паттернов несколько топографических проекций. Мозжечок является идеальной моделью для изучения упорядоченное расположение нейронных цепей. Например, compartmental организации спиноцеребеллярные мшистые волокна оказалась необходимой системой для изучения паттернов мшистых волокон. Недавно мы показали, что зародыши пшеницы агглютининов (WGA), конъюгированные с Alexa 555 и 488 могут быть использованы для отслеживания спиноцеребеллярные мшистые волокна прогнозы в области разработки и взрослых мышей (Reeber и соавт. 2011). Мы нашли три основных свойства, которые делают WGA-Alexa индикаторов желательно инструменты для маркировки нейронных проекций. Во-первых, Alexa флуорофоров являются интенсивными и их яркость позволяет wholemount изображений непосредственно после трассировки. Во-вторых, WGA-Alexa индикаторов этикетке всей траектории развития и взрослых нейронные projectioнс. В-третьих, WGA-Alexa индикаторов быстро транспортировать в обоих ретроградной и антероградной направлениях. Здесь мы подробно описывают, как подготовить индикаторы и другие необходимые инструменты, как проводить операцию по отслеживанию спиноцеребеллярные и как лучше всего прослеживается изображение проекции в трех измерениях. Таким образом, мы обеспечиваем шаг за шагом трассировки протокола, которые будут полезны для расшифровки организации и подключения функциональных карт не только в мозжечке, но и в коре головного мозга, ствола мозга и спинного мозга.

Watch this Scientific Journal Video about Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color at JoVE.com

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

Мы предоставляем практическое руководство для доставки трейсеров<em&gt; В естественных условиях</em&gt; И использовать спиноцеребеллярные путь в качестве модельной системы для демонстрации существенных шагов для успешного анализа нейронной схемы на мышах. Мы подробно описать наш универсальный трассировки протокола, который использует агглютинин зародышей пшеницы (WGA), конъюгированные с Alexa флуорофоров.

Выявление нейронных Топография округа в многоцветном

Neural circuits are organized into functional topographic maps. In order to visualize complex circuit architecture we developed an approach to reliably ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Разбор и культуры спаечный Нейроны из эмбриональных спинного мозга

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Сочетание поведенческих эндокринологии и экспериментальной экономики: Тестостерон и социального принятия решений

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Покадровый Живая съемка клонально Связанные нейронные клетки-предшественники в развивающихся данио рерио переднего мозга

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

Обнаружение микрорегиональном Гипоксия в мышь коры головного мозга на два фотона изображений эндогенной флуоресценции NADH

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Wholemount Immunohistochemistry for Revealing Complex Brain Topography

Wholemount иммуногистохимии для выявления сложной топографии мозга

The repeated and well-understood cellular architecture of the cerebellum make it an ideal model system for exploring brain topography. Underlying its ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

Проектирование и монтаж Сверхлегкий моторизованная Microdrive при хронических нейронных Recordings у мелких животных

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust Schistocerca Americana Olfactory Circuits

Multi-единицы Запись методы для характеристики нейронной активности в Locust (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Обонятельные схемы

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Neural Circuit Recording from an Intact Cockroach Nervous System

Нейронной цепи Запись с неповрежденных Таракан нервной системы

The cockroach ventral nerve cord preparation is a tractable system for neuroethology experiments, neural network modeling, and testing the physiological ...

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

Functional Analysis of the Larval Feeding Circuit in Drosophila

Функциональный анализ из питания личинок округа в Дрозофилы</i

The serotonergic  feeding circuit in Drosophila  melanogaster larvae can be used to investigate neuronal substrates of  critical importance during the ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

Зависящее от времени увеличение ответа сети на стимуляцию нейронных клеточных культур на микроэлектродных массивах

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...