Name: electroporation of craniofacial mesenchyme
Uploaded: 2011-11-28T13:00:00
Duration: 7 min 23 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electroporation of Craniofacial Mesenchyme at JoVE.com

Vi er taknemmelige for at Nancy Papalopulu og Boyan Bonev for hjælp med Xenopus elektroporation. Vi takker også Marc Dionne for kritisk læsning, Jeremy Green og John Wallingford for nyttige diskussioner og medlemmer af Liu laboratorium for deres støtte. Dette arbejde blev finansieret af tilskud fra BBSRC (BB/E013872/1) og Wellcome Trust (081880/Z/06/Z) til KJL.

Del 1A. Udstyr Mikroskop: oprejst stereo-dissekere anvendelsesområde med lavt strømforbrug mål <ul><li> Spænding / Pulse Generator: BTX ECM 830 Square Wave Elektroporation System </li><li> Pipette aftrækker: P-87 Mikropipette Puller (Sutter Instrument Company, CA) </li><li> Manipulator: grove, eller kombineret grove og fine afhængig af forberedelse. </li><li> Mikropipette indehaveren: Fine Science Tools </li><li> Elektrode: hjemmelavet </li><li> Elektroporation kammer: hjemmelavet </li></ul> L-formede elektroder: <ol><li> Klip 8 cm høj renhed 0,4 mm wolfram wire (Goodfellow) og anbringer midtvejs en 1 ml sprøjte med kit (vi bruger Blu-Tack). Lad 4 cm wolfram ledning udsat fra spidsen af ​​sprøjten og bøje tip til L-form, 1 cm fra ende (Fig. 1A). </li><li> Trim tip så enden foranstaltninger 0,5 mm i længden. Thans tip er elektroden endestation. </li><li> Kør overskydende wolfram ledning parallelt med sprøjte og bruge det til at forbinde elektroden impulsgeneratoren. </li><li> Gentag processen at gøre et par af elektroder. </li><li> Sæt elektroderne til firkantbølge pulsgenerator via DC kabler. </li></ol> Elektroporation kammer <ol><li> Linje nederst i 90 mm fad med ~ 5 mm giftfri modellervoks. </li><li> Fyld fadet med elektroporation medier. </li><li> Brug af nr. 5 urmager pincet skære en T-formet godt (fig. 2). Den lange og skal måle ~ 2 mm x 2 mm x 10 mm og den korte ~ 2 mm x 2 mm x 5 mm. Den elektroporation parabol kan vaskes og genbruges. </li></ol> Del 1B. Reagenser DNA eller opkrævet makromolekyler <ul><li> Mikropipetter: 1 mm brede 4 &quot;lange borosilikatglas kapillærer (WPI, TW100-F) </li><li> Kultur medier: Normal amfibieflyvemaskine Media (NAM) </li><li> &gt; 10 X lager: 1100 mM NaCl, 20mM KCL, 10 mM Ca (NO 3) 2 • 4H 2 O, 1 mM EDTA. <ul><li> Autoklave og opbevares ved 4 ° C. </li><li> 1 X NAM: Fortynd fra 10x lager, buffer med 0,1 mM NaHCO 3 og 0,2 mM Na 3 PO 4. </li></ul></li><li> Xenopus laevis haletudser, scene 28 </li></ul> DNA-forberedelse: <ol><li> Forbered ekspressionsplasmider ved hjælp af standard-protokoller. </li><li> Resuspender DNA til en endelig koncentration på 1 mg / mikroliter i nuklease frit H 2 0. </li></ol> * Vi har haft succes med vektorer, som indeholder et stærkt CMV promotor, såsom pCS2 + [16]. For afstamning analyse, vi normalt omfatter DNA-kodning grønt fluorescerende protein (pCS2 + GFP) ved en endelig koncentration på 0,1 mg / mikroliter. [DNA-koncentrationer mellem 0,1-3 mg / mikroliter blev også testet. Vi fandt, at koncentrationer under 0,8 mikrogram / mikroliter ineffektivt mærkede celler, mens DNA-koncentrationer større end 2 mg / &amp; mu l ikke blev bedre elektroporation effektiviteten]. Morpholino oligonucleotid forberedelse: (Bemærk:. MOS skal fluoresceinated (3&#39;-carboxyfluorescein modificeret) eller på anden måde opladet) <ol><li> Resuspender morpholino oligonukleotider (MOS) (Genetools, <a href="http://www.genetools.com" target="_blank">www.genetools.com</a> ) ved en koncentration på 2 mM i nuklease frit H 2 0. </li><li> Varm portion af stamopløsning ved 65 ° C i 5 minutter. </li><li> Fortynd til den endelige koncentration på 0,5 mM i nuklease frit vand. </li></ol> * 0,1-1mm MO løsninger blev afprøvet. 0,5 mm MO løsninger var tilstrækkelige til elektroporation af mange mesenchymale celler. Mikropipetter <ol><li> Forbered mikropipetter fra borosilikatglas kapillærer (1 mm bred, 4 &quot;lange, WPI nej. TW100-F). Brug nål aftrækker til at forberede mikropipetter forsynet med en 8-12 mm lang taper og fine spids. </li><li> Crush tip ~ 2 mmfra spids bruge pincet, hvilket skaber en ujævn pause. </li></ol> Medier <ol><li> Inkubation medier: Forbered frisk 3 / 4 Normal amfibieflyvemaskine Media (NAM) fra 1x lager. Tilføj 0,025 mg / ml gentamycin. </li><li> Elektroporation medier: som ovenfor, med 0,1% benzocain (Sigma, 06950). </li></ol> 2. Elektroporation Mikropipette opsætning <ol><li> Fyld mikropipette med ~ 1 ml opløsning. </li><li> Sikker mikropipette i mikromanipulator og tillægger microinjector (Picospritzer II). </li><li> Vinkel mikropipette ved 50 ° i forhold til bordpladen. </li><li> Set indsprøjtningstryk på 20 PSI. </li><li> Kalibrer mikropipette at injicere 30 nl pr puls. </li></ol> Haletudse forberedelse <ol><li> Bedøver etape 28 Xenopus larver ved at inkubere i elektroporation medier i 5 minutter. </li><li> Overførsel bedøvede haletudse til elektroporation kammer fyldt med elektroporation medier. Position embryoI den lange godt, så hovedet hviler i T-krydset med ryg nedad og ventral udsatte side. Hovedet skal være lidt forhøjet i forhold til halen. </li><li> Brug pincet, blidt sikkert haletudse i godt med omgivende modellervoks. (Bemærk:.. Hvis haletudse ikke er sikret, kan det spjæt og kontakt elektrode ved elektroporation I dette tilfælde kassere haletudse som ansigtsservietter vil blive alvorligt beskadiget) </li></ol> Elektroporation <ol><li> Indsæt mikropipette tip umiddelbart posteriort for cement kirtel og ind i ansigtet mesenchyme. </li><li> Indsprøjtes 30 nl løsningen i mesenchyme. </li><li> Træk mikropipette. </li><li> Hurtigt justere elektrode tips parallelt med lederen af ​​den embryo (fig. 3). </li><li> Anvend 8 50 ms, 20mV firkantede pulser. </li><li> Træk elektroderne. </li><li> Brug pincet forsigtigt frigivelse haletudse fra godt og transfer til 3 / 4 NAM, 0,025 mg / ml gentamycin. </li><li> Haletudser kan inkuberes i 3 / 4 NAM, 0,025 mg / ml overnøjre, eller længere. </li><li> Screen embryoner til effektiv elektroporation ved fluorescens mikroskopi efter 24 timer. </li></ol> 3. Repræsentative resultater: Brugen af ​​fluorescerende molekyler gør det nemt at screening af electroporated embryoner. Figur 4 viser et typisk parti af MO electroporated haletudser ~ 12, 48 og 96 timer efter elektroporation, inkuberes ved 14,5 ° C. Ved hjælp af fluorescens mikroskopi, kan MOS være visualiseres umiddelbart efter elektroporation og vare i flere dage efter elektroporation. Det er vores erfaring, er fluorescens svagt tydelige på nuværende tidspunkt 46 (~ 5 dage senere). I brusken, falder fluorescensen dramatisk efter udbrud af differentiering (~ st 42), men MO fluorescens stadig stærkere i andre celletyper, såsom svælg endoderm. Fluorescens mikroskopi viser, at oligonukleotider er indarbejdet i flere kraniofacial væv, herunder brusk. Oligonucleotid fluorescens cen ofte kan visualiseres i væv på begge sider af hovedet. Dette skyldes sandsynligvis hurtigere udbredelse af injektionsopløsningen hele løs kraniofacial mesenchyme før elektroporation. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig1.jpg" /> Figur 1 Hjemmelavet elektroder. L-formet wolfram ledning er fastgjort til en 1 ml sprøjte med ikke giftige ler eller kit. (A) elektrode endestation måler 5 mm. (B) Sæt et par af elektroder, således at endestationer løber parallelt. Elektroder er knyttet til pulsgenerator af DC kabler. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig2.jpg" /> Figur 2 Elektroporation kammer. (A) 90 mm fad foret med modellervoks er fyldt med medier og en T-formet kammer udskåret med nr. 5 urmager-pincet. (B) Den lange side måler 2 mm x 2 mm X10 mm, mens den korte måler 2 mm x 2 mm x 5 mm. Lederen af ​​embryo hviler i T-krydset, bug opad. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig3.jpg" /> Figur 3 Skematisk illustration af elektroporation procedure. St. 28 haletudse er placeret i elektroporation kammer, bug opad. Mikropipette er indsat i ansigtet mesenchyme underliggende cement kirtel. Inject. Mikropipette er fjernet, og L-formede elektroder er afstemt parallelle flankerende hovedet. Anvend otte 50 ms, 20 mV firkantede pulser. Træk elektroderne. Grow haletudser til den ønskede trin. Visualiser MOS eller GFP udtryk ved hjælp af fluorescensmikroskopi. <img alt="Figur 4" src="/files/ftp_upload/3381/3381fig4.jpg" /> Figur 4 Repræsentative haletudser 12 (A), 48 (B) og 96 (C) timer efter elektroporation (trin 30, 34 og 44 henholdsvis). (En &quot;-B&quot;) Fluorescerende MO kan visualiseres inden kraniofacial mesenchyme på hjortes 30 og 34. Fluorescens kan påvises i brusken i stadie 44 (pilespids, C&#39;-C &quot;). Tarmen er meget autofluorescent.

<ol>
	<li>Bonev, B., Pisco, A., Papalopulu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-9+reveals+regional+diversity+of+neural+progenitors+along+the+anterior-posterior+axis.">MicroRNA-9 reveals regional diversity of neural progenitors along the anterior-posterior axis.</a> Dev. Cell. 20, 19-32 (2011).</li><li>Haas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+electroporation+for+gene+transfer+in+vivo.">Single-cell electroporation for gene transfer in vivo.</a> Neuron. 29, 583-591 (2001).</li><li>Calegari, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+RNA+interference+in+post-implantation+mouse+embryos+using+directional+electroporation+and+whole+embryo+culture.">Tissue-specific RNA interference in post-implantation mouse embryos using directional electroporation and whole embryo culture.</a> Differentiation. 72, 92-102 (2004).</li><li>Drinjakovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E3+ligase+Nedd4+promotes+axon+branching+by+downregulating+PTEN.">E3 ligase Nedd4 promotes axon branching by downregulating PTEN.</a> Neuron. 65, 341-357 (2010).</li><li>Falk, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroporation+of+cDNA/Morpholinos+to+targeted+areas+of+embryonic+CNS+in+Xenopus.">Electroporation of cDNA/Morpholinos to targeted areas of embryonic CNS in Xenopus.</a> BMC. Dev. Biol. 7, 107-107 (2007).</li><li>Hewapathirane, D. S., Haas, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Cell+Electroporation+in+vivo+within+the+Intact+Developing+Brain.">Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain.</a> J. Vis. Exp. (17), e705-e705 (2008).</li><li>Kuriyama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tsukushi+controls+ectodermal+patterning+and+neural+crest+specification+in+Xenopus+by+direct+regulation.">Tsukushi controls ectodermal patterning and neural crest specification in Xenopus by direct regulation.</a> of BMP4 and X-delta-1 activity. Development. 133, 75-88 (2006).</li><li>Mende, M., Christophorou, N. A., Streit, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+and+effective+gene+knock-down+in+early+chick+embryos+using+morpholinos+but+not+pRFPRNAi+vectors.">Specific and effective gene knock-down in early chick embryos using morpholinos but not pRFPRNAi vectors.</a> Mech. Dev. 125, 947-962 (2008).</li><li>Neumann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+into+mouse+lyoma+cells+by+electroporation+in+high+electric+fields.">Gene transfer into mouse lyoma cells by electroporation in high electric fields.</a> Embo. J. 1, 841-845 (1982).</li><li>Price, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+motor+neuron+pool+sorting+by+differential+expression+of+type+II+cadherins.">Regulation of motor neuron pool sorting by differential expression of type II cadherins.</a> Cell. 109, 205-216 (2002).</li><li>Grossin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+gene+transfer+into+rat+articular+cartilage+by+in+vivo+electroporation.">Direct gene transfer into rat articular cartilage by in vivo electroporation.</a> Faseb. J. 17, 829-835 (2003).</li><li>Khoury, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+intra-articular+versus+systemic+gene+electrotransfer+in+experimental+arthritis.">A comparative study on intra-articular versus systemic gene electrotransfer in experimental arthritis.</a> J. Gene. Med. 8, 1027-1036 (2006).</li><li>Takahashi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+cathepsin+K+in+synovium+leads+to+progression+of+osteoarthritis+in+rabbits.">Down-regulation of cathepsin K in synovium leads to progression of osteoarthritis in rabbits.</a> Arthritis. Rheum. 60, 2372-2380 (2009).</li><li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Early Development of Xenopus laevis: A Laboratory Manual. , (2000).</li><li>Wheeler, G. N., Brandli, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+vertebrate+models+for+chemical+genetics+and+drug+discovery+screens:+lessons+from+zebrafish+and+Xenopus.">Simple vertebrate models for chemical genetics and drug discovery screens: lessons from zebrafish and Xenopus.</a> Dev. Dyn. 238, 1287-1308 (2009).</li><li>Turner, D. L., Weintraub, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+achaete-scute+homolog+3+in+Xenopus+embryos+converts+ectodermal+cells+to+a+neural+fate.">Expression of achaete-scute homolog 3 in Xenopus embryos converts ectodermal cells to a neural fate.</a> Genes. Dev. 8, 1434-1447 (1994).</li></ol>

Forfatterne har ingen interessekonflikt.

I denne video, har vi demonstreret gennemførligheden af elektroporation-medieret gen levering i ansigtet mesenchyme af Xenopus haletudser. Ved hjælp af denne metode, kan vi springe tidligt udviklingsmæssige effekter af at manipulere genfunktion giver os mulighed for at målrette specifikke væv på senere tidspunkter. Vores undersøgelser viser, at heterogene populationer af kraniofaciale mesenchymale celler kan blive berørt, hvilket giver os mulighed for at undersøge slægt electroporated celler samt celle selvstændige krav til proteiner af interesse. Kombineret med levende billeder, kan vi bruge denne fremgangsmåde til at studere genfunktion, over tid, i løbet af kraniofaciale udvikling. Denne nye metode fremhæver sporbarhed af Xenopus for studiet af organogenesen. Vi forventer, at denne metode generelt kan tilpasses til at studere morfogenese og differentiering af andre væv også.

A correction was made to <a href="http://http://www.jove.com/video/3381">Electroporation of Craniofacial Mesenchyme</a>. There was an incorrect unit used for the voltage.

Erratum: Electroporation of Craniofacial Mesenchyme

electroporation of craniofacial mesenchyme

Elektroporation er en effektiv metode til at levere DNA og andre opkrævet makromolekyler i væv på præcise tidspunkter og i præcise steder. For eksempel har elektroporation været brugt med stor succes til at studere neural og retinal udvikling i Xenopus, kylling og mus 1-10. Det er dog vigtigt at bemærke, at i alle disse studier blev efterforskerne ikke rettet mod bløde væv. Fordi vi er interesserede i kraniofacial udvikling, vi tilpasset en metode til at målrette ansigtet mesenchyme. Da vi søgte den litteratur, fandt vi til vores overraskelse, meget få rapporter om succesfulde genoverførsel i bruskspidserne væv. De fleste af disse undersøgelser blev genterapi undersøgelser, såsom siRNA eller protein levering i chondrogenic cellelinjer, eller dyremodeller af arthritis 11-13. I andre systemer, såsom kylling eller mus, elektroporation af ansigtets mesenchyme har været en udfordring (personlige KOMMUNIKATioner, Dept af kraniofaciale udvikling, KCL). Vi antager, at elektroporation ind procartilaginous og brusk væv i Xenopus kunne fungere bedre. I vores undersøgelser viser vi, at genoverførsel i ansigtet brusken sker effektivt på tidlige stadier (28), når ansigtet primordium stadig består af blødt væv før brusk differentiering. Xenopus er et meget tilgængeligt hvirveldyr system til analyse af kraniofaciale udvikling. Kraniofacial strukturer er lettere synlige i Xenopus end i nogen andre hvirveldyr model, primært fordi Xenopus embryoner er befrugtet eksternt, så analyser af de tidligste stadier, og lette bor billedbehandling på enkelt celle opløsning, samt genbrug af mødrene 14. Blandt hvirveldyr modeller udvikle eksternt, er Xenopus mere nyttigt for kraniofaciale analyse end zebrafisk, som Xenopus larver er større og nemmere at dissect, og udviklingslandene ansigtet regionen er mere tilgængelig for billeddannelse end det tilsvarende område i fisk. Desuden er Xenopus evolutionært tættere på mennesker end zebrafisk (~ 100 millioner år tættere) 15. Endelig, i disse faser, er Xenopus haletudser gennemsigtige, og samtidig udtryk for fluorescerende proteiner eller molekyler vil gør det let visualisering af udviklingslandene brusk. Vi forventer, at denne tilgang vil give os mulighed for hurtigt og effektivt at teste kandidat molekyler i en in vivo model system.

Watch this Scientific Journal Video about Electroporation of Craniofacial Mesenchyme at JoVE.com

Electroporation of Craniofacial Mesenchyme

Kraniofacial brusk udvikle sig i tæt kontakt med andre væv og er svære at manipulere med levende dyr. Vi anvender elektroporation til at levere molekylære værktøjer under væksten i den kraniofaciale skelettet, mens udenom tidlige embryonale effekter. Denne fremgangsmåde vil give os mulighed for effektivt at teste lægemiddelkandidaterne<em&gt; In vivo.</em

Elektroporation af kraniofaciale Mesenchyme

Electroporation is an efficient method of delivering DNA and other charged macromolecules into tissues at precise time points and in precise locations. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Electroporation of Mycobacteria

High efficiency transformation is a major limitation in the study of mycobacteria. The genus Mycobacterium can be difficult to transform; this is mainly ...

Assessing Signaling Properties of Ectodermal Epithelia During Craniofacial Development

The accessibility of avian embryos has helped experimental embryologists understand the fates of cells during development and the role of tissue ...

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

I Ovo Elektroporation i embryonisk Chick Retina

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

An Explant Assay for Assessing Cellular Behavior of the Cranial Mesenchyme

En Eksplantation Assay for vurdering Cellulær Behavior af Cranial mesenkym

The central nervous system is derived from the neural plate that undergoes a series of complex morphogenetic movements resulting in formation of the ...

Genome-wide Gene Deletions in Streptococcus sanguinis by High Throughput PCR

Genome-wide Gene Deletions in Streptococcus sanguinis by High Throughput PCR

Transposon  mutagenesis and single-gene deletion are two methods applied in genome-wide  gene knockout in bacteria 1,2. Although transposon mutagenesis is ...

Separation of Mouse Embryonic Facial Ectoderm and Mesenchyme

Adskillelse af muse embryonale Facial ektoderm og mesenkym

 Orofacial clefts are the most frequent  craniofacial defects, which affect 1.5 in 1,000 newborns worldwide1,2. Orofacial clefting is caused by abnormal ...

Visualization of Craniofacial Development in the sox10: kaede Transgenic Zebrafish Line Using Time-lapse Confocal Microscopy

Visualisering af kraniofaciale udvikling i sox10: Kaede Transgene zebrafisk linje ved hjælp af Time-lapse konfokal mikroskopi

Vertebrate palatogenesis is a highly choreographed and complex developmental process, which involves migration of cranial neural crest (CNC) cells, ...

Analyzing Craniofacial Morphogenesis in Zebrafish Using 4D Confocal Microscopy

Analyserer kraniofacial Morfogenese i zebrafisk Brug 4D konfokal mikroskopi

Time-lapse imaging is a technique that allows for the direct observation of the process of morphogenesis, or the generation of shape. Due to their optical ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

Alternative kulturer til human Pluripotente Stem Cell Produktion, vedligeholdelse og Genetisk analyse

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

Assessing Species-specific Contributions To Craniofacial Development Using Quail-duck Chimeras

Vurdere artsspecifikke bidrag til kraniofaciale Development Brug Quail-ænder kimærer

The generation of chimeric embryos is a widespread and powerful approach to study cell fates, tissue interactions, and species-specific contributions to ...