Name: two types of assays for detecting frog sperm chemoattraction
Uploaded: 2011-12-27T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction at JoVE.com

אנו מודים מעבדה קק WM bioimaging לשימוש של וידאו תחנת העבודה שלהם במיקרוסקופ. מחקר זה נתמך על ידי NSF מענק IBN-0615435.

1. חומרים המשמשים מאגרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מאגר Ringer של הביצית (1.5 x OR2) מכיל 124 mM NaCl, KCl mM 3.75, 1.5 mM CaCl 2, 1.5 מ&quot;מ MgCl 2, 1.5 mM Na 2 HPO 4, 10 Hepes מ&quot;מ, pH 7.8. מאגר הפריה (F-1) מכיל 41.25 mM NaCl, KCl mM 1.25, 0.25 mM CaCl 2, 0.06 mM MgCl 2, 0.5...

<ol>
	<li>Ward, G. E., Brokaw, C. J., Garbers, D. L., Vacquier, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemotaxis+of+Arbacia+punctulata+spermatozoa+to+resact,+a+peptide+from+the+egg+jelly+layer.">Chemotaxis of Arbacia punctulata spermatozoa to resact, a peptide from the egg jelly layer.</a> J. Cell Biol. 101, 2324-2329 (1985).</li><li>Olivera, R. G., Tomasi, L., Rovasio, R. A., Giojalas, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+velocity+and+induction+of+chemotactic+response+in+mouse+spermatozoa+by+follicular+and+oviductal+fluids.">Increased velocity and induction of chemotactic response in mouse spermatozoa by follicular and oviductal fluids.</a> J. Reprod. Fertil. 115, 23-27 (1999).</li><li>Fabro, G., Rovasio, R. A., Civalero, S., Frenkel, A., Caplan, S. R., Eisenbach, M., Giojalas, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemotaxis+of+capacitated+rabbit+spermatozoa+to+follicular+fluid+revealed+by+a+novel+directionality-based+assay.">Chemotaxis of capacitated rabbit spermatozoa to follicular fluid revealed by a novel directionality-based assay.</a> Biol. Reprod. 67, 1565-1571 (2002).</li><li>Sugiyama, H., Burnett, L., Xiang, X., Olson, J., Willis, S., Miao, A., Akema, T., Bieber, A. L., Chandler, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+and+multimer+formation+of+allurin,+a+sperm+chemoattractant+from+Xenopus+laevis+egg+jelly.">Purification and multimer formation of allurin, a sperm chemoattractant from Xenopus laevis egg jelly.</a> Mol. Reprod. Dev. 76, 527-536 (2009).</li><li>Al-Anzi, B., Chandler, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenopus+laevis+egg+jelly+releases+a+sperm+chemoattractant+during+spawning.">Xenopus laevis egg jelly releases a sperm chemoattractant during spawning.</a> Dev. Biol. 198, 366-375 (1998).</li><li>Ralt, D., Goldenberg, M., Fetterolf, P., Thompson, D., Dor, J., Mashiach, S., Garbers, D. L., Eisenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+attraction+to+a+follicular+factor(s)+correlates+with+human+egg+fertilizability.">Sperm attraction to a follicular factor(s) correlates with human egg fertilizability.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 88, 2840-2844 (1991).</li><li>Gakamsky, A., Schechtman, E., Caplan, S. R., Eisenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+chemotaxis+when+the+fraction+of+responsive+cells+is+small--application+to+mammalian+sperm+guidance.">Analysis of chemotaxis when the fraction of responsive cells is small--application to mammalian sperm guidance.</a> Int. J. Dev. Biol. 52, 481-487 (2008).</li><li>B&#246;hmer, M., Van, Q., Weyand, I., Hagen, V., Beyermann, M., Matsumoto, M., Hoshi, M., Hildebrand, E., Kaupp, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2++spikes+in+the+flagellum+control+chemotactic+behavior+of+sperm.">Ca2+ spikes in the flagellum control chemotactic behavior of sperm.</a> EMBO J. 24, 2741-2752 (2005).</li><li>Shiba, K., Baba, S. A., Inoue, T., Yoshida, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2++bursts+occur+around+a+local+minimal+concentration+of+attractant+and+trigger+sperm+chemotactic+response.">Ca2+ bursts occur around a local minimal concentration of attractant and trigger sperm chemotactic response.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 19312-19317 (2008).</li><li>Burnett, L. A., Sugiyama, H., Bieber, A. L., Chandler, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Egg+jelly+proteins+stimulate+directed+motility+in+Xenopus+laevis+sperm.">Egg jelly proteins stimulate directed motility in Xenopus laevis sperm.</a> Mol. Reprod. Dev. 78, 450-462 (2011).</li><li>Abaigar, T., Barbero, J., Holt, W. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trajectory+variance+and+autocorrelations+within+single+sperm+tracks+as+population+level+descriptors+of+sperm+track+complexity,+predictability+and+energy+generating+ability.">Trajectory variance and autocorrelations within single sperm tracks as population level descriptors of sperm track complexity, predictability and energy generating ability.</a> J. Androl. , (2011).</li><li>Mortimer, S. T., Swan, M. A., Mortimer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fractal+analysis+of+capacitating+human+spermatozoa.">Fractal analysis of capacitating human spermatozoa.</a> Hum. Reprod. 11, 1049-1054 (1996).</li><li>Guerrero, A., Carneiro, J., Pimentel, A., Wood, C. D., Corkidi, G., Darszon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+locating+the+female+gamete:+the+importance+of+measuring+sperm+trajectories+in+three+spatial+dimensions.">Strategies for locating the female gamete: the importance of measuring sperm trajectories in three spatial dimensions.</a> Mol. Hum. Reprod. 17, 511-523 (2011).</li><li>Yoshida, M., Yoshida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+chemotaxis+and+regulation+of+flagellar+movement+by+Ca2+.">Sperm chemotaxis and regulation of flagellar movement by Ca2+.</a> Mol. Hum. Reprod. 17, 457-465 (2011).</li><li>Spehr, M., Schwane, K., Riffell, J. A., Zimmer, R. K., Hatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant+receptors+and+olfactory-like+signaling+mechanisms+in+mammalian+sperm.Mol.">Odorant receptors and olfactory-like signaling mechanisms in mammalian sperm.Mol.</a> Cell. Endocrinol. 250, 128-136 (2006).</li><li>Veitinger, T., Riffell, J. R., Veitinger, S., Nascimento, J. M., Triller, A., Chandsawangbhuwana, C., Schwane, K., Geerts, A., Wunder, F., Berns, M. W., Neuhaus, E. M., Zimmer, R. K., Spehr, M., Hatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemosensory+Ca2++dynamics+correlate+with+diverse+behavioral+phenotypes+in+human+sperm.">Chemosensory Ca2+ dynamics correlate with diverse behavioral phenotypes in human sperm.</a> J. Biol. Chem. 286, 17311-17325 (2011).</li><li>Tholl, N., Naqvi, S., McLaughlin, E., Boyles, S., Bieber, A. L., Chandler, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swimming+of+Xenopus+laevis+sperm+exhibits+multiple+gears+and+its+duration+is+extended+by+egg+jelly+constituents.">Swimming of Xenopus laevis sperm exhibits multiple gears and its duration is extended by egg jelly constituents.</a> Biol. Bull. 220, 174-185 (2011).</li><li>Eisenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+chemotaxis.">Sperm chemotaxis.</a> Rev. Reprod. 4, 56-66 (1999).</li><li>Riffell, J. A., Zimmer, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+and+flow:+the+consequences+of+fluid+shear+for+sperm-egg+interactions.">Sex and flow: the consequences of fluid shear for sperm-egg interactions.</a> J. Exp. Biol. 210, 3644-3660 (2007).</li><li>Corkidi, G., Taboada, B., Wood, C. D., Guerrero, A., Darszon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+sperm+in+three-dimensions.">Tracking sperm in three-dimensions.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 373, 125-129 (2008).</li><li>Himes, J. E., Riffell, J. A., Zimmer, C. A., Zimmer, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+chemotaxis+as+revealed+with+live+and+synthetic+eggs.">Sperm chemotaxis as revealed with live and synthetic eggs.</a> Biol Bull. 220, 1-5 (2011).</li><li>Sun, F., Giojolas, L. C., Rovasio, R. A., Tur-Kaspa, I., Sanchez, R., Eisenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+species-specificity+in+mammalian+sperm+chemotaxis.">Lack of species-specificity in mammalian sperm chemotaxis.</a> Dev. Biol. 255, 423-427 (2003).</li><li>Guidobaldi, H. A., Teves, M. E., U&#241;ates, D. R., Anastas&#237;a, A., Giojalas, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progesterone+from+the+cumulus+cells+is+the+sperm+chemoattractant+secreted+by+the+rabbit+oocyte+cumulus+complex.">Progesterone from the cumulus cells is the sperm chemoattractant secreted by the rabbit oocyte cumulus complex.</a> PLoS One. 3, e3040-e3040 (2008).</li><li>Oren-Benaroya, R., Orvieto, R., Gakamsky, A., Pinchasov, M., Eisenbach, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sperm+chemoattractant+secreted+from+human+cumulus+cells+is+progesterone.">The sperm chemoattractant secreted from human cumulus cells is progesterone.</a> Hum. Reprod. 23, 2339-2345 (2008).</li><li>Teves, M. E., Guidobaldi, H. A., U&#241;ates, D. R., Sanchez, R., Miska, W., Publicover, S. J., Morales Garcia, A. A., Giojalas, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanism+for+human+sperm+chemotaxis+mediated+by+progesterone.">Molecular mechanism for human sperm chemotaxis mediated by progesterone.</a> PLoS One. 4, 8211-82 (2009).</li><li>Blengini, C. S., Teves, M. E., Uñates, D. R., Guidobaldi, H. A., Gatica, L. V., Giojalas, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+sperm+pattern+of+movement+during+chemotactic+re-orientation+towards+a+progesterone+source.">Human sperm pattern of movement during chemotactic re-orientation towards a progesterone source.</a> Asian J. Androl. 13, 769-773 (2011).</li><li>Strünker, T., Goodwin, N., Brenker, C., Kashikar, N. D., Weyand, I., Seifert, R., Kaupp, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CatSper+channel+mediates+progesterone-induced+Ca2++influx+in+human+sperm.">The CatSper channel mediates progesterone-induced Ca2+ influx in human sperm.</a> Nature. 471, 382-386 (2011).</li><li>Lishko, P. V., Botchkina, I. L., Kirichok, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progesterone+activates+the+principal+Ca2++channel+of+human+sperm.">Progesterone activates the principal Ca2+ channel of human sperm.</a> Nature. 471, 387-391 (2011).</li><li>Boyden, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemotactic+effect+of+mixtures+of+antibody+and+antigen+on+polymorphonuclear+leucocytes.">The chemotactic effect of mixtures of antibody and antigen on polymorphonuclear leucocytes.</a> J. Exp. Med. 115, 453-465 (1962).</li><li>Zigmond, S. H., Lauffenburger, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+of+leukocyte+chemotaxis.">Assays of leukocyte chemotaxis.</a> Annu. Rev. Med. 37, 149-155 (1986).</li><li>Villanueva-Diaz, C., Vadillo-Ortega, F., Kably-Ambe, A., Diaz-Pérez, M. A., Krivitzky, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+that+human+follicular+fluid+contains+a+chemoattractant+for+spermatozoa.">Evidence that human follicular fluid contains a chemoattractant for spermatozoa.</a> Fertil. Steril. 54, 1180-1182 (1990).</li><li>Villanueva-Diaz, C., Arizs-Martinez, J., Bermejo-Martinez, L., Vadillo-Ortega, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progesterone+induces+human+sperm+chemotaxis.">Progesterone induces human sperm chemotaxis.</a> Fertil. Steril. 64, 1183-1188 (1995).</li><li>Olson, J., Xiang, X., Ziegert, T., Kittleson, A., Rawls, A., Bieber, A., Chandler, D. E. A. l. l. u. r. i. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=a+21+kD+sperm+chemoattractant+from+Xenopus+egg+jelly,+is+homologous+to+mammalian+sperm-binding+proteins.">a 21 kD sperm chemoattractant from Xenopus egg jelly, is homologous to mammalian sperm-binding proteins.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 11205-11210 (2001).</li></ol>

Chemotaxis של תאים על ידי העברת תנועה או amoeboid או שוטונים המופעל השחייה נמצא בהקשרים ביולוגיים רבים במחקר של תופעה זו מחייבת את הזמינות של מבחני מעשי ואמין. כמה דוגמאות של התופעה, כגון משיכה של זרע ביצה קיפודי ים או כינוס של תאים עובש רפש להקים גוף הפרי, יש השפעה ויזואלית מי?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם פריט </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> 24 גם צלחות </td><td> בקטון, דיקנסון </td><td> 35/1147 </td><td></td></tr><tr><td> 12 מ&quot;מ קוטר מוסיף החיצוני עם קרום 12 מיקרומטר נקבוביות </td><td> Millipore </td><td> PIXP01250 </td><td> השתמשנו בעבר שחקן המשנה, קורנינג צלחת transwell # 3403, כעת הופסק </td></tr><tr><td> Zigmond קאמרית </td><td> Neuroprobe </td><td> Z02 </td><td></td></tr><tr><td> שמן סיליקון </td><td> ג&#39;נרל אלקטריק </td><td> SF1154 </td><td> שווה נוזלים דאו קורנינג 550 </td></tr><tr><td> תמונה J תוכנה </td><td> וויין Rasband, שירותי מחקר ענף, המכון הלאומי לבריאות הנפש </td><td> הורדה חינם ב http://rsbweb.nih.gov/ij </td><td> Java התוכנית פועלת על Windows, ליןUX ו-Mac </td></tr><tr><td> MtrackJ תוכנה </td><td> אריק Meijering / Imagescience / <a href="http://www.bigr.nl/">ביו קבוצה דימות</a> , Erasmus MC - מהמרכז הרפואי של אוניברסיטת רוטרדם </td><td> הורדה חינם ב <a href="http://www.imagescience.org/meijering/software/mtrackj/">http://www.imagescience.org/meijering/software/mtrackj/</a> </td><td> תוכנית Java שפועל על Windows, Linux ו-Mac </td></tr><tr><td> תוכנת Virtual Dub </td><td> <a href="http://www.virtualdub.org/gpl.html">GNU General Licensed אישי</a> תוכנה </td><td> הורדה חינם דרך <a href="http://www.virtualdub.org/index.html">http://www.virtualdub.org/index.html</a> </td><td> הוראות ההתקנה באתר תמונה J תחת plugins; עבור Windows בלבד </td></tr><tr><td> cellSens תוכנה </td><td> אולימפוס </td><td> ראה אתר: <a href="http://www.olympusamerica.com/seg_section/product.asp?product=1070">http://www.olympusamerica.com/seg_section/p</a>roduct.asp? מוצר = 1070 </td><td> בקרות רוכש תמונות ממגוון רחב של מצלמות. יש גם יכולת עיבוד תמונה </td></tr></tbody></table>

two types of assays for detecting frog sperm chemoattraction

Chemoattraction זרע חסרי חוליות יכולים להיות חזקים מספיק שאפשר במקום טפטפת המכיל את פפטיד אטרקטיבי לתוך ההשעיה זרע מיקרוסקופית לדמיין הצטברות זרע סביב פיפטה 1. Chemoattraction זרע בעלי חוליות כגון צפרדעים, מכרסמים ובני אדם קשה יותר לזהות דורש מבחני כמותי. מבחני אלה שני סוגים עיקריים - מבחני כי לכמת תנועה זרע למקור של chemoattractant, שנקרא הצטברות מבחני זרע, מבחני שבעצם המסלול מסלולי השחייה של זרע בודדים. הצטברות מבחני זרע עשרות המאפשר מהיר יחסית או מאות מבחני להיעשות ביום אחד, ובכך לאפשר תגובה מינון עקומות וקורסים זמן להתבצע במהירות יחסית. אלו סוגים של מבחני נעשה שימוש נרחב כדי לאפיין רבים מערכות chemoattraction מבוססת היטב - לדוגמה, chemotaxis נויטרופילים כדי BACפפטידים terial ו chemotaxis זרע בנוזל הזקיקים. מעקב מבחני זרע יכול להיות עבודה יותר אינטנסיבית אבל להציע נתונים נוספים על אופן chemoattractancts למעשה לשנות את נתיבי שחייה לקחת זרע. סוג זה של assay יש צורך להוכיח את הכיוון של תנועת הזרע יחסית לציר שיפוע chemoattrractant וכדי להמחיש פונה מאפיין או שינויים בכיוון זה להביא את הזרע קרוב יותר אל הביצית. כאן אנו מתארים את השיטות של כל אחד אלה שני סוגים של מבחני. הצטברות זרע assay מנוצל נקרא &quot;שתי קאמרית&quot; assay. זרע דוחי ממוקמים להכניס תרבות צלחת רקמה עם רצפת פוליקרבונט בעל מסנן בקוטר 12 מיקרומטר הנקבוביות. הוספת עם זרע ממוקמים בתוך התרבות רקמות בארות צלחת ובה חיץ chemoatttractant pipetted בזהירות לתוך קרקעית הבאר שבו הרצפה פוגש את הקיר (ראו איור. 1). לאחר דגירה, להכניס העליון המכיל את מאגר הזרע בזהירות removed, והזרע בתא התחתון שעברו דרך הממברנה מוסרים, pelleted וספר מכן על ידי hemocytometer או cytometer לזרום. Assay מעקב זרע מנצל קאמרית Zigmond שפותחה במקור עבור התבוננות chemotaxis נויטרופילים ואת שונה להסתכלות על ידי הזרע של Giojalas ועמיתים לעבודה 2,3. תא מורכב שקופית זכוכית עבה שלתוכו שתי שקתות אנכי כבר במכונה. אלה מופרדים באמצעות פלטפורמה 1 תצפית רחב מ&quot;מ. לאחר היישום של זרע זכוכית, מכסים נטענים לתוך השוקת אחד, סוכן chemoattractant לתוך השני התנועה של הזרע במיקרוסקופ על ידי הפרט דמיינו וידאו. קטעי וידאו מנותח ולאחר מכן באמצעות תוכנה לזיהוי דו מימדי תנועות תא במישור xy כפונקציה של זמן (xyt ערכות נתונים) היוצרות את המסלול של כל הזרע.

Watch this Scientific Journal Video about Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction at JoVE.com

Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction

ביצים ציפוי תאית סביב ביצים לעתים קרובות שחרור פפטידים, חלבונים ומולקולות קטנות אשר לתקשר עם זרע כדי להנחות אותם אל הביצה ובכך לקדם את ההפריה. שימוש בזרע צפרדע אנו מתארים ולהשוות שני מעמדות של מבחני לשמש כדי לזהות chemoattraction זרע - הצטברות זרע מבחני ומעקב מבחני הזרע.

שני סוגים של מבחני עבור Chemoattraction גילוי זרע צפרדע

Sperm chemoattraction in invertebrates can be sufficiently robust that one can place a pipette containing the attractive peptide into a sperm suspension ...

Research

JoVE Journal

Biology

Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

קצירת הזרע והזרעה מלאכותית של עכברים

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila

Neurocircuit Assays for Seizures in Epilepsy Mutants of Drosophila

Neurocircuit מבחני עבור התקפים של אפילפסיה של מוטאנטים תסיסנית</em

Drosophila melanogaster is a useful tool for studying seizure like activity. A variety of mutants in which seizures can be induced through either physical ...

A High-Throughput Method For Zebrafish Sperm Cryopreservation and In Vitro Fertilization

A High-Throughput Method For Zebrafish Sperm Cryopreservation and In Vitro Fertilization

שיטת תפוקה גבוהה עבור cryopreservation זרע דג הזברה במבחנה הפריה

This is a method for zebrafish sperm cryopreservation that is an adaptation of the Harvey method (Harvey et al., 1982).  We have introduced two changes to ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

טכניקות הדמיה Ca 2 + איתות זרע אנושי

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Analysis of Schwann-astrocyte Interactions Using In Vitro Assays

Analysis of Schwann-astrocyte Interactions Using In Vitro Assays

ניתוח של שוואן-astrocyte אינטראקציות שימוש במבחנה מבחני

Schwann cells are one of the commonly used cells in repair strategies following spinal cord injuries. Schwann cells are capable of supporting axonal ...

Extraction of Tissue Antigens for Functional Assays

הפקת אנטיגנים רקמות למבחנים פונקציונליים

Many of the antigen targets of adaptive immune response, recognized by B and T cells, have not been defined 1. This is particularly true in autoimmune ...

Assessing Differences in Sperm Competitive Ability in Drosophila

Assessing Differences in Sperm Competitive Ability in Drosophila

הבדלי שומה ביכולת תחרותית בזרע<em&gt; דרוזופילה</em

Competition among conspecific males for fertilizing the ova is one of the mechanisms of sexual selection, i.e. selection that operates on maximizing the ...

Viability Assays for Cells in Culture

מבחני כדאיות לתאים בתרבית

Manual cell counts on a microscope are a sensitive means of assessing cellular viability but are time-consuming and therefore expensive. Computerized ...

Development of an Insert Co-culture System of Two Cellular Types in the Absence of Cell-Cell Contact

פיתוח של מערכת כנס עמית התרבות שני סוגים סלולריים בהעדר לתקשר Cell-Cell

The role of secreted soluble factors in the modification of cellular responses is a recurrent theme in the study of all tissues and systems. In an attempt ...

Fish Sperm Assessment Using Software and Cooling Devices

הערכת זרע דגים באמצעות תוכנה, התקני קירור

For gamete quality evaluation, there are innovative, rapid, and quantitative techniques that can provide useful data for aquaculture. Computerized systems ...