Name: transretinal erg recordings from mouse retina: rod and cone photoresponses
Uploaded: 2012-03-14T13:00:00
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실명을 방지하기 위해 연구에서 경력 개발 상을 지원, NIH 보조금 EY19312 및 EY19543 (VJK)뿐만 아니라 실명과 EY02687을 (워싱턴 대학에서 안과 및 Visual 과학 계열) 방지하기위한 연구에서 제한없이 부여함으로써.

1. 전극을 만들기 <ol><li> 유리 전극을 준비합니다. 120 MG 한천 배지의 무게를 10 ML 증류수 (최종 한천 농도 1.2 %)에 섞는다. 온수 욕조에서 한천 솔루션을 용융. 플라스틱 주사기를 사용하여 한천 솔루션 : 유리 모세관 (길이 = 100mm, OD / ID = 1/0.75 mm, 내부 부피 = 44 μL 우리는 다음과 같은 차원으로 TW100-4 모세관 워드 Presision 악기 사용) 입력합니다. 10 분 상온에서 한천을 고체화. 따라서, 최대 ~ 200 모세 ?...

<ol>
	<li>Yau, K. W., Lamb, T. D., Baylor, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-induced+fluctuations+in+membrane+current+of+single+toad+rod+outer+segments.">Light-induced fluctuations in membrane current of single toad rod outer segments.</a> Nature. 269, 78-80 (1977).</li><li>Nikonov, S. S., Kholodenko, R., Lem, J., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+features+of+the+S-+and+M-cone+photoreceptors+of+wild-type+mice+from+single-cell+recordings.">Physiological features of the S- and M-cone photoreceptors of wild-type mice from single-cell recordings.</a> J. Gen. Physiol. 127, 359-374 (2006).</li><li>Nymark, S., Heikkinen, H., Haldin, C., Donner, K., Koskelainen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+responses+and+light+adaptation+in+rat+retinal+rods+at+different+temperatures.">Light responses and light adaptation in rat retinal rods at different temperatures.</a> J. Physiol. 567, 923-938 (2005).</li><li>Heikkinen, H., Nymark, S., Koskelainen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cone+photoresponses+obtained+with+electroretinogram+from+the+isolated+retina.">Mouse cone photoresponses obtained with electroretinogram from the isolated retina.</a> Vision Res. 48, 264-272 (2008).</li><li>Frank, R. N., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodopsin+photoproducts:+effects+on+electroretinogram+sensitivity+in+isolated+perfused+rat+retina.">Rhodopsin photoproducts: effects on electroretinogram sensitivity in isolated perfused rat retina.</a> Science. 161, 487-489 (1968).</li><li>Wang, J. S., Kefalov, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+pathway+mediates+the+mouse+and+human+cone+visual+cycle.">An alternative pathway mediates the mouse and human cone visual cycle.</a> Curr. Biol. 19, 1665-1669 (2009).</li><li>Kolesnikov, A. V., Tang, P. H., Parker, R. O., Crouch, R. K., Kefalov, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mammalian+cone+visual+cycle+promotes+rapid+M/L-cone+pigment+regeneration+independently+of+the+interphotoreceptor+retinoid-binding+protein.">The mammalian cone visual cycle promotes rapid M/L-cone pigment regeneration independently of the interphotoreceptor retinoid-binding protein.</a> J. Neurosci. 31, (2011).</li><li>Calvert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototransduction+in+transgenic+mice+after+targeted+deletion+of+the+rod+transducin+alpha+-subunit.">Phototransduction in transgenic mice after targeted deletion of the rod transducin alpha -subunit.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97, 13913-13918 (2000).</li><li>Applebury, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+murine+cone+photoreceptor:+a+single+cone+type+expresses+both+S+and+M+opsins+with+retinal+spatial+patterning.">The murine cone photoreceptor: a single cone type expresses both S and M opsins with retinal spatial patterning.</a> Neuron. 27, 513-523 (2000).</li><li>Sillman, A. J., Ito, H., Tomita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+mass+receptor+potential+of+the+isolated+frog+retina.+I.+General+properties+of+the+response.">Studies on the mass receptor potential of the isolated frog retina. I. General properties of the response.</a> Vision Res. 9, 1435-1442 (1969).</li><li>Vinberg, F., Koskelainen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+sets+the+physiological+value+of+the+dominant+time+constant+of+saturated+mouse+rod+photoresponse+recovery.">Calcium sets the physiological value of the dominant time constant of saturated mouse rod photoresponse recovery.</a> PLoS One. 5, e13025-e13025 (2010).</li><li>Bolnick, D. A., Walter, A. E., Sillman, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barium+suppresses+slow+PIII+in+perfused+bullfrog+retina.">Barium suppresses slow PIII in perfused bullfrog retina.</a> Vision Res. 19, 1117-1119 (1979).</li></ol>

막대와 원뿔 중심 transretinal 에르그 녹음의 방법은 야생 유형 및 유전자 변형 동물 모두에서 마우스 photoreceptors의 기능을 조사하는 강력한 도구되고 위에서 설명한. 기본 photoresponse 속성의 쉬운 특성뿐만 아니라,이 간단한 기술은 가까운 - 투 - 그대로 망막의 준비에서 수행 오랫동안 실험을하는 동안 좋은 반응 안정성을 제공합니다. 야생 형 마우스의 어두운 적응로드 최대한의 응답 진폭과 photosen...

<table border="1"><tbody><tr><td> 자재 명칭 </td><td> 유형 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 논평 </td></tr><tr><td> DL-AP-4 </td><td></td><td> bioscience TOCRIS </td><td> 0101 </td><td></td></tr><tr><td> 기타 모든 시약 </td><td></td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 유리 모세관 </td><td></td><td> 세계 정밀 계측기 </td><td> TW100-4 </td><td> 전극을 만들기위한 </td></tr><tr><td> 필터 종이 </td><td> HARG </td><td> Millipore </td><td> HABG01300 </td><td></td></tr><tr><td> 광도계 </td><td></td><td> UDT 인 스트 루먼트 </td><td> S350 </td><td> 가벼운 교정을 위해 </td></tr><tr><td> Radiometric 실리콘 센서 </td><td></td&gt; <td> UDT 인 스트 루먼트 </td><td> 221 </td><td> 가벼운 교정을 위해 </td></tr><tr><td> 방진 테이블 </td><td></td><td> 기술 제조 주식 회사 </td><td> TMC 78-239-02R, TMC63-26012-01 </td><td> 기계적 소음을 최소화하려면 </td></tr><tr><td> 공기 압축기 팬더 P 15TC </td><td></td><td> Werther 국제 </td><td> P 15TC </td><td> 방진 테이블에 연결 </td></tr><tr><td> Stereomicroscope </td><td></td><td> LEICA </td><td> MZ9.5 </td><td> 마우스 눈 절개에 대한 </td></tr><tr><td> 적외선 이미지 컨버터 </td><td></td><td> BEMeyers </td><td> ProwlerTM </td><td> stereomicroscope에 바인딩 </td></tr><tr><td> 차동 증폭기 DP-311 </td><td></td><td> 워너 인 스트 루먼트 </td><td> DP-311 </td><td></td></tr><tr><td> 축삭 Digidata 1440A 디지타이저 </td><td>; </td><td> 분자 장치 </td><td> 1440A </td><td></td></tr><tr><td> 듀얼 채널 8 극 필터 </td><td></td><td> KROHN-HITE 주식 회사 </td><td> 3382 </td><td></td></tr><tr><td> 세라믹 저항 </td><td></td><td> TE 연결 </td><td> CGS SBCHE618RJ </td><td> 재관류 솔루션을 재가열에 대한 </td></tr><tr><td> 열전대 </td><td> 티 </td><td> Physitemp 인 스트 루먼트 </td><td> IT-18 </td><td></td></tr><tr><td> 온도 모니터 </td><td></td><td> 오메가 </td><td> DPi32 </td><td> 열전대에 연결됨 </td></tr><tr><td> LED가 505 nm의 </td><td></td><td> TT 전자 / Optek 기술 </td><td> Digi-키 P / N 365-1185-ND </td><td> 테스트 섬광 / 표백 라이트를 적용하려면 </td></tr><tr><td> 소작 펜 </td><td></td><td> Bovie </td><td> AA25 </td><td> 지느러미 부분을 마킹에 대한마우스 안구의 </td></tr><tr><td> 10 전기 생리학 데이터 수집 및 분석 소프트웨어를 pCLAMP </td><td></td><td> 분자 장치 </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

transretinal erg recordings from mouse retina: rod and cone photoresponses

막대와 원뿔 : 척추 망막에있는 이미지 성형 photoreceptors의 두 개의 클래스가 있습니다. 콘 빠르게 밝은 빛 조건을 변경 하에서 지속적으로 작동 반면 막대는 빛의 단일 광자를 감지할 수 있습니다. photoreceptors의 외부 세그먼트의 막대 및 원뿔 특정 시각 색소에 의한 빛의 흡수는 결국 플라즈마 막과 세포 hyperpolarization에 주기적 염기 - 게이트 채널의 폐쇄에 이르게 phototransduction 층계를 트리거합니다. 현재 및 잠재적인 멤브레인이 빛을 유도된 변화는 역시 클래식 흡입 전극 녹음 기술의 1,2이나 pharmacologically 차단 postsynaptic 응답 구성 요소 3-5과 격리된 망막에서 transretinal electroretinogram 레코딩 (에르그)에 의해, photoresponse로 등록하실 수 있습니다. 후자의 방법은 마우스 photoreceptors에서 약물 액세스할 지속적인 녹음이 가능하고 안정적​​인 photoresponses에게 금을 얻기 위해 특히 유용톰 부족하고 연약한 마우스 콘. 원뿔의 경우, 그러한 실험은 어두운 적응 6,7 동안 원뿔 photosensitivity 복구 과정을 모니터링하는 모두 본질적으로 모든 시각 색소 표백제로 닦았을 어두운 적응 조건과 다음과 같은 강렬한 조명으로 수행할 수 있습니다. 이 동영상에서 우리는 어두운 적응 마우스 망막에서 막대와 M / L, 원추 중심 transretinal 녹음을 수행하는 방법을 보여줍니다. 로드 녹음은 야생 유형 (C57Bl / 6) 생쥐의 망막을 사용하여 수행됩니다. 8 신호 막대 부족 생쥐. 단순 들어, 원뿔 음반은 유전자 변형로드 transducin에서 α-subunit 녹아웃 (- - / Tα) 얻을 것이다

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Transretinal ERG Recordings from Mouse Retina: Rod and Cone Photoresponses

우리는 그대로 마우스 망막에서 막대와 원뿔 photoresponses를위한 transretinal electroretinogram (에르그) 레코딩 비교적 간단한 방법을 설명합니다. 이 방법은 자신의 가벼운 반응을 분리하고 분리된 평면 마운트 망막에 걸쳐 배치 필드 전극을 사용하여 그들을 기록하는 photoreceptors에서 시냅스 전송 블록의 활용합니다.

마우스 망막에서 Transretinal 에르그 레코딩 :로드 및 원뿔 Photoresponses

There are two distinct classes of image-forming photoreceptors in the vertebrate retina: rods and cones. Rods are able to detect single photons of light ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings from Mouse Retinal Neurons in a Dark-adapted Slice Preparation

어두운 적응 슬라이스 준비에 마우스 망막 뉴런에서 패치 클램프 레코딩

Our visual experience is initiated when the visual pigment in our retinal photoreceptors absorbs photons of light energy and initiates a cascade of ...

연구

신경과학

In vivo Electroporation of Developing Mouse Retina

In vivo Electroporation of Developing Mouse Retina

개발 마우스 망막의 생체내 Electroporation에

The functional characterization of genes expressed during mammalian retinal development remains a significant challenge.  Gene targeting to generate ...

Assessment of Vascular Regeneration in the CNS Using the Mouse Retina

마우스 망막을 사용하여 중추 신경계의 혈관 재생의 평가

The rodent retina is perhaps the most accessible mammalian system in which to investigate neurovascular interplay within the central nervous system (CNS). ...

Vibratome Sectioning Mouse Retina to Prepare Photoreceptor Cultures

에 vibratome 단면 마우스 망막 광 수용체의 문화를 준비하는 방법

The retina is a part of the central nervous system that has organized architecture, with neurons in layers from the photoreceptors, both rods and cones in ...

Imaging Ca2+ Dynamics in Cone Photoreceptor Axon Terminals of the Mouse Retina

Imaging Ca2+ Dynamics in Cone Photoreceptor Axon Terminals of the Mouse Retina

이미징 CA<sup&gt; 2 +</sup마우스 망막의 광 수용체 콘 축삭 터미널에서&gt; 역학

Retinal cone photoreceptors (cones) serve daylight vision and are the basis of color discrimination. They are subject to degeneration, often leading to ...

Where You Cut Matters: A Dissection and Analysis Guide for the Spatial Orientation of the Mouse Retina from Ocular Landmarks

어디 당신이 문제: 한 해 부 자르고 눈 랜드마크에서 마우스 망막의 공간적 방향에 대 한 분석 가이드

Accurately and reliably identifying spatial orientation of the isolated mouse retina is important for many studies in visual neuroscience, including the ...

Noninvasive EEG Recordings from Freely Moving Piglets

자유롭게 이동 Piglets에서 비 침 투 적인 뇌 파 기록

The method allows the recording of high-quality electroencephalograms (EEGs) from freely moving piglets directly in the pigpen. We use a one-channel ...

Transpupillary Two-Photon In Vivo Imaging of the Mouse Retina

경동공 이광자 마우스 망막의 생체 내 이미징

The retina transforms light signals from the environment into electrical signals that are propagated to the brain. Diseases of the retina are prevalent ...

Cone-Enriched Cultures from the Retina of Chicken Embryos to Study Rod to Cone Cellular Interactions

닭 배아망막에서 콘 세포 상호 작용에 로드를 연구하는 원뿔 농축 배양

Human daytime vision relies on the function of cone photoreceptors at the center of the retina, the fovea. Patients suffering from the most prevalent form ...

In Vivo Vascular Injury Readouts in Mouse Retina to Promote Reproducibility

In Vivo Vascular Injury Readouts in Mouse Retina to Promote Reproducibility

생체 내 재현성 촉진을 위한 마우스 망막의 혈관 손상 판독

Advancements in ophthalmic imaging tools offer an unprecedented level of access to researchers working with animal models of neurovascular injury. To ...