Name: rnai-mediated gene knockdown and in vivo diuresis assay in adult female aedes aegypti mosquitoes
Uploaded: 2012-07-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes at JoVE.com

लेखक इस प्रोटोकॉल के उसके महत्वपूर्ण टिप्पणियों के लिए विक्टोरिया बढ़ई धन्यवाद.

वयस्क एडीज aegypti मच्छरों में आरएनएआई की मध्यस्थता जीन पछाड़ना - भाग मैं. प्रयोग सिंहावलोकन के लिए चित्रा 1 देखें. 1. dsRNA संश्लेषण <ol><li> के ब्याज और नियंत्रण dsRNAs के जीन के खिलाफ विशिष्ट dsRNAs synthesize....

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	<li>Drake, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Aquaporin+gene+family+of+the+yellow+fever+mosquito,+Aedes+aegypti.">The Aquaporin gene family of the yellow fever mosquito, Aedes aegypti.</a> PloS one. 5, e15578 (2010).</li><li>Shepard, A. R., Jacobson, N., Clark, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+quantitative+PCR+primer+location+for+short+interfering+RNA+efficacy+determination.">Importance of quantitative PCR primer location for short interfering RNA efficacy determination.</a> Analytical biochemistry. 344, 287-288 (2005).</li><li>Altschul, S. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+protein+produced+by+the+vitellogenic+fat+body+and+accumulated+in+mosquito+oocytes.">A novel protein produced by the vitellogenic fat body and accumulated in mosquito oocytes.</a> Development Genes and Evolution. 199, 114-121 (1990).</li></ol>

आरएनएआई इस्तेमाल किया प्रोटोकॉल के कैलिफोर्निया रिवरसाइड 6,7 विश्वविद्यालय में सिकंदर Raikhel की प्रयोगशाला में विकसित किया गया है और गार्वर और 4 Dimopoulos के द्वारा प्रकाशित प्रोटोकॉल के समान है. प्रयो...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक या उपकरण के नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियाँ </td></tr><tr><td> MEGAscript T7 हाई यील्ड किट </td><td> Ambion इंक, </td><td> AM1334 </td><td></td></tr><tr><td> पीबीएस बफर </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> P4417 </td><td></td></tr><tr><td> प्लास्टिक टयूबिंग </td><td> स्थानीय विक्रेता </td><td></td><td> पीवीसी </td></tr><tr><td> 1 मिलीग्राम प्लास्टिक विंदुक टिप </td><td> VWR </td><td> 83007-376 </td><td> ब्लू टिप </td></tr><tr><td> 1 मिलीलीटर सिरिंज </td><td> Becton डिकिंसन और कंपनी </td><td> 309,602 </td><td></td></tr><tr><td> कैंची </td><td> स्थानीय विक्रेता </td><td></td><td></td></tr><tr><td> धातु सुई </td><td> कैरोलिना बायोलॉजिकल </td><td> 654,307 </p&gt; <td> 5 आकार </td></tr><tr><td> पैड उड़ना </td><td> Genesee वैज्ञानिक </td><td> 789,060 </td><td></td></tr><tr><td> बैटरी चालित चूषित्र शीशी w / संग्रह </td><td> उपमा लैब्स </td><td> 2000 IPMM </td><td></td></tr><tr><td> ठीक टिप संदंश </td><td> दुनिया प्रेसिजन उपकरण </td><td> 14,095 </td><td></td></tr><tr><td> कांच की केशिका सुई </td><td> दुनिया प्रेसिजन उपकरण </td><td> 1B200 - 6 </td><td></td></tr><tr><td> स्टीरियो विच्छेदन खुर्दबीन </td><td> Leica माइक्रोसिस्टम्स </td><td> S6D </td><td></td></tr><tr><td> विश्लेषणात्मक परिशुद्धता संतुलन </td><td> Mettler Toledo </td><td> AB54S </td><td></td></tr><tr><td> Sucrose </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 84,097 </td><td></td></tr><tr><td> एक पिंट पंक्तिवाला गत्ता कप लच्छेदार </td><td> स्थानीय विक्रेता </td><td></td><td> निर्मित सूप कप </td></tr><tr><td> मेष शुद्ध </td><td> स्थानीय विक्रेता </td><td></td><td> प्लास्टिक उड़ धुंध के </td></tr></tbody></table>

rnai-mediated gene knockdown and in vivo diuresis assay in adult female aedes aegypti mosquitoes

यह वीडियो प्रोटोकॉल के लिए एक कीट में एक विशेष जीन को पछाड़ना और उत्सर्जन की दर को मापने के लिए एक उपन्यास bioassay आचरण के लिए एक प्रभावी तकनीक को दर्शाता है. इस विधि के लिए कीड़ों में एक मूत्राधिक्य की प्रक्रिया की एक बेहतर समझ प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और रक्त खिला आर्थ्रोपोडा है कि एक एक रक्त भोजन में तरल पदार्थ की भारी मात्रा में लेने में सक्षम हैं में मूत्राधिक्य के अध्ययन में विशेष रूप से उपयोगी है. यह आरएनएआई की मध्यस्थता जीन पछाड़ना vivo मूत्राधिक्य परख में एक के साथ संयुक्त Hansen के प्रयोगशाला द्वारा विकसित किया गया था एडीज aegypti मच्छर 1 मूत्राधिक्य पर aquaporin जीन पछाड़ना आरएनएआई की मध्यस्थता के प्रभाव का अध्ययन. प्रोटोकॉल दो भागों में सेटअप है: पहला प्रदर्शन दिखाता है कि कैसे एक साधारण मच्छर इंजेक्शन युक्ति का निर्माण करने के लिए और कैसे तैयार करने और आरएनएआई की मध्यस्थता जीन पछाड़ना के लिए dsRNA इंजेक्षन मच्छरों की छाती में है. दूसरी प्रदर्शन दिखाता है कि कैसे निर्धारित करने के लिएvivo bioassay में एक का उपयोग मच्छरों में उत्सर्जन की दर.

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RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

इस प्रोटोकॉल में हम एक साथ आरएनएआई की मध्यस्थता जीन मुंह गठबंधन<em&gt; Vivo में</em&gt; मूत्राधिक्य परख के लिए ब्याज की जीन के प्रभाव का अध्ययन पछाड़ना मच्छर तरल पदार्थ उत्सर्जन पर है.

आरएनएआई की मध्यस्थता जीन मारकर गिरा दिया और<em&gt; Vivo में</emवयस्क महिला में diuresis परख<em&gt; एडीज aegypti</em&gt; मच्छरों

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Research

JoVE Journal

Biology

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

Injection of dsRNA into Female A. aegypti Mosquitos

DsRNA की स्त्री ए aegypti Mosquitos में इंजेक्शन

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

Microinjection of A. aegypti Embryos to Obtain Transgenic Mosquitoes

ए aegypti भ्रूण के Microinjection ट्रांसजेनिक मच्छरों प्राप्त

In this video, Nijole Jasinskiene demonstrates the methodology employed to generate transgenic Aedes aegypti mosquitoes, which are vectors for dengue ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

डेंगू संक्रमण के लिए मच्छरों (ए aegypti) और संक्रमण Phenotype निर्धारण में प्रोटोकॉल

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Dissection of Midgut and Salivary Glands from Ae. aegypti Mosquitoes

ऐ से midgut और लार की गिल्टी के विच्छेदन. aegypti मच्छरों

The mosquito midgut and salivary glands are key entry and exit points for pathogens such as Plasmodium parasites and Dengue viruses. This video protocol ...

RNAi Mediated Gene Knockdown and Transgenesis by Microinjection in the Necromenic Nematode Pristionchus pacificus

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Although it is increasingly affordable for emerging model organisms to obtain completely sequenced genomes, further in-depth gene function and expression ...

Using SecM Arrest Sequence as a Tool to Isolate Ribosome Bound Polypeptides

SECM गिरफ्तार अनुक्रम एक ribosome बाध्य polypeptides पृथक उपकरण के रूप में का उपयोग

Extensive research has provided ample evidences suggesting that protein folding in the cell is a co-translational process1-5. However, the exact pathway ...

In Vivo SiRNA Transfection and Gene Knockdown in Spinal Cord via Rapid Noninvasive Lumbar Intrathecal Injections in Mice

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चूहे में रैपिड अवेध्य काठ intrathecal इंजेक्शन के माध्यम से विवो siRNA अभिकर्मक और रीढ़ की हड्डी में जीन पछाड़ना में

This report describes a step-by-step guide to the technique of acute intrathecal needle injections in a noninvasive manner, i.e. independent of catheter ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

एडीज Aegyptiमें वसा शरीर अंग संस्कृति प्रणाली, Zika वायरस के एक वेक्टर

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Wolbachia से संक्रमित एडीज aegypti मच्छरों को बनाए रखने

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates (EAgaL Plates)

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates

24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेटें (EAgaL प्लेटें) का उपयोग कर एडीज एजिप्टी के लिए बेहतर Fecundity और प्रजनन परख

Mosquitoes represent a significant public health problem as vectors of various pathogens. For those studies that require an assessment of mosquito fitness ...