Name: visualization of vascular ca2+ signaling triggered by paracrine derived ros
Uploaded: 2011-12-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح (R01 HL086699 ، HL086699 - 01A2S1 ، 1S10RR027327 - 01) إلى MM. معتمد جزئيا مقالتنا التي Microimaging كارل زايس م.

ويمكن قياس أنواع الاكسجين التفاعلية في الخلايا الحية باستخدام الأصباغ الأكسدة الحساسة (1 و 2) أو باستخدام أجهزة استشعار البلازميد (3 و 4) من جانب المجهري متحد البؤر. 1. تصور ريوس عصاري خلوي في الخلايا J774 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style...

<ol>
	<li>Madesh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+role+for+superoxide+in+InsP3+receptor-mediated+mitochondrial+dysfunction+and+endothelial+apoptosis.">Selective role for superoxide in InsP3 receptor-mediated mitochondrial dysfunction and endothelial apoptosis.</a> J. Cell. Biol. 170, 1079-1090 (2005).</li><li>Droge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radicals+in+the+physiological+control+of+cell+function.">Free radicals in the physiological control of cell function.</a> Physiol. Rev. 82, 47-95 (2002).</li><li>Hamanaka, R. B., Chandel, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+reactive+oxygen+species+regulate+cellular+signaling+and+dictate+biological+outcomes.">Mitochondrial reactive oxygen species regulate cellular signaling and dictate biological outcomes.</a> Trends Biochem. Sci. 35, 505-513 .</li><li>Hawkins, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S-glutathionylation+activates+STIM1+and+alters+mitochondrial+homeostasis.">S-glutathionylation activates STIM1 and alters mitochondrial homeostasis.</a> J. Cell. Biol. 190, 391-405 (2010).</li><li>Madesh, M., Hajnoczky, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VDAC-dependent+permeabilization+of+the+outer+mitochondrial+membrane+by+superoxide+induces+rapid+and+massive+cytochrome+c+release.">VDAC-dependent permeabilization of the outer mitochondrial membrane by superoxide induces rapid and massive cytochrome c release.</a> J. Cell Biol. 155, 1003-1015 (2001).</li><li>Finkel, T., Holbrook, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidants+oxidative+stress+and+the+biology+of+ageing.">Oxidants oxidative stress and the biology of ageing.</a> Nature. 408, 239-247 (2000).</li><li>Rittirsch, D., Flierl, M. A., Ward, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harmful+molecular+mechanisms+in+sepsis.">Harmful molecular mechanisms in sepsis.</a> Nat. Rev. Immunol. 8, 776-787 (2008).</li><li>Sanlioglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide+induces+Rac1-dependent+reactive+oxygen+species+formation+and+coordinates+tumor+necrosis+factor-alpha+secretion+through+IKK+regulation+of+NF-kappa.">Lipopolysaccharide induces Rac1-dependent reactive oxygen species formation and coordinates tumor necrosis factor-alpha secretion through IKK regulation of NF-kappa.</a> 276, 30188-30198 (2001).</li><li>Hawkins, B. J., Madesh, M., Kirkpatrick, C. J., Fisher, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superoxide+flux+in+endothelial+cells+via+the+chloride+channel-3+mediates+intracellular+signaling.">Superoxide flux in endothelial cells via the chloride channel-3 mediates intracellular signaling.</a> Mol. Biol. Cell. 18, 2002-2012 (2007).</li><li>Vliet, A. v. a. n. d. e. r. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NADPH+oxidases+in+lung+biology+and+pathology:+host+defense+enzymes+and+more.">NADPH oxidases in lung biology and pathology: host defense enzymes and more.</a> Free Radic. Biol. Med. 44, 938-955 (2008).</li><li>Babior, B. M., Kipnes, R. S., Curnutte, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+defense+mechanisms.+The+production+by+leukocytes+of+superoxide,+a+potential+bactericidal+agent.">Biological defense mechanisms. The production by leukocytes of superoxide, a potential bactericidal agent.</a> J. Clin. Invest. 52, 741-744 (1973).</li><li>Lambeth, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NOX+enzymes+and+the+biology+of+reactive+oxygen.">NOX enzymes and the biology of reactive oxygen.</a> Nat. Rev. Immunol. 4, 181-189 (2004).</li><li>Mukhopadhyay, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+detection+of+apoptosis+and+mitochondrial+superoxide+production+in+live+cells+by+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Simultaneous detection of apoptosis and mitochondrial superoxide production in live cells by flow cytometry and confocal microscopy.</a> Nat. Protoc. 2, 2295-2301 (2007).</li><li>Niethammer, P., Grabher, C., Look, A. T., Mitchison, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tissue-scale+gradient+of+hydrogen+peroxide+mediates+rapid+wound+detection+in+zebrafish.">A tissue-scale gradient of hydrogen peroxide mediates rapid wound detection in zebrafish.</a> Nature. 459, 996-999 (2009).</li><li>Medzhitov, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptors+and+innate+immunity.">Toll-like receptors and innate immunity.</a> Nat. Rev. Immunol. 1, 135-145 (2001).</li></ol>

وصف طريقة القياس هنا يسمح السريع وكمية من أنواع الاكسجين التفاعلية في الخلايا الحية إما باستخدام الأصباغ الأكسدة حساسة أو أجهزة الاستشعار البلازميد. منبهات من TLRs (مثل مستقبلات تول) هي المركبات التي تحفز الخلايا من خلال TLRs موجودة على سطح الخلية وتحريك مسارات إشارات ا...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> Attofluor الخلية الغرفة </td><td> Invitrogen </td><td> A7816 </td></tr><tr><td> Antimycin A </td><td> سيغما الدريتش </td><td> A8674 </td></tr><tr><td> DMEM المتوسطة انخفاض الجلوكوز </td><td> Invitrogen </td><td> 10567-014 </td></tr><tr><td> عامل النمو البطاني تكملة (رسم القلب) </td><td> ريف </td><td> 02-102 </td></tr><tr><td> المصل البقري الجنين </td><td> Invitrogen </td><td> 12662011 </td></tr><tr><td> G418 </td><td> Invitrogen </td><td> 10131-027 </td></tr><tr><td> الجيلاتين </td><td> سيغما الدريتش </td><td> G1393 </td></tr><tr><td> H 2 DCFDA </td><td> Invitrogen </td><td> D - 399 </td></tr><tr><td> LPS </td><td> سيغما الدريتش </td><td> L4516 </td></tr><tr><td> LTA </td><td> سيغما الدريتش </td><td> L2515 </td></tr><tr><td> MitoSOX الأحمر </td><td> Invitrogen </td><td> M36008 </td></tr><tr><td> OPTI - MEM أنا انخفاض متوسط ​​المصل </td><td> Invitrogen </td><td> 51985091 </td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا (10X) </td><td> Invitrogen </td><td> 15140163 </td></tr><tr><td> pHyPer - خلوي </td><td> Evrogen </td><td> FP941 </td></tr><tr><td> pHyPer - dMito </td><td> Evrogen </td><td> FP942 </td></tr><tr><td> بولي (I : C) </td><td> سيغما الدريتش </td><td> P0913 </td></tr><tr><td> المنشور 5.0 البرمجيات </td><td> GraphPad البرمجيات ، وشركة </td><td></td></tr><tr><td> SigmaPlot 11.0 </td><td> Systat البرمجيات ، المؤتمر الوطني العراقي. </td><td></td></tr><tr><td> التربسين - EDTA (10X) </td><td> Invitrogen </td><td> 15400054 </td></tr><tr><td> T - 25 قوارير </td><td> كورنينج </td><td> 430639 </td></tr><tr><td> T - 75 قوارير </td><td> فالكون دينار بحريني </td><td> 353136 </td></tr><tr><td> 96 - T جيداC الصغرى لوحة جيدا </td><td> فالكون دينار بحريني </td><td> 353072 </td></tr><tr><td> زن 2009 البرمجيات </td><td> كارل زايس المجهري ميتا 510 مبائر </td><td></td></tr></tbody></table>

visualization of vascular ca2+ signaling triggered by paracrine derived ros

وقد تورط الاكسدة في عدد من الظروف المرضية بما في ذلك نقص التروية / ضخه الأضرار والتسمم. مفهوم الاكسدة يشير إلى تشكيل الشاذة من ريوس (أنواع الاكسجين التفاعلية) ، والتي تشمل • O 2 -- ، H 2 O 2 ، وجذور الهيدروكسيل. أنواع الاكسجين التفاعلية التأثيرات العديد من العمليات الخلوية بما في ذلك نقل الإشارة ، وانتشار الخلايا وموت الخلايا 1-6. ROS لديها القدرة على الأوعية الدموية وتلف خلايا الجهاز مباشرة ، ويمكن الشروع في التفاعلات الكيميائية الثانوية والتعديلات الوراثية التي تؤدي في نهاية المطاف في التضخيم من الأضرار الأولية بوساطة نسيج ريوس. ومن المكونات الرئيسية لتتالي التضخيم الذي لا رجعة فيه تفاقم تلف الأنسجة هو توظيف وتفعيل تعميم الخلايا الالتهابية. أثناء الالتهاب ، وإنتاج السيتوكينات الالتهابية الخلايا مثل نخر الورم عامل α (TNFα) ، وأنه IL - 1تنشيط الخلايا البطانية (EC) والخلايا الظهارية ، وكذلك زيادة 7 الاستجابة الالتهابية. خلل بطانة الأوعية الدموية هي ميزة أنشئت من التهاب حاد. الضامة تساهم في اختلال وظيفي التهاب بطانة خلال الآليات التي لا تزال غامضة. تفعيل نتائج الضامة خارج الخلايا في الإفراج عن O 2 • -- والعديد من السيتوكينات الموالية للالتهابات ، والتي يطلق إشارات مرضية في الخلايا المجاورة 8. oxidases NADPH هي المصدر الرئيسي والأساسي للروس في معظم أنواع الخلايا. في الآونة الأخيرة ، فإنه يظهر من قبلنا وغيرها 9،10 ريوس أن تنتجها oxidases NADPH تحفز إنتاج ريوس الميتوكوندريا خلال ظروف الفيزيولوجية المرضية كثيرة. وبالتالي قياس إنتاج ريوس الميتوكوندريا هي نفس القدر من الأهمية ، بالإضافة إلى قياس عصاري خلوي ريوس. الضامة تنتج ريوس من NADPH أوكسيديز انزيم بروتين فلافيني الذي يلعب دورا رئيسيا في التهاب. تنشيط مرة واحدة ،NADPH أوكسيديز أكلة تنتج كميات وفيرة من O 2 • -- التي تعتبر مهمة في الآلية الدفاعية للمضيف 11،12. على الرغم من نظير الصماوي المستمدة من O 2 • -- يلعب دورا هاما في التسبب في أمراض الأوعية الدموية ، والتصور من الإشارات التي يسببها ريوس نظير الصماوي الخلايا بما في ذلك تعبئة كا 2 + لا تزال الفرضية. وقد طورنا نموذجا والتي تستخدم في تنشيط البلاعم كمصدر لل• O 2 -- لتنبيغ إشارة إلى الخلايا البطانية المجاورة. باستخدام هذا النموذج الذي يثبت أن بلعم المستمدة من O 2 • -- أن يؤدي إلى إشارات الكالسيوم في الخلايا البطانية المجاورة.

Watch this Scientific Journal Video about Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS at JoVE.com

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

وصفت وسيلة فعالة للحصول على نظرة ثاقبة الرؤية والاستقراء ريوس نظير الصماوي المستمدة من البطانية إشارة + CA2. هذا الأسلوب يستفيد من قياس نظير الصماوي ريوس المستمدة أثار CA2 + تعبئة الخلايا البطانية في الأوعية الدموية في نموذج شارك في الثقافة.

تصور كا الأوعية الدموية 2 + اشارة سببها ريوس المشتقة نظير الصماوي

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

Research

JoVE Journal

Biology

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

تقنيات التصوير كاليفورنيا 2 + في اشارة الى الحيوانات المنوية البشرية

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Visualization of ATP Synthase Dimers in Mitochondria by Electron Cryo-tomography

التصور من ATP سينسيز Dimers في الميتوكوندريا بواسطة الكترون البرد المقطعي

Electron cryo-tomography is a powerful tool in structural biology, capable of visualizing the three-dimensional structure of biological samples, such as ...

Automated Analysis of Dynamic Ca2+ Signals in Image Sequences

Automated Analysis of Dynamic Ca2+ Signals in Image Sequences

التحليل الآلي من ديناميك كا<sup&gt; 2 +</sup&gt; إشارات في تسلسلات الصور

Intracellular Ca2+ signals are commonly studied with fluorescent Ca2+ indicator dyes and microscopy techniques. However, quantitative analysis of Ca2+ ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

DiI Perfusion as a Method for Vascular Visualization in Ambystoma mexicanum

DiI Perfusion as a Method for Vascular Visualization in Ambystoma mexicanum

الجاذبة الإرواء كطريقة لتصور الأوعية الدموية في<em&gt; أمبيستوما ميكسيكانوم</em

Perfusion techniques have been used for centuries to visualize the circulation of tissues. Axolotl (Ambystoma mexicanum) is a species of salamander that ...

Visualization of DNA Compaction in Cyanobacteria by High-voltage Cryo-electron Tomography

التصور للضغط الحمض النووي في البكتيريا الزرقاء بالتصوير المقطعي الفولت العالي Cryo-إلكترون

This protocol describes how to visualize the transient DNA compaction in cyanobacteria. DNA compaction is a dramatic cytoplasmic event recently found to ...

Retinal Cryo-sections, Whole-Mounts, and Hypotonic Isolated Vasculature Preparations for Immunohistochemical Visualization of Microvascular Pericytes

البرد الشبكية-الفروع، الجامع--يتصاعد، والتحضيرات ناقص التوتر المفرج معزولة للتصور المناعي من بيريسيتيس ميكروفاسكولار

Retinal pericytes play an important role in many diseases of the eye. Immunohistochemical staining techniques of retinal vessels and microvascular ...

A Proximal Culture Method to Study Paracrine Signaling Between Cells

أسلوب ثقافة الدانية لدراسة Paracrine الإشارات بين الخلايا

Intercellular interactions play an important role in many biological processes, including tumor progression, immune responses, angiogenesis, and ...

Myeloid Innate Signaling Pathway Regulation by MALT1 Paracaspase Activity

تنظيم مسار الإشارات الفطرية النقوي بنشاط باراكاسباسي MALT1

Besides its function in lymphoid cells, which has been addressed by numerous studies, the paracaspase MALT1 also plays an important role in innate cells ...

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

Applications of Spatio-temporal Mapping and Particle Analysis Techniques to Quantify Intracellular Ca2+ Signaling In Situ

تطبيقات رسم الخرائط الزمانية وتقنيات تحليل الجسيمات للتحديد الكمي لداخل الخلية Ca2 + إشارات في الموقع

Ca2+ imaging of isolated cells or specific types of cells within intact tissues often reveals complex patterns of Ca2+ signaling. This activity requires ...