Name: modeling and imaging 3-dimensional collective cell invasion
Uploaded: 2011-12-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion at JoVE.com

التمويل لهذا البحث من معهد أبحاث السرطان في المملكة المتحدة.

1. فيروسات توسيم الخلايا مع البروتينات الفلورية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحة الخلايا التغليف فيروسات (مثل فينيكس) من الخلايا عند 0.25 س 6 10 لكل بئر من 6 جيدا طبق في مصل بقري جنيني 10 ٪ (FBS) / DMEM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Transfect خ?...

<ol>
	<li>Olson, M. F., Sahai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+actin+cytoskeleton+in+cancer+cell+motility.">The actin cytoskeleton in cancer cell motility.</a> Clin. Exp. Metastasis. 26, 273-287 (2008).</li><li>Hoelzinger, D. B., Demuth, T., Berens, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autocrine+factors+that+sustain+glioma+invasion+and+paracrine+biology+in+the+brain+microenvironment.">Autocrine factors that sustain glioma invasion and paracrine biology in the brain microenvironment.</a> J. Natl. Cancer. Inst. 99, 1583-1593 (2007).</li><li>Chaffer, C. L., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+perspective+on+cancer+cell+metastasis.">A perspective on cancer cell metastasis.</a> Science. 331, 1559-1564 (2011).</li><li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Hallmarks+of+Cancer.">The Hallmarks of Cancer.</a> Cell. 100, 57-70 (2000).</li><li>Francia, G., Cruz-Munoz, W., Man, S., Xu, P., Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+advanced+spontaneous+metastasis+for+experimental+therapeutics.">Mouse models of advanced spontaneous metastasis for experimental therapeutics.</a> Nat. Rev. Cancer. 11, 135-141 (2011).</li><li>Hooper, S., Marshall, J. F., Sahai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+cell+migration+in+three+dimensions.">Tumor cell migration in three dimensions.</a> Methods. Enzymol. 406, 625-643 (2006).</li><li>Croft, D. R., Olson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulating+the+conversion+between+rounded+and+elongated+modes+of+cancer+cell+movement.">Regulating the conversion between rounded and elongated modes of cancer cell movement.</a> Cancer Cell. 14, 349-351 (2008).</li><li>Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-step+pericellular+proteolysis+controls+the+transition+from+individual+to+collective+cancer+cell+invasion.">Multi-step pericellular proteolysis controls the transition from individual to collective cancer cell invasion.</a> Nat. Cell. Biol. 9, 893-904 (2007).</li><li>Hennigan, R. F., Hawker, K. L., Ozanne, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fos-transformation+activates+genes+associated+with+invasion.">Fos-transformation activates genes associated with invasion.</a> Oncogene. 9, 3591-3600 (1994).</li><li>Scott, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LIM+kinases+are+required+for+invasive+path+generation+by+tumor+and+tumor-associated+stromal+cells.">LIM kinases are required for invasive path generation by tumor and tumor-associated stromal cells.</a> J. Cell. Biol. 191, 169-185 (2010).</li></ol>

تقليديا المقايسات غزو Matrigel إعداد مع الخلايا يوضع فوقه طبقة من البروتين المصفوفة خارج الخلية مع جاذب كيميائي بفعل حركية وصوب من خلال مرشح في القاع. وسجل الغزو بوصفها وظيفة من عدد الخلايا يمكن أن تحسب على الجانب السفلي من التصفية. بالرغم من وجود فارق كبير من الناحية ال?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><th> اسم الكاشف </th><th> شركة </th><th> فهرس العدد </th></tr><tr><td> DMEM (متوسطة Dulbecco في التعديل النسر) </td><td> GIBCO </td><td> 21969 </td></tr><tr><td> المصل البقري الجنين </td><td> PAA </td><td> A15 - 101 </td></tr><tr><td> البنسلين الستربتوميسين </td><td> GIBCO </td><td> 15140 </td></tr><tr><td> L - 200 ملي الجلوتامين (100X) </td><td> GIBCO </td><td> 25050-032 </td></tr><tr><td> بوروميسين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P8833 </td></tr><tr><td> 0.05 ٪ التربسين EDTA </td><td> GIBCO </td><td> 25300 </td></tr><tr><td> Polybrene </td><td> سيغما الدريخ </td><td> AL - 118 </td></tr><tr><td> Lipofectamine الكاشف 2000 </td><td> Invitrogen </td><td> 11668019 </td></tr><tr><td> 6.5mm Transwells ، 8.0 ميكرون حجم المسام </td><td> كورنينج </td><td> 3422 </td></tr><tr><td> إكمال Matrigel </td><td> العلوم البيولوجية دينار بحريني </td><td> 354234 </td></tr> &lt;TR&gt; <td> Calcein AM </td><td> Invitrogen </td><td> C1430 </td></tr><tr><td> ريبونوكلياز </td><td> Qiagen </td><td> 19101 </td></tr><tr><td> Propidium التأيد </td><td> سيغما الدريخ </td><td> P4864 </td></tr><tr><td> مبائر microcope </td><td> لايكا </td><td> SP2MP </td></tr></tbody></table>

modeling and imaging 3-dimensional collective cell invasion

ومن الخصائص المميزة للخباثة السرطان هو الغزو والانبثاث 1. في بعض أنواع السرطان (ه ز. دبقي 2) ، والغزو المحلية في الأنسجة السليمة المحيطة هي السبب الجذري للمرض والموت. لأنواع أخرى من السرطان (ه ز. الثدي والرئة ، الخ.) ، فإنه هو عملية الانبثاث ، والتي تحرك الخلايا السرطانية من الورم الرئيسي الشامل ، استعمار المواقع البعيدة وتساهم في نهاية المطاف إلى فشل الجهاز ، الذي يؤدي في النهاية إلى الإصابة بالأمراض و 3 وفيات. وقد قدر أن الغزو والانبثاث هي المسؤولة عن 90 ٪ من الوفيات الناجمة عن السرطان 4. نتيجة لذلك ، كان هناك اهتمام كبير في تحديد العمليات الجزيئية وسطاء البروتين حرجة من الغزو والانبثاث لأغراض التشخيص والعلاج وتحسين 5. وثمة تحد للعلماء السرطان هو تطوير المقايسات الغزو الذي يشابه الوضع بما فيه الكفاية في الجسم الحيلتمكين دقة النمذجة المرض 6. ثنائي الأبعاد المقايسات حركية الخلية ليست سوى بالمعلومات عن جانب واحد من الغزو ولا تأخذ في الاعتبار إعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلية البروتين (ECM) التي هي أيضا عنصرا حاسما. في الآونة الأخيرة ، وقد صقلت الأبحاث فهمنا لغزو الخلايا السرطانية وكشف ان الخلايا الفردية قد تحرك من جانب وسائط مستطيلة أو مستديرة 7. بالإضافة إلى ذلك ، كان هناك مزيد من التقدير لمساهمة الغزو الجماعي ، التي تغزو الخلايا في صحائف ، وفروع ومجموعات ، وخصوصا في الأورام المتباينة للغاية التي تحافظ على الخصائص الظهارية ، إلى انتشار مرض السرطان 8. نقدم اتباع أسلوب دقيق 9 لدراسة مساهمات من البروتينات المرشحة لغزو الجماعي 10. ولا سيما عن طريق الهندسة حمامات منفصلة للتعبير عن خلايا البروتينات الفلورية مختلفة ، فمن الممكن أن تشريح جزيئيا الأنشطة وproteiنانوثانية المطلوبة في الخلايا مما يؤدي مقابل تلك المطلوبة في الخلايا التالية. استخدام رني يوفر أداة لتفكيك الجزيئية تجريبيا العمليات التي ينطوي عليها غزو الخلايا الفردية ، وكذلك في مواقع مختلفة من الغزو الجماعي. في هذا الإجراء ، هي خليط من الخلايا مطلي fluorescently التي تحمل علامات على الجزء السفلي من ادخال Transwell شغلها سابقا مع البروتين ECM Matrigel ، ثم سمح لغزو &quot;صعودا&quot; من خلال تصفية والى Matrigel. إعادة بناء مداخن صورة ض السلسلة ، التي حصلت عليها مبائر التصوير ، إلى ثلاثة الابعاد تتيح للتمثيلات تصور جماعي فروع الغازية وتحليل تمثيل الخلايا fluorescently ذات العلامات الرائدة في مقابل المواقف التالية.

Watch this Scientific Journal Video about Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion at JoVE.com

Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion

نماذج لغزو الخلايا السرطانية في ثلاثي الأبعاد المصفوفة خارج الخلية تعكس على نحو أفضل<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; الوضع من المقايسات حركية ثنائية الأبعاد. ويمكن استخدام المقايسات غزو مصفوفة جنبا إلى جنب مع التصوير مبائر من الخلايا التي تحمل علامات fluorescently معلومات مفصلة عن أوضاع الغزو ومساهمات متميزة من كبار التالية مقابل الحصول على الخلايا.

النمذجة والتصوير 3 الأبعاد غزو الخلية الجماعية

A defining characteristic of cancer malignancy is invasion and metastasis 1. In some cancers (e.g. glioma 2), local invasion into surrounding healthy ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

متعدد الفوتون التصوير من غزو خلايا الورم في الفأر نموذج مثلي الفم سرطان الخلايا الحرشفية

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Spheroid Assay to Measure TGF-&#946;-induced Invasion

Spheroid Assay to Measure TGF-ÃƒÅ½Ã‚Â²-induced Invasion

كروي الفحص لقياس TGF - β بفعل الغزو

TGF-&beta; has opposing roles in breast cancer progression by acting as a tumor suppressor in the initial phase, but stimulating invasion and metastasis ...

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

الأبعاد 3-صب الراتنج والتصوير من الوريد البابي داخل الكبد أو ماوس نظام القناة الصفراوية

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Molecular Imaging to Target Transplanted Muscle Progenitor Cells

التصوير الجزيئي لاستهداف زرع الخلايا الاصلية العضلات

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe genetic neuromuscular disorder that affects 1 in 3,500 boys, and is characterized by progressive muscle ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

جيل والكميات 3-الأبعاد من الآفات الشرياني في الفئران عن طريق الإسقاط الضوئي المقطعي

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

Molecular Profiling of the Invasive Tumor Microenvironment in a 3-Dimensional Model of Colorectal Cancer Cells and Ex vivo Fibroblasts

Molecular Profiling of the Invasive Tumor Microenvironment in a 3-Dimensional Model of Colorectal Cancer Cells and Ex vivo Fibroblasts

التنميط الجزيئي للالمكروية ورم الغازية في نموذج 3 الأبعاد للخلايا سرطان القولون والمستقيم و<em&gt; خارج الحي</em&gt; الخلايا الليفية

Invading colorectal cancer (CRC) cells have acquired the capacity to break free from their sister cells, infiltrate the stroma, and remodel the ...

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

والتعديل<em&gt; في المختبر</em&gt; الغزو الفحص لتحديد الدور المحتمل للالهرمونات، السيتوكينات و / أو عوامل النمو في التوسط السرطان غزو الخلايا

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the ...

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma (mRCC) in Mice Following Nephrectomy

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma mRCC in Mice Following Nephrectomy

النمذجة العفوي النقيلي سرطان الخلايا الكلوية (مركز تنسيق الانقاذ البحري) في الفئران بعد استئصال الكلية

One of the key challenges to improved testing of new experimental therapeutics in renal cell carcinoma (RCC) is the development of models that faithfully ...

Isolation and Immortalization of Patient-derived Cell Lines from Muscle Biopsy for Disease Modeling

العزلة وتخليد خطوط الخلايا المشتقة من المريض من خزعة العضلات لمرض النمذجة

The generation of patient-specific cell lines represents an invaluable tool for diagnostic or translational research, and these cells can be collected ...

A Cancer Cell Spheroid Assay to Assess Invasion in a 3D Setting

خلية السرطان كروي الفحص لتقييم الغزو في إعداد 3D

The invasive nature of cancer cell lines is thought to correlate with their metastatic potential.  Most traditional assays, however, do not examine these ...