Name: modeling and imaging 3-dimensional collective cell invasion
Uploaded: 2011-12-07T13:00:00
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이 연구에 대한 자금은 암 연구 영국에서이다.

1. 형광 단백질과 세포의 Retroviral 라벨링 <ol><li> 0.25 X 10 6 세포에 따라 잘 6 잘 밖으로 플레이트 retroviral 포장 셀 (예 : 피닉스) 10% 태아 소 혈청 (FBS) / DMEM에 요리. </li><li> 48시간 나중에 retroviral DNA와 Transfect 세포 세포는 제조 업체의 지시에 따라 Effectene를 사용하여. </li><li> 나중에 중간 24시간로 두 번 우물 린스 후 10% 잘마다 FBS / DMEM의 1.5 ML를 추가합니다. </li><li> pipettin...

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	<li>Olson, M. F., Sahai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+actin+cytoskeleton+in+cancer+cell+motility.">The actin cytoskeleton in cancer cell motility.</a> Clin. Exp. Metastasis. 26, 273-287 (2008).</li><li>Hoelzinger, D. B., Demuth, T., Berens, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autocrine+factors+that+sustain+glioma+invasion+and+paracrine+biology+in+the+brain+microenvironment.">Autocrine factors that sustain glioma invasion and paracrine biology in the brain microenvironment.</a> J. Natl. Cancer. Inst. 99, 1583-1593 (2007).</li><li>Chaffer, C. L., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+perspective+on+cancer+cell+metastasis.">A perspective on cancer cell metastasis.</a> Science. 331, 1559-1564 (2011).</li><li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Hallmarks+of+Cancer.">The Hallmarks of Cancer.</a> Cell. 100, 57-70 (2000).</li><li>Francia, G., Cruz-Munoz, W., Man, S., Xu, P., Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+advanced+spontaneous+metastasis+for+experimental+therapeutics.">Mouse models of advanced spontaneous metastasis for experimental therapeutics.</a> Nat. Rev. Cancer. 11, 135-141 (2011).</li><li>Hooper, S., Marshall, J. F., Sahai, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+cell+migration+in+three+dimensions.">Tumor cell migration in three dimensions.</a> Methods. Enzymol. 406, 625-643 (2006).</li><li>Croft, D. R., Olson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulating+the+conversion+between+rounded+and+elongated+modes+of+cancer+cell+movement.">Regulating the conversion between rounded and elongated modes of cancer cell movement.</a> Cancer Cell. 14, 349-351 (2008).</li><li>Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multi-step+pericellular+proteolysis+controls+the+transition+from+individual+to+collective+cancer+cell+invasion.">Multi-step pericellular proteolysis controls the transition from individual to collective cancer cell invasion.</a> Nat. Cell. Biol. 9, 893-904 (2007).</li><li>Hennigan, R. F., Hawker, K. L., Ozanne, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fos-transformation+activates+genes+associated+with+invasion.">Fos-transformation activates genes associated with invasion.</a> Oncogene. 9, 3591-3600 (1994).</li><li>Scott, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LIM+kinases+are+required+for+invasive+path+generation+by+tumor+and+tumor-associated+stromal+cells.">LIM kinases are required for invasive path generation by tumor and tumor-associated stromal cells.</a> J. Cell. Biol. 191, 169-185 (2010).</li></ol>

Matrigel의 침공 assays는 전통적으로 chemoattractant 유발 운동성와 세포외 기질 단백질의 레이어로하고 하단에있는 필터를 통해 배치 전지로 설정되었습니다. Invasiveness는 필터의 아래쪽에 계산 될 수 얼마나 많은 세포의 기능으로 득점했다. 위에서 설명한 &quot;반전&quot;침략 분석과 함께 약간의 차이가 거의가 있지만, 그들이 Matrigel 통해 이동하고 침입 세포를 시각화하여 확인할 수 침략의 프로세스에...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> DMEM (Dulbecco의 변형 이글 배지) </td><td> GIBCO </td><td> 21,969 </td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> PAA </td><td> A15 - 101 </td></tr><tr><td> 페니실린의 스트렙토 마이신 </td><td> GIBCO </td><td> 15,140 </td></tr><tr><td> 200 MM L - 글루타민 (100x) </td><td> GIBCO </td><td> 25050-032 </td></tr><tr><td> Puromycin </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> P8833 </td></tr><tr><td> 0.05 % 트립신 EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> GIBCO </td><td> 25,300 </td></tr><tr><td> Polybrene </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> AL - 118 </td></tr><tr><td> Lipofectamine 2,000 시약 </td><td> Invitrogen </td><td> 11668019 </td></tr><tr><td> 6.5mm Transwells, 8.0 μm의 기공 크기 </td><td> 코닝 </td><td> 3422 </td></tr><tr><td> 완료 Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354,234 </td></tr> &lt;TR&gt; <td> Calcein AM </td><td> Invitrogen </td><td> C1430 </td></tr><tr><td> RNase </td><td> Qiagen </td><td> 19,101 </td></tr><tr><td> Propidium 요오드화물의 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> P4864 </td></tr><tr><td> 공촛점 microcope </td><td> Leica </td><td> SP2MP </td></tr></tbody></table>

modeling and imaging 3-dimensional collective cell invasion

암 강한 악의의 정의 특징은 침략과 전이 1입니다. 일부 암 (E. g. glioma 2) 건강한 조직을 주변에 지방 침공에서 질환과 사망의 근본 원인입니다. 다른 암에 대한 (E. g. 유방, 폐, 등.) 그것이 종양 세포가 일차 종양 질량의 이동 말초 사이트를 식민지 궁극적으로 기관 고장에 기여하는, 전이의 과정입니다, 그건 결국 병적 상태에 이르게하고 사망률 3. 그것은 침략과 전이는 암 사망자 4의 90 %에 대한 책임 것으로 추정되었습니다. 그 결과, 개선 진단과 치료 5 목적에 대한 분자 프로세스와 침략과 전이의 중요한 단백질 중재자을 식별에 강렬한 관심이있다. 암 과학자에 대한 도전은 충분히의 생체내 상황과 유사한 침공 assays을 개발하는 것입니다정확한 질병 모델링 6 설정하려면 다음과 같이하십시오. 2 차원 세포 운동성의 assays은 침략의 유익에 대해서만 부분입니다 또한 중요한 요소이다 계정 세포외 기질 (ECM) 단백질 리모델링 고려하지 않습니다. 최근 연구는 종양 세포 침공에 대한 우리의 이해를 세련되고 각 세포는 길쭉한 또는 반올림 모드 7 이동할 수 밝혔다. 또한, 암 8 확산에 특히 상피 특성을 유지하는 것을 매우 차별화된 종양의 세포가 긴, 시트와 클러스터로 나눠야하는 공동 침략의 기여보다 감사를,,, 거기되었습니다. 우리는 집단 침략 10 후보 단백질의 공헌을 조사를위한 세련된 방법 9 현재. 특히, 다른 형광 단백질을 표현하는 세포 공학 별도의 수영장으로, 그것은 molecularly 활동과 protei을 해부하다 할 수 있습니다NS는 다음과 세포에 필요한 그 간의 주요 세포에 필요합니다. RNAi의 사용은 실험적으로 개별 셀 침공뿐 아니라 공동 침략의 다른 위치에 관련된 프로세스를 분해하는 분자 도구를 제공합니다. 이 절차에서는 찬란 - 레이블 세포의 혼합물은 이전 Matrigel ECM 단백질 가득 Transwell 삽입의 하단에 도금되어 다음 필터를 통하여 Matrigel에 &quot;이상&quot;을 침공 수있었습니다. 입체 표현으로, 공촛점 이미징에서 얻은 Z 시리즈 이미지 스택의 재건 위치를 선도하는 대 다음에 찬란 - 레이블 세포의 표현의 총칭 침해 가닥 및 분석의 시각화를위한 수 있습니다.

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Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion

입체 세포외 매트릭스에 종양 세포 침공의 모델이 더 반영<em&gt; 생체내에</em2 차원의 운동성 assays보다&gt; 상황. 찬란 - 라벨 세포, 침략 모드와 세포를 선도 대 다음의 뚜렷한 공헌에 대한 자세한 정보 공촛점 이미지와 함께 매트릭스 침공 assays를 사용하는 것은 얻을 수 있습니다.

모델링 및 3 차원 이미징 단체 셀 침략

A defining characteristic of cancer malignancy is invasion and metastasis 1. In some cancers (e.g. glioma 2), local invasion into surrounding healthy ...

Research

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Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

구강 편평 세포 암종의 Orthotopic 마우스 모델에서 종양 세포 침략의 다중 광자 이미징

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

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Spheroid Assay to Measure TGF-&#946;-induced Invasion

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TGF - β - 유발 침략을 측정하는 회전 타원체 분석

TGF-&beta; has opposing roles in breast cancer progression by acting as a tumor suppressor in the initial phase, but stimulating invasion and metastasis ...

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

3 차원 수지 주조 및 마우스 포털 정맥 또는 Intrahepatic의 담즙 덕트 시스템의 이미징

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Molecular Imaging to Target Transplanted Muscle Progenitor Cells

이식 근육 전구 세포를 타겟팅 할 수 분자 이미징

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a severe genetic neuromuscular disorder that affects 1 in 3,500 boys, and is characterized by progressive muscle ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

생성 및 마우스의 동맥 병변의 3 차원 정량 광학 프로젝션 단층 촬영을 사용하여

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

Molecular Profiling of the Invasive Tumor Microenvironment in a 3-Dimensional Model of Colorectal Cancer Cells and Ex vivo Fibroblasts

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분자 대장 암 세포의 3 차원 모델의 침윤성 종양 미세 환경의 프로파일 및<em&gt; 예 생체 내</em&gt; 섬유 아세포

Invading colorectal cancer (CRC) cells have acquired the capacity to break free from their sister cells, infiltrate the stroma, and remodel the ...

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

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수정<em&gt; 시험관</em&gt; 침공 분석은 호르몬, 중재 암 세포 침략의 사이토 카인 및 / 또는 성장 인자의 잠재적 인 역할을 확인하는

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the ...

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma (mRCC) in Mice Following Nephrectomy

Modeling Spontaneous Metastatic Renal Cell Carcinoma mRCC in Mice Following Nephrectomy

마우스의 자발적인 전이성 신장 세포 암 (mRCC)를 모델링에 따라 신장 절제술

One of the key challenges to improved testing of new experimental therapeutics in renal cell carcinoma (RCC) is the development of models that faithfully ...

Isolation and Immortalization of Patient-derived Cell Lines from Muscle Biopsy for Disease Modeling

질병 모델링을위한 근육 조직 검사에서 환자 유래 세포주의 분리 및 멸화

The generation of patient-specific cell lines represents an invaluable tool for diagnostic or translational research, and these cells can be collected ...

A Cancer Cell Spheroid Assay to Assess Invasion in a 3D Setting

암 세포 회전 타원체 분석은 3D 설정에 침략을 평가하기 위해

The invasive nature of cancer cell lines is thought to correlate with their metastatic potential.  Most traditional assays, however, do not examine these ...