Name: an experimental system to study mechanotransduction in fetal lung cells
Uploaded: 2012-02-16T13:00:00
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1. प्लेटों के ईसीएम प्रोटीन के साथ कोटिंग <ol><li> बाँझ शर्तों के तहत, ठंड प्लेट प्रति बाँझ 1X पीबीएस के 12 मिलीग्राम के साथ laminin की 120 μg मिश्रण. </li><li> Bioflex अनुपचारित प्लेटें ले लो और एक अच्छी तरह से समाधान की 2ml जोड़ने (lami...

<ol>
	<li>Sanchez-Esteban, J., Tsai, S. W., Sang, J., Qin, J., Torday, J. S., Rubin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+mechanical+forces+on+lung-specific+gene+expression.">Effects of mechanical forces on lung-specific gene expression.</a> Am. J. Med. Sci. 316, 200-204 (1998).</li><li>Sanchez-Esteban, J., Cicchiello, L. A., Wang, Y., Tsai, S. W., Williams, L. K., Torday, J. S., Rubin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch+promotes+alveolar+epithelial+type+II+cell+differentiation.">Mechanical stretch promotes alveolar epithelial type II cell differentiation.</a> J. Appl. Physiol. 91, 589-595 (2001).</li><li>Sanchez-Esteban, J., Wang, Y., Cicchiello, L. A., Rubin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+mechanical+stretch+inhibits+cell+proliferation+and+induces+apoptosis+in+fetal+rat+lung+fibroblasts.">Cyclic mechanical stretch inhibits cell proliferation and induces apoptosis in fetal rat lung fibroblasts.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 282, L448-L456 (2002).</li><li>Sanchez-Esteban, J., Wang, Y., Cicchiello, L. A., Rubin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+mechanical+stretch+inhibits+cell+proliferation+and+induces+apoptosis+in+fetal+rat+lung+fibroblasts.">Cyclic mechanical stretch inhibits cell proliferation and induces apoptosis in fetal rat lung fibroblasts.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 282, L448-L456 (2002).</li><li>Sanchez-Esteban, J., Wang, Y., Gruppuso, P. A., Rubin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch+induces+fetal+type+II+cell+differentiation+via+an+epidermal+growth+factor+receptor-extracellular-regulated+protein+kinase+signaling+pathway.">Mechanical stretch induces fetal type II cell differentiation via an epidermal growth factor receptor-extracellular-regulated protein kinase signaling pathway.</a> Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 30, 76-83 (2004).</li><li>Wang, Y., Maciejewski, B. S., Lee, N., Silbert, O., McKnight, N. L., Frangos, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-induced+fetal+type+II+epithelial+cell+differentiation+is+mediated+via+cAMP-PKA-dependent+signaling+pathway.">Strain-induced fetal type II epithelial cell differentiation is mediated via cAMP-PKA-dependent signaling pathway.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 291, L820-L827 (2006).</li><li>Sanchez-Esteban, J., Wang, Y., Filardo, E. J., Rubin, L. P., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrins+{beta}1,+{alpha}6,+and+{alpha}3+contribute+to+mechanical+strain-induced+differentiation+of+fetal+lung+type+II+epithelial+cells+via+distinct+mechanisms.">Integrins {beta}1, {alpha}6, and {alpha}3 contribute to mechanical strain-induced differentiation of fetal lung type II epithelial cells via distinct mechanisms.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 290, L343-L350 (2006).</li><li>Wang, Y., Maciejewski, B. S., Soto-Reyes, D., Lee, H. S., Warburton, D., Sanchez-Esteban, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch+promotes+fetal+type+II+epithelial+cell+differentiation+via+shedding+of+HB-EGF+and+TGF-alpha.">Mechanical stretch promotes fetal type II epithelial cell differentiation via shedding of HB-EGF and TGF-alpha.</a> J. Physiol. 587, 1739-1753 (2009).</li><li>Wang, Y., Maciejewski, B. S., Drouillard, D., Santos, M., Hokenson, M. A., Hawwa, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+caveolin-1+in+mechanotransduction+of+fetal+type+II+epithelial+cells.">A role for caveolin-1 in mechanotransduction of fetal type II epithelial cells.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 298, L775-L783 (2010).</li><li>Lee, H. S., Wang, Y., Maciejewski, B. S., Esho, K., Fulton, C., Sharma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-10+protects+cultured+fetal+rat+type+II+epithelial+cells+from+injury+induced+by+mechanical+stretch.">Interleukin-10 protects cultured fetal rat type II epithelial cells from injury induced by mechanical stretch.</a> Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 294, L225-L232 (2008).</li><li>Hawwa, R. L., Hokenson, M. A., Wang, Y., Huang, Z., Sharma, S., Sanchez-Esteban, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-10+inhibits+inflammatory+cytokines+released+by+fetal+mouse+lung+fibroblasts+exposed+to+mechanical+stretch.">IL-10 inhibits inflammatory cytokines released by fetal mouse lung fibroblasts exposed to mechanical stretch.</a> Pediatric Pulmonology. , (2011).</li><li>Kitterman, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+mechanical+forces+on+fetal+lung+growth.">The effects of mechanical forces on fetal lung growth.</a> Clin. Perinatol. 23, 727-740 (1996).</li><li>Harding, R., Crystal, R. G., West, J. B., Banes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+breathing+movements.">Fetal breathing movements.</a> The Lung: Scientific Fountations. , 2093-2104 (1997).</li><li>Harding, R., Liggins, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+thoracic+dimensions+induced+by+breathing+movements+in+fetal+sheep.">Changes in thoracic dimensions induced by breathing movements in fetal sheep.</a> Reprod. Fertil. Dev. 8, 117-124 (1996).</li></ol>

इस पांडुलिपि में, हम एक भ्रूण प्रकार द्वितीय उपकला कोशिकाओं और fibroblasts अलग और यांत्रिक उत्तेजना Flexcell तनाव उपकरण का उपयोग करने के लिए उन्हें बेनकाब करने की विधि का वर्णन करता है. उपकला कोशिकाओं की भेदभाव 1,2...

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5648</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase 1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C0130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase 1A</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C9891</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5405</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screen cups</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>CD1-1KT</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filters</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-754-25</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 micron nylon mesh</td>
			<td>Small Parts, INC</td>
			<td>CMN-100-D</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 micron mesh</td>
			<td>Small Parts, INC</td>
			<td>CMN-30-D</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 micron mesh</td>
			<td>Dynamic Aqua-Supply Ltd.</td>
			<td>NTX15</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2020</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen-1</td>
			<td>Collagen Biomed</td>
			<td>PC0701</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibronectin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1141</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitronectin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>V-0132</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elastin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E-6402</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioflex plate</td>
			<td>Flexcell International</td>
			<td>BF-3001U</td>
			<td>Uncoated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexcell Strain Unit</td>
			<td>Flexcell International</td>
			<td>FX-5000</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an experimental system to study mechanotransduction in fetal lung cells

यांत्रिक दोहराव साँस लेने जैसे आंदोलनों के द्वारा और द्रव बढ़ाव द्वारा utero में उत्पन्न बलों सामान्य फेफड़ों के विकास के लिए महत्वपूर्ण हैं. फेफड़ों के विकास का एक प्रमुख घटक वायुकोशीय प्रकार द्वितीय उपकला कोशिकाओं, फेफड़े surfactant की प्रमुख स्रोत का भेदभाव है. इन कोशिकाओं भी वायुकोशीय लुमेन, मेजबान रक्षा, और चोट की मरम्मत के तरल पदार्थ homeostasis में भाग लेते हैं. इसके अलावा, बाहर फेफड़ों पैरेन्काइमा कोशिकाओं को सीधे यांत्रिक वेंटीलेशन के दौरान किया जा सकता है जन्म के बाद अतिरंजित खिंचाव को अवगत कराया. हालांकि, सटीक आणविक और सेलुलर तंत्र है जिसके द्वारा फेफड़ों की कोशिकाओं को फेफड़ों के विकास को प्रभावित और फेफड़ों की चोट को बढ़ावा देने के यांत्रिक उत्तेजनाओं भावना पूरी तरह से समझ नहीं रहे हैं. यहाँ, हम एक सरल और उच्च शुद्धता प्रकार द्वितीय कोशिकाओं और fibroblasts कृंतक भ्रूण फेफड़ों से अलग विधि प्रदान करते हैं. फिर, हम इन विट्रो प्रणाली, Flexcell तनाव यूनिट में वर्णन है, भ्रूण कोशिकाओं को यांत्रिक उत्तेजना प्रदान करने के लिए, में यांत्रिक बलों का अनुकरणभ्रूण फेफड़ों के विकास या फेफड़ों की चोट. यह प्रायोगिक प्रणाली भ्रूण फेफड़ों खिंचाव उजागर कोशिकाओं में आणविक और सेलुलर तंत्र की जांच के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण प्रदान करता है. इस दृष्टिकोण का प्रयोग, हमारी प्रयोगशाला कई रिसेप्टर्स और संकेत प्रोटीन है कि भ्रूण फेफड़ों के विकास और फेफड़ों की चोट में mechanotransduction में भाग लेने की पहचान की है.

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An Experimental System to Study Mechanotransduction in Fetal Lung Cells

यांत्रिक बलों फेफड़ों के विकास और फेफड़ों की चोट में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. यहाँ, हम एक कृंतक भ्रूण फेफड़ों प्रकार द्वितीय उपकला कोशिकाओं और fibroblasts को अलग करने और उन्हें यांत्रिक एक का उपयोग कर उत्तेजना को बेनकाब विधि का वर्णन<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; सिस्टम.

एक प्रायोगिक प्रणाली के अध्ययन भ्रूण फेफड़ों की कोशिकाओं में mechanotransduction

Mechanical forces generated in utero by repetitive breathing-like movements and by fluid distension are critical for normal lung development. A key ...

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