Name: isolation of mouse lung dendritic cells
Uploaded: 2011-11-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر لمارلين ديتريش في مرفق التدفق الخلوي LSU الأساسية لمساعدتها على فرز الخلايا وموترام بيتر لمساعدته مع microphotographs. وقد تم تمويل هذا العمل من قبل معهد الطيران المصاحبة للبحوث الطبية ، وبرنامج بحوث LSU جائزة للمنافسة ، ومنح المعاهد الوطنية للصحة / NIAID P20 RR020159 وR03AI081171.

1. نضح الرئة وحيدة الخلية تعليق <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموت ببطء والفأر مع حقنة مخدر داخل الصفاق من خليط الكيتامين / زيلازين (في ملغم / الماوس الكيتامين 1.8 ، زيلازين 0.19) ، واستنزاف عن طريق الوريد الفخذي </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كشف التجويف ?...

<ol>
	<li>Pulendran, B., Palucka, K., Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensing+pathogens+and+tuning+immune+responses.">Sensing pathogens and tuning immune responses.</a> Science. 293, 253-256 (2001).</li><li>Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+of+dendritic+cells.">Immunobiology of dendritic cells.</a> Annual Review of Immunology. 18, 767-811 (2000).</li><li>Manicassamy, S., Pulendran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+control+of+tolerogenic+responses.">Dendritic cell control of tolerogenic responses.</a> Immunol. Rev. 241, 206-227 (2011).</li><li>Steinman, R. M., Cohn, Z. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+cell+type+in+peripheral+lymphoid+organs+of+mice.+I.+Morphology,+quantitation,+tissue+distribution.">Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice. I. Morphology, quantitation, tissue distribution.</a> J. Exp. Med. 137, 1142-1162 (1973).</li><li>Asselin-Paturel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+type+I+IFN-producing+cells+are+immature+APCs+with+plasmacytoid+morphology.">Mouse type I IFN-producing cells are immature APCs with plasmacytoid morphology.</a> Nat. Immunol. 2, 1144-1150 (2001).</li><li>Chan, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-producing+killer+dendritic+cells+provide+a+link+between+innate+and+adaptive+immunity.">Interferon-producing killer dendritic cells provide a link between innate and adaptive immunity.</a> Nat. Med. 12, 207-213 (2006).</li><li>Taieb, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+dendritic+cell+subset+involved+in+tumor+immunosurveillance.">A novel dendritic cell subset involved in tumor immunosurveillance.</a> Nat. Med. 12, 214-219 (2006).</li><li>Guerrero-Plata, A., Kolli, D., Hong, C., Casola, A., Garofalo, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subversion+of+pulmonary+dendritic+cell+function+by+paramyxovirus+infections.">Subversion of pulmonary dendritic cell function by paramyxovirus infections.</a> Journal of Immunology. 182, 3072-3083 (2009).</li><li>Larson, R. S., Springer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+leukocyte+integrins.">Structure and function of leukocyte integrins.</a> Immunol. Rev. 114, 181-217 (1990).</li><li>Sung, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+major+lung+CD103+(alphaE)-beta7+integrin-positive+epithelial+dendritic+cell+population+expressing+Langerin+and+tight+junction+proteins.">A major lung CD103 (alphaE)-beta7 integrin-positive epithelial dendritic cell population expressing Langerin and tight junction proteins.</a> J. Immunol. 176, 2161-2172 (2006).</li><li>Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+CD11c++MHC+class+II-+precursors+generate+lung+dendritic+cells+during+respiratory+viral+infection,+but+are+depleted+in+the+process.">Local CD11c+ MHC class II- precursors generate lung dendritic cells during respiratory viral infection, but are depleted in the process.</a> J. Immunol. 177, 2536-2542 (2006).</li><li>Bhatia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+host+defense+against+Aspergillus+fumigatus+involves+alveolar+macrophages+with+a+predominance+of+alternatively+activated+phenotype.">Rapid host defense against Aspergillus fumigatus involves alveolar macrophages with a predominance of alternatively activated phenotype.</a> PLoS One. 6, e15943-e15943 (2011).</li><li>Shao, Z., Makinde, T. O., McGee, H. S., Wang, X., Agrawal, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fms-like+tyrosine+kinase+3+ligand+regulates+migratory+pattern+and+antigen+uptake+of+lung+dendritic+cell+subsets+in+a+murine+model+of+allergic+airway+inflammation.">Fms-like tyrosine kinase 3 ligand regulates migratory pattern and antigen uptake of lung dendritic cell subsets in a murine model of allergic airway inflammation.</a> J. Immunol. 183, 7531-75381 (2009).</li><li>Hao, X., Kim, T. S., Braciale, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+response+of+respiratory+dendritic+cell+subsets+to+influenza+virus+infection.">Differential response of respiratory dendritic cell subsets to influenza virus infection.</a> J. Virol. 82, 4908-4919 (2008).</li></ol>

عزل العاصمة الماوس الرئوية هي تقنية هامة لدراسة طائفة واسعة من المحفزات في الجهاز التنفسي. عملية الحصول على هذه الخلايا وتشمل الخطوات الحاسمة التي تمنع فقدان الخلايا وكذلك بقاء الخلية والنقاء. سوف Perfusing الرئة قبل جمع مساعدة للقضاء على أي خلايا المحيطية وكذلك الحد من...

<table width="200" border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليق (اختياري) </td></tr><tr><td> ACK lysing العازلة </td><td> Invitrogen </td><td> D6 - 0005DG </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة فأر CD11c (HL3) </td><td> Pharmingen دينار بحريني </td><td> 5580979 </td><td> PE - Cy7 مترافق </td></tr><tr><td> مكافحة فأر IA / IE (269) </td><td> BD - Pharmingen </td><td> 553623 </td><td> مترافق FITC </td></tr><tr><td> Collangenase نوع 1A </td><td> سيغما </td><td> 9891 - 500MG </td><td></td></tr><tr><td> خلية مصافى </td><td> فالكون دينار بحريني </td><td> 352340 ، 352360 </td><td></td></tr><tr><td> CD11c (N418) Microbeads </td><td> Miltenyi </td><td> 130-052-001 </td><td></td></tr><tr><td> أنا الدناز </td><td> سيغما </td><td> D5025 - 150KU </td><td></td></tr><tr><td> هانك محلول الملح المتوازن </td><td> Invitrogen </td><td> 14170 </td><td></td></tr><tr><td> Hepes العازلة الحل </td><td> Invitrogen </td><td> 15630 </td><td></td></tr><tr><td> أطباق بتري 60 مم </td><td> فالكون دينار بحريني </td><td> 351016 </td><td></td></tr><tr><td> GentleMACS ™ C أنابيب </td><td> Miltenyi </td><td> 130-093-237 </td><td></td></tr><tr><td> طيف MACS dissociator </td><td> Miltentyi </td><td> 130-093-235 </td><td></td></tr><tr><td> AutoMACS برو ™ </td><td> Miltenyi </td><td> 130-092-545 </td><td></td></tr><tr><td> FASCS الأغنية </td><td> دينار بحريني </td><td></td><td></td></tr></table>

isolation of mouse lung dendritic cells

الخلايا الجذعية الرئة (DC) تلعب دورا أساسيا في مجال الاستشعار عن غزو الجراثيم ، فضلا عن 1،2 في السيطرة على ردود مولد للتحمل 3 في الجهاز التنفسي. وقد وصفت ما لا يقل عن ثلاث مجموعات فرعية من الخلايا الجذعية الرئيسية الرئة في الفئران : DC التقليدية (CDC) 4 ، بلازماوية DC (PDC) (5) وإنتاج الإنترفيرون العاصمة القاتل (IKDC) 6،7. مجموعة فرعية منها هي فرعية العاصمة الأبرز في الرئة 8. العلامة المشتركة المعروفة لتحديد مجموعات فرعية هي العاصمة CD11c ، وهو النوع الأول إنتغرين عبر الغشاء (β2) الذي أعرب أيضا عن حيدات ، الضامة ، العدلات وبعض الخلايا باء 9. في بعض الأنسجة ، وذلك باستخدام CD11c كعلامة لتحديد الماوس العاصمة غير صالحة ، كما هو الحال في الطحال ، حيث ان معظم الخلايا + CD11c تمثل مجموعة فرعية منها التي تعبر عن مستويات عالية من التوافق النسيجي الرئيسي الثاني فئة المعقدة (MHC - II). ومع ذلك ، فإن سرطان الرئة هو أكثر الأنسجة المتجانسة حيث تكونالجانب فرعية العاصمة ، وهناك نسبة عالية من السكان الخلايا المتميزة التي تعبر عن مستويات عالية من CD11c نوبة انخفاض مستويات MHC - II. استنادا إلى توصيف ومعظمها على التعبير عن F4/80 ، علامة بلعم الطحال ، وقد تم تحديد مرحبا CD11c الرئة لو MHC - II سكان الخلية كما الضامة الرئوي (10) وأكثر في الآونة الأخيرة ، تمهيدا العاصمة المحتملة 11. على النقيض من PDC الماوس ، اقتصر على دراسة الدور المحدد للمركز السيطرة على الأمراض في استجابة مناعية الرئوي نظرا لعدم وجود علامة معينة يمكن أن تساعد في عزل هذه الخلايا. لذا ، في هذا العمل ، ونحن تصف الإجراء لعزل عالي النقاء الماوس الرئة CDC. عزل مجموعات فرعية العاصمة الرئوي يمثل أداة مفيدة جدا للحصول على نظرة ثاقبة وظيفة هذه الخلايا في الاستجابة لمسببات الأمراض التنفسية فضلا عن العوامل البيئية التي يمكن أن تؤدي إلى استجابة المضيف المناعية في الرئة.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells at JoVE.com

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

يوصف مستحضر عالي النقاء من الخلايا الجذعية الماوس الرئة. ويولى اهتمام محدد لعزل الخلايا الجذعية التقليدية فرعية.

عزل خلايا الرئة ماوس شجيرى

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

عزل خلايا فأر التجويف البريتوني

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

عزل وتوصيف الخلايا الجذعية والضامة من الأمعاء ماوس

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

عزل الخلايا الجذعية متعلق بالنخاع الشوكي والخلايا الظهارية من الغدة الصعترية الإنسان

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

An Efficient and High Yield Method for Isolation of Mouse Dendritic Cell Subsets

على طريقة العائد فعالة وعالية لعزل مجموعات فرعية خلية الفأر الجذعية

Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells primarily responsible for acquiring, processing and presenting antigens on antigen ...

Characterization of Human Monocyte-derived Dendritic Cells by Imaging Flow Cytometry: A Comparison between Two Monocyte Isolation Protocols

توصيف الخلايا الجذعية البشرية الوحيدات المستمدة من التصوير التدفق الخلوي: مقارنة بين اثنين من بروتوكولات الوحيدات عزل

Dendritic cells (DCs) are antigen presenting cells of the immune system that play a crucial role in lymphocyte responses, host defense mechanisms, and ...

Fluorescence-activated Cell Sorting for Purification of Plasmacytoid Dendritic Cells from the Mouse Bone Marrow

مضان تنشيط الفرز الخليوي لتنقية الخلايا الجذعية بلازماوية الشكل من الفأر نخاع العظم

Fluorescence-activated cell sorting (FACS) is a technique to purify specific cell populations based on phenotypes detected by flow cytometry. This method ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

البكتيريا المستروحة الخارجي غشاء الحويصلات: عزل وتحليل إمكاناتهم الموالية للالتهابات في الضامة

Bacteria are able to secrete a variety of molecules via various secretory systems. Besides the secretion of molecules into the extracellular space or ...

Human Lung Dendritic Cells: Spatial Distribution and Phenotypic Identification in Endobronchial Biopsies Using Immunohistochemistry and Flow Cytometry

خلايا الإنسان الجذعية الرئة: التوزيع المكاني والمظهري تحديد في داخل القصبة التحليلات عن طريق المناعية والتدفق الخلوي

The lungs are constantly exposed to the external environment, which in addition to harmless particles, also contains pathogens, allergens, and toxins. In ...

Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

الرئة ماوس شرائح لتصور لايف الخلايا الجذعية الرئوي قطع الدقة

Inhalation of allergens and pathogens elicits multiple changes in a variety of immune cell types in the lung. Flow cytometry is a powerful technique for ...

Isolation of Dendritic Cells from the Human Female Reproductive Tract for Phenotypical and Functional Studies

عزل الخلايا الجذعية من الإنسان الأنثى التناسلي للدراسات الشكلية والوظيفية

The characterization of the human dendritic cells (DCs) resident in mucosal tissues is challenging due to the difficulty in obtaining samples, and the low ...