Name: isolation of mouse lung dendritic cells
Uploaded: 2011-11-22T13:00:00
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著者らは、顕微鏡との彼の援助のための細胞選別とピーターモットラムと彼女の助けのためにLSUのフローサイトメトリーコアファシリティーでマリリンディートリッヒに感謝したいと思います。この作品は、フライトアテンダント医学研究所、LSU -競争的研究プログラム賞、およびNIH / NIAID助成金P20 RR020159とR03AI081171によって資金を供給された。

1。肺血流と、単一の細胞懸濁液<ol><li>大腿静脈を経由してケタミン/キシラジン麻酔の混合物（1mg /マウスケタミン1.8では、キシラジン0.19）と放血の腹腔内注射したマウスを安楽死させる</li><li>カットと軽く腹膜の外側の皮を引き戻すことによって胸腔を公開。心臓と肺の両方を公開するために、胸郭を切断してダイアフラムを開くに進みます。 </li><li> EDTA - HBSS（カルシウム/マグネシウム?...

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	<li>Pulendran, B., Palucka, K., Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensing+pathogens+and+tuning+immune+responses.">Sensing pathogens and tuning immune responses.</a> Science. 293, 253-256 (2001).</li><li>Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+of+dendritic+cells.">Immunobiology of dendritic cells.</a> Annual Review of Immunology. 18, 767-811 (2000).</li><li>Manicassamy, S., Pulendran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+control+of+tolerogenic+responses.">Dendritic cell control of tolerogenic responses.</a> Immunol. Rev. 241, 206-227 (2011).</li><li>Steinman, R. M., Cohn, Z. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+cell+type+in+peripheral+lymphoid+organs+of+mice.+I.+Morphology,+quantitation,+tissue+distribution.">Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice. I. Morphology, quantitation, tissue distribution.</a> J. Exp. Med. 137, 1142-1162 (1973).</li><li>Asselin-Paturel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+type+I+IFN-producing+cells+are+immature+APCs+with+plasmacytoid+morphology.">Mouse type I IFN-producing cells are immature APCs with plasmacytoid morphology.</a> Nat. Immunol. 2, 1144-1150 (2001).</li><li>Chan, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-producing+killer+dendritic+cells+provide+a+link+between+innate+and+adaptive+immunity.">Interferon-producing killer dendritic cells provide a link between innate and adaptive immunity.</a> Nat. Med. 12, 207-213 (2006).</li><li>Taieb, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+dendritic+cell+subset+involved+in+tumor+immunosurveillance.">A novel dendritic cell subset involved in tumor immunosurveillance.</a> Nat. Med. 12, 214-219 (2006).</li><li>Guerrero-Plata, A., Kolli, D., Hong, C., Casola, A., Garofalo, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subversion+of+pulmonary+dendritic+cell+function+by+paramyxovirus+infections.">Subversion of pulmonary dendritic cell function by paramyxovirus infections.</a> Journal of Immunology. 182, 3072-3083 (2009).</li><li>Larson, R. S., Springer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+leukocyte+integrins.">Structure and function of leukocyte integrins.</a> Immunol. Rev. 114, 181-217 (1990).</li><li>Sung, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+major+lung+CD103+(alphaE)-beta7+integrin-positive+epithelial+dendritic+cell+population+expressing+Langerin+and+tight+junction+proteins.">A major lung CD103 (alphaE)-beta7 integrin-positive epithelial dendritic cell population expressing Langerin and tight junction proteins.</a> J. Immunol. 176, 2161-2172 (2006).</li><li>Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+CD11c++MHC+class+II-+precursors+generate+lung+dendritic+cells+during+respiratory+viral+infection,+but+are+depleted+in+the+process.">Local CD11c+ MHC class II- precursors generate lung dendritic cells during respiratory viral infection, but are depleted in the process.</a> J. Immunol. 177, 2536-2542 (2006).</li><li>Bhatia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+host+defense+against+Aspergillus+fumigatus+involves+alveolar+macrophages+with+a+predominance+of+alternatively+activated+phenotype.">Rapid host defense against Aspergillus fumigatus involves alveolar macrophages with a predominance of alternatively activated phenotype.</a> PLoS One. 6, e15943-e15943 (2011).</li><li>Shao, Z., Makinde, T. O., McGee, H. S., Wang, X., Agrawal, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fms-like+tyrosine+kinase+3+ligand+regulates+migratory+pattern+and+antigen+uptake+of+lung+dendritic+cell+subsets+in+a+murine+model+of+allergic+airway+inflammation.">Fms-like tyrosine kinase 3 ligand regulates migratory pattern and antigen uptake of lung dendritic cell subsets in a murine model of allergic airway inflammation.</a> J. Immunol. 183, 7531-75381 (2009).</li><li>Hao, X., Kim, T. S., Braciale, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+response+of+respiratory+dendritic+cell+subsets+to+influenza+virus+infection.">Differential response of respiratory dendritic cell subsets to influenza virus infection.</a> J. Virol. 82, 4908-4919 (2008).</li></ol>

肺マウスDCの分離は、呼吸器の刺激の広い範囲の研究のための重要なテクニックです。これらの細胞を得る工程は、細胞の喪失だけでなく、細胞の生存と純度を防ぐための重要な手順が含まれています。コレクションの前に肺を灌流しても、末梢細胞を排除するだけでなく、汚染物質の赤血球を削減することができます。肺の多数が処理されるときに自動化された解離の使用はadvanteogusことが...

<table width="200" border="1"><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント（省略可能） </td></tr><tr><td> ACK溶解緩衝液</td><td>インビトロジェン</td><td> D6 - 0005DG </td><td></td></tr><tr><td>抗マウスのCD11c（HL3） </td><td> BD Pharmingen社</td><td> 5580979 </td><td> PE - Cy7共役</td></tr><tr><td>抗マウスIA / IE（269） </td><td> BD - Pharmingen社</td><td> 553623 </td><td>共役FITC </td></tr><tr><td> Collangenaseタイプ1A </td><td>シグマ</td><td> 9891 - 500mgの</td><td></td></tr><tr><td>セルストレーナー</td><td> BDファルコン</td><td> 352340、352360 </td><td></td></tr><tr><td> CD11cは（N418）マイクロビーズ</td><td>国内でのみ有効</td><td> 130-052-001 </td><td></td></tr><tr><td> DNase Iを</td><td>シグマ</td><td> D5025 - 150KU </td><td></td></tr><tr><td>ハンクス平衡塩類溶液</td><td>インビトロジェン</td><td> 14170 </td><td></td></tr><tr><td> HEPES緩衝液</td><td>インビトロジェン</td><td> 15630 </td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿は60mm </td><td> BDファルコン</td><td> 351016 </td><td></td></tr><tr><td> GentleMACS™Cチューブ</td><td>国内でのみ有効</td><td> 130-093-237 </td><td></td></tr><tr><td>ジェントルMACS dissociator </td><td> Miltentyi </td><td> 130-093-235 </td><td></td></tr><tr><td> AutoMACS - Pro™の</td><td>国内でのみ有効</td><td> 130-092-545 </td><td></td></tr><tr><td> FASCSアリア</td><td> BD </td><td></td><td></td></tr></table>

isolation of mouse lung dendritic cells

肺の樹状細胞（DC）は、侵入病原体の1,2と同様に気道の免疫寛容の回答3の制御でのセンシングにおいて重要な役割を果たします。肺の樹状細胞の少なくとも3つの主要なサブセットは、マウスで記載されている：従来のDC（CDC）4、形質DC（PDC）5とIFN -産生キラーDC（IKDC）6,7。 CDCのサブセットは、肺8で最も顕著なDCのサブセットです。 DCサブセットを識別するために知られている一般的なマーカーは、CD11cは、I型も単球、マクロファージ、好中球およびいくつかのB細胞9上に発現される膜貫通インテグリン（β2）です。一部の組織では、マウスDCを識別するマーカーとして樹状細胞を使用すると、ほとんどのCD11c +細胞は主要組織適合遺伝子複合体クラスII（MHC - II）の高レベルを表すCDCのサブセットを表す脾臓、のように、有効です。しかし、肺はものより異質な組織であるサイドDCサブセットは、MHC - IIの低レベルの試合CD11cは高レベルの表現の異なる細胞集団の割合が高いがあります。その特性上、ほとんどがF4/80、脾臓マクロファージのマーカーのその式に基づいて、CD11cはハイ MHC - II LOの肺の細胞集団は、潜在的なDC前駆11として、肺のマクロファージ、最近10として同定されている。 マウスPDCには対照的に、肺の免疫応答におけるCDCの特定の役割の研究は、これらの細胞の分離に役立つ可能性が特異的なマーカーの不足により制限されている。したがって、この作品では、我々は高度に精製されたマウスの肺CDCを分離する手順を説明します。肺DCサブセットの分離は、呼吸器病原体だけでなく、肺の宿主免疫応答を誘発する環境要因に応答してこれらの細胞の機能に関する洞察を得るために非常に便利なツールを表します。

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Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

マウス肺樹状細胞の高度に精製された調製物が記載されている。特定の重点は、従来の樹状細胞サブセットの分離に与えられます。

マウス肺樹状細胞の分離

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

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Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

精密カットライブ肺樹状細胞を可視化するために、マウスの肺スライスを

Inhalation of allergens and pathogens elicits multiple changes in a variety of immune cell types in the lung. Flow cytometry is a powerful technique for ...

Isolation of Dendritic Cells from the Human Female Reproductive Tract for Phenotypical and Functional Studies

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