Name: isolation of mouse lung dendritic cells
Uploaded: 2011-11-22T13:00:00
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저자 microphotographs 그의 도움을 셀 정렬과 피터 Mottram 함께 그녀의 도움 LSU의 유동세포계측법 코어 시설에서 마릴린 디트리히에 감사드립니다. 이 작품은 비행 수행자 의학 연구소, LSU 경쟁력 연구 프로그램 수상, 그리고 NIH / NIAID 기금 P20 RR020159 및 R03AI081171에 의해 후원되었다.

1. 폐 재관류 및 단일 세포 현탁액 <ol><li> 대퇴 정맥을 통해 intraperitoneal 케타민을 / xylazine 마취 혼합물의 주입 (MG / 마우스 케타민을 1.8, xylazine 0.19) 및 과다와 마우스를 안락사 </li><li> 절단하고 부드럽게 복막의 바깥쪽 피부를 다시 당겨 흉강을 폭로. 심장과 폐 모두 노출 갈빗대 절단하여 다이어프램을 열 진행합니다. </li><li> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) - HBSS (칼슘 / 마그네슘없는 HBSS에 1...

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	<li>Pulendran, B., Palucka, K., Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensing+pathogens+and+tuning+immune+responses.">Sensing pathogens and tuning immune responses.</a> Science. 293, 253-256 (2001).</li><li>Banchereau, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+of+dendritic+cells.">Immunobiology of dendritic cells.</a> Annual Review of Immunology. 18, 767-811 (2000).</li><li>Manicassamy, S., Pulendran, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+control+of+tolerogenic+responses.">Dendritic cell control of tolerogenic responses.</a> Immunol. Rev. 241, 206-227 (2011).</li><li>Steinman, R. M., Cohn, Z. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon-producing+killer+dendritic+cells+provide+a+link+between+innate+and+adaptive+immunity.">Interferon-producing killer dendritic cells provide a link between innate and adaptive immunity.</a> Nat. Med. 12, 207-213 (2006).</li><li>Taieb, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+dendritic+cell+subset+involved+in+tumor+immunosurveillance.">A novel dendritic cell subset involved in tumor immunosurveillance.</a> Nat. Med. 12, 214-219 (2006).</li><li>Guerrero-Plata, A., Kolli, D., Hong, C., Casola, A., Garofalo, R. 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Immunol. 177, 2536-2542 (2006).</li><li>Bhatia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+host+defense+against+Aspergillus+fumigatus+involves+alveolar+macrophages+with+a+predominance+of+alternatively+activated+phenotype.">Rapid host defense against Aspergillus fumigatus involves alveolar macrophages with a predominance of alternatively activated phenotype.</a> PLoS One. 6, e15943-e15943 (2011).</li><li>Shao, Z., Makinde, T. O., McGee, H. S., Wang, X., Agrawal, D. 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폐 마우스 DC의 격리가 호흡기 자극의 다양한 연구를위한 중요한 기술이다. 이러한 세포를 얻는 과정은 세포의 손실뿐만 아니라 세포 생존과 정결을 방지 중요한 단계를 포함하고 있습니다. 수령 전에 폐가 Perfusing 것은 물론 오염 물질을 감소 적혈구와 같은 주변 세포를 제거하는 데 도움이 될 것입니다. 폐 다수의 처리 때 자동 분리의 사용 advanteogus 수있다 그렇지 않으면 수동으로 완료되면 collag...

<table width="200" border="1"><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 (옵션) </td></tr><tr><td> ACK lysing 버퍼 </td><td> Invitrogen </td><td> D6 - 0005DG </td><td></td></tr><tr><td> 안티 마우스 CD11c (HL3) </td><td> BD Pharmingen </td><td> 5,580,979 </td><td> PE - Cy7 복합 </td></tr><tr><td> 안티 마우스 IA / IE (269) </td><td> BD - Pharmingen </td><td> 553,623 </td><td> 복합 FITC </td></tr><tr><td> Collangenase 입력 1A </td><td> 시그마 </td><td> 9891 - 500MG </td><td></td></tr><tr><td> 세포 strainers </td><td> BD 팔콘 </td><td> 352340, 352360 </td><td></td></tr><tr><td> CD11c (N418) Microbeads </td><td> Miltenyi </td><td> 130-052-001 </td><td></td></tr><tr><td> DNase I </td><td> 시그마 </td><td> D5025 - 150KU </td><td></td></tr><tr><td> 행크의 균형 소금 솔루션 </td><td> Invitrogen </td><td> 14,170 </td><td></td></tr><tr><td> Hepes 버퍼 솔루션 </td><td> Invitrogen </td><td> 15,630 </td><td></td></tr><tr><td> 배양 접시 60mm </td><td> BD 팔콘 </td><td> 351,016 </td><td></td></tr><tr><td> GentleMACS ™ C 튜브 </td><td> Miltenyi </td><td> 130-093-237 </td><td></td></tr><tr><td> 젠틀 맥에서의 dissociator </td><td> Miltentyi </td><td> 130-093-235 </td><td></td></tr><tr><td> AutoMACS - PRO ™ </td><td> Miltenyi </td><td> 130-092-545 </td><td></td></tr><tr><td> FASCS 아리아 </td><td> BD </td><td></td><td></td></tr></table>

isolation of mouse lung dendritic cells

폐암 돌기 세포 (DC)는 호흡기 tolerogenic 응답의 제어뿐만 아니라 3 침입 병원균 1,2를 감지의 근본적인 역할을한다. 폐암 돌기 세포 중 적어도 세 가지 주요 하위 집합은 생쥐에서 설명되었습니다 : 종래의 DC (CDC) 4, plasmacytoid DC (PDC) 5 IFN 생산 킬러 DC (IKDC) 6,7. CDC 집합은 폐 8 가장 유명한 DC의 하위 집합입니다. DC의 하위 집합을 식별하는 것으로 알려진 일반적인 마커는 CD11c, 유형 I 또한, monocytes, macrophages, neutrophils 및 일부 B 세포 9 표현 transmembrane 인테 그린 (β2)입니다. 일부 조직에서는, 마우스 DC를 식별하는 마커로 CD11c를 사용하면 대부분의 CD11c + 세포가 주요 histocompatibility 복잡한 클래스 II (MHC - II)의 높은 수준을 표현 CDC의 하위 집합을 나타냅니다 비장에 같은 유효합니다. 그러나, 폐는 더 이질적인 조직입니다사이드 DC의 하위 집합은 MHC - II의 낮은 수준의 한판 승부 CD11c 높은 수준을 표현 뚜렷한 세포 인구의 높은 비율 있습니다. 의 특성과 대부분 F4/80, 지라 대식 세포 표지 자사의 표현에 따르면, CD11c 하이 MHC - II 그런 건 폐 전지 인구가 잠재적인 DC 전구체 11로, 폐동맥 macrophages 최근 10으로 확인되었습니다. 마우스 PDC 대조적으로, 폐의 면역 반응에 CDC의 특정 역할의 연구는 이러한 세포의 격리에 도움이 될 특정 마커의 부족으로 인해 제한되었습니다. 따라서,이 작품에서 우리는 고도로 정제된 마우스 폐 질병을 분리하는 절차를 설명합니다. 폐 DC의 하위 집합의 분리는 호흡기 병원균뿐만 아니라 폐의 호스트 면역 반응을 일으킬 수있다 환경 요인에 대한 응답에서 이러한 세포의 기능에 대한 통찰력을 얻기 위해 매우 유용한 도구를 나타냅니다.

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Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

마우스 폐 돌기 세포의 고도 정화 준비가 설명되어 있습니다. 구체적인 중점이 종래의 돌기 세포 집합의 고립에 제공됩니다.

마우스 폐에 돌기 세포의 분리

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

마우스 복막 구멍 세포의 분리

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

연구

면역학 및 감염병학

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

마우스 소장에서 돌기 세포 및 Macrophages의 분리 및 특성화

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

인간의 흉선에서 골수 수지상 세포와 상피 세포의 분리

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

An Efficient and High Yield Method for Isolation of Mouse Dendritic Cell Subsets

마우스 수지상 세포 하위 집합의 분리를위한 효율적이고 높은 수율 방법

Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells primarily responsible for acquiring, processing and presenting antigens on antigen ...

Characterization of Human Monocyte-derived Dendritic Cells by Imaging Flow Cytometry: A Comparison between Two Monocyte Isolation Protocols

이미징 유동 세포 계측법에 의해 인간 단핵구 유래 수지상 세포의 특성 : 두 단핵구 격리 프로토콜 사이의 비교

Dendritic cells (DCs) are antigen presenting cells of the immune system that play a crucial role in lymphocyte responses, host defense mechanisms, and ...

Fluorescence-activated Cell Sorting for Purification of Plasmacytoid Dendritic Cells from the Mouse Bone Marrow

마우스 골수에서 형질 수지상 세포의 정화를위한 형광 활성화 셀 정렬

Fluorescence-activated cell sorting (FACS) is a technique to purify specific cell populations based on phenotypes detected by flow cytometry. This method ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

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레지오넬라 뉴모 필라 외부 막 소포 : 분리 및 대 식세포에 그들의 프로 - 염증 가능성 분석

Bacteria are able to secrete a variety of molecules via various secretory systems. Besides the secretion of molecules into the extracellular space or ...

Human Lung Dendritic Cells: Spatial Distribution and Phenotypic Identification in Endobronchial Biopsies Using Immunohistochemistry and Flow Cytometry

면역 및 유동 세포 계측법을 사용하여 기관지 생검의 공간 분포 및 표현형 확인 : 인간의 폐 수지상 세포

The lungs are constantly exposed to the external environment, which in addition to harmless particles, also contains pathogens, allergens, and toxins. In ...

Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

정밀 절단 라이브 폐 수지상 세포를 시각화하기 위해 마우스 폐 슬라이스

Inhalation of allergens and pathogens elicits multiple changes in a variety of immune cell types in the lung. Flow cytometry is a powerful technique for ...

Isolation of Dendritic Cells from the Human Female Reproductive Tract for Phenotypical and Functional Studies

Phenotypical 및 기능 연구에 대 한 인간의 여성 생식 관에서 수지상 세포의 고립

The characterization of the human dendritic cells (DCs) resident in mucosal tissues is challenging due to the difficulty in obtaining samples, and the low ...