Name: alginate microcapsule as a 3d platform for propagation and differentiation of human embryonic stem cells (hesc) to different lineages
Uploaded: 2012-03-09T12:00:00
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이 작품은 의학 NHMRC 프로그램 권한 부여 # 568969 (PSS) 및 학부, 뉴 사우스 웨일스 대학, 줄기 세포 사업 (KSS)에 의해 지원됩니다.

아래 절차의 모든 클래스 II Biosafety 내각 안에서 무균 기술을 사용하여 수행됩니다. 사용하는 시약과 장비는 아래 테이블에 나열되어 있습니다. 1. 1.1 %의 알긴산의 준비 (W / V) <ol><li> 나트륨 알지네이트요 투석의 0.275 g을 추가 (높은 글루쿠론산 함량 ≥ 60 %, 점도&gt; 200 MPA의 및 내독소 ≤ 100 유럽 연합 (EU) / G) 무균 50 ML 관과 (0.5g 이전 대비 25 ML 멸균 0.1 % 젤라틴 용액을 추가 ge...

<ol>
	<li>Chayosumrit, M., Tuch, B., Sidhu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alginate+microcapsule+for+propagation+and+directed+differentiation+of+hESCs+to+definitive+endoderm.">Alginate microcapsule for propagation and directed differentiation of hESCs to definitive endoderm.</a> Biomaterials. 31, 505-514 (2010).</li><li>Dean, S. K., Yulyana, Y., Williams, G., Sidhu, K. S., Tuch, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+encapsulated+embryonic+stem+cells+after+transplantation.">Differentiation of encapsulated embryonic stem cells after transplantation.</a> Transplantation. 82, 1175-1184 (2006).</li><li>Siti-Ismail, N., Bishop, A. E., Polak, J. M., Mantalaris, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+benefit+of+human+embryonic+stem+cell+encapsulation+for+prolonged+feeder-free+maintenance.">The benefit of human embryonic stem cell encapsulation for prolonged feeder-free maintenance.</a> Biomaterials. 29, 3946-3952 (2008).</li><li>Dawson, E., Mapili, G., Erickson, K., Taqvi, S., Roy, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomaterials+for+stem+cell+differentiation.">Biomaterials for stem cell differentiation.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 60, 215-228 (2008).</li><li>Orive, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+encapsulation:+promise+and+progress.">Cell encapsulation: promise and progress.</a> Nat. Med. 9, 104-107 (2003).</li><li>Watanabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+ROCK+inhibitor+permits+survival+of+dissociated+human+embryonic+stem+cells.">A ROCK inhibitor permits survival of dissociated human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotechnol. 25, 681-686 (2007).</li><li>Dang, S. M., Gerecht-Nir, S., Chen, J., Itskovitz-Eldor, J., Zandstra, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled,+scalable+embryonic+stem+cell+differentiation+culture.">Controlled, scalable embryonic stem cell differentiation culture.</a> Stem Cells. 22, 275-282 (2004).</li><li>Drukker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+expression+of+MHC+proteins+in+human+embryonic+stem+cells.">Characterization of the expression of MHC proteins in human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 99, 9864-9869 (2002).</li><li>Calafiore, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+Technical+Procedures+for+Microencapsulation+of+Human+Islets+for+Graft+into+Nonimmunosuppressed+Patients+With+Type+1+Diabetes+Mellitus.">Standard Technical Procedures for Microencapsulation of Human Islets for Graft into Nonimmunosuppressed Patients With Type 1 Diabetes Mellitus.</a> Transplantation Proceedings. 38, 1156-1157 (2006).</li><li>Cho, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+and+large-scale+generation+of+functional+dopamine+neurons+from+human+embryonic+stem+cells.">Highly efficient and large-scale generation of functional dopamine neurons from human embryonic stem cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 3392-3397 (2008).</li><li>Vazin, T., Chen, J., Lee, C. T., Amable, R., Freed, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+stromal-derived+inducing+activity+in+the+generation+of+dopaminergic+neurons+from+human+embryonic+stem+cells.">Assessment of stromal-derived inducing activity in the generation of dopaminergic neurons from human embryonic stem cells.</a> Stem Cells. 26, 1517-1525 (2008).</li></ol>

마우스 배아의 줄기 세포와 hESC를 사용하여 여러 연구 biomaterials 및 조직 공학 2,3에서 3D 문화 시스템의 이점을 증명하고있다. 우리는 바륨 알지네이트요보다 칼슘 알지네이트요에서 캡슐 때 hESC는 상당한 높은 생존 능력을 보여주 이후 바륨 알지네이트요에 비해 hESC 전파와 차별을 공부하기 적합한 3D 플랫폼으로 칼슘 알지네이트요의 microcapsules를 사용했습니다. 이 문화 시스템은 또한 고?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 노트 </td></tr><tr><td> 알긴산 (MVG UP Pronova) </td><td> NovoMatrix </td><td> 4,200,101 </td><td> 높은 글루쿠론산 함량 ≥ 60 %, 점도&gt; 200 MPA의 및 내독소 &lt;100 EU / G </td></tr><tr><td> 젤라틴 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> G1890-100G </td><td></td></tr><tr><td> 0.9 % NaCl </td><td> 박스터 헬스케어 </td><td> AHF7123 </td><td></td></tr><tr><td> 타입 J1 비드 발생기 </td><td> Nisco 엔지니어링 INC </td><td> SPA-0447 </td><td></td></tr><tr><td> 멀티 페이저 주사기 펌프 </td><td> 새로운 시대 펌프 시스템 INC </td><td> 모델 NE-1000 </td><td></td></tr><tr><td> Ezi-흐름 의료 유량계 </td><td> 개스콘 시스템</td><td> G0149 </td><td></td></tr><tr><td> Y-27632 </td><td> 머크 </td><td> 688,000 </td><td></td></tr><tr><td> 알부민 혈청 인간 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> A4327-1G </td><td></td></tr><tr><td> Accutase </td><td> Millipore </td><td> SCR005 </td><td></td></tr><tr><td> 14G X 2 &quot;IV 카테터 </td><td> Terumo </td><td> SR-OX1451C </td><td></td></tr><tr><td> 마네 - DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 10829-018 </td><td> SR 매체 (기저)의 경우 </td></tr><tr><td> GlutaMAX-I </td><td> Invitrogen </td><td> 35050-061 </td><td> SR 매체 (2 ㎜)에 대한 </td></tr><tr><td> 마네 세럼 교체 </td><td> Invitrogen </td><td> 10828-028 </td><td> SR 매체 (20 %)에 대한 </td></tr><tr><td> 페니실린 - 스트렙토 마이신 </td><td> Invitrogen </td><td> 15070063 </td><td> SR 매체 (2.5 U / ml) 쇼핑을 위해 </td&gt; </tr><tr><td> 인슐린 - 트랜스페린 - 셀레늄 (ITS) </td><td> Invitrogen </td><td> 41400045 </td><td> SR 매체 (1X)의 경우 </td></tr><tr><td> β-메르 캅 토 에탄올 </td><td> Invitrogen </td><td> 21985-023 </td><td> SR 매체 (0.1 ㎜)에 대한 </td></tr><tr><td> MEM NEAA 솔루션 </td><td> Invitrogen </td><td> 11140-050 </td><td> SR 매체 (5 ㎜)에 대한 </td></tr><tr><td> 글래스고 최소 필수 매체 </td><td> Invitrogen </td><td> 11710035 </td><td> DA 신경 분화 매체 (기저)의 경우 </td></tr><tr><td> 마네 세럼 교체 </td><td> Invitrogen </td><td> 10828-028 </td><td> DA 신경 분화 매체 (10 %)에 대한 </td></tr><tr><td> 나트륨 pyruvate </td><td> Invitrogen </td><td> 11360070 </td><td> DA 신경 분화 매체 (1 ㎜)의 경우 </td></tr><tr><td> MEM NEAA 솔루션 </td><td> Invitrogen </td><td> 11140-050 </td><td> DA N의 경우eural 차별 매체 (0.1 ㎜) </td></tr><tr><td> β-메르 캅 토 에탄올 </td><td> Invitrogen </td><td> 21985-023 </td><td> DA 신경 분화 매체 (0.1 ㎜)에 대한 </td></tr><tr><td> 소닉 고슴도치 (쉬이잇) </td><td> R &amp; D 시스템 </td><td> 1314-SH-025/CF </td><td> DA 신경 분화 (100 NG / ML)의 경우 </td></tr><tr><td> Fibroblast 성장 인자 8A (FGF8a) </td><td> R &amp; D 시스템 </td><td> 4745-F8-050 </td><td> DA 신경 분화 (100 NG / ML)의 경우 </td></tr></tbody></table>

alginate microcapsule as a 3d platform for propagation and differentiation of human embryonic stem cells (hesc) to different lineages

그들이 무기한 문화 확대와 신체의 모든 세포 유형으로 구분되기 수 있기 때문에 인간 배아 줄기 세포 (hESC) 세포 대체 요법에 대한 매력적인 대안 원본으로 떠오르고있다. biomaterials 다양한 형태의도 줄기 세포 틈새는 1-3 흉내낸 microenvironment를 제공하기 위해 줄기 세포 배양에 사용되었습니다. 후자는 캡슐과 같은 3 차원 (3D) 환경 4 제공하여 특정 lineages뿐만 아니라 조직의 조직으로 휴대 전화 상호 작용, 세포 증식 및 분화를 촉진하는 것이 중요합니다. 세포 캡슐의 원리는 3D 문화 2 반 투과 세포막의 굴레 안에서 살아있는 세포의 함정 수사가 포함됩니다. 항체와 캡슐 기공 크기보다 큰 호스트에서 면역 세포가 5를 제외하고 반면 이러한 세포막은 영양소, 산소와 세포막에 걸쳐 자극의 교환하실 수 있습니다. 여기서는 사전문화적인 접근을 유도하고 알지네이트요의 microcapsules을 사용하여 3D microenvironment에 hESC 검찰의 뉴런을 차별화. 우리는 캡슐 hESC의 생존을 향상시키기 위해 문화 조건 2를 수정했습니다. 우리는 이전에 보여준 그 크게 향상 3D 플랫폼 p160-Rho-연결된 코일 - 코일 키나제 (바위) 억제제, Y-27632과 인간 태아의 fibroblast 바른 혈청 대체 매체 (hFF-CM)의 추가 캡슐 hESC의 생존 있는 세포가 최종 endoderm의 마커 유전자에게 1 표명했다. 우리는 지금 검찰의 뉴런으로 hESC하고 효율적인 분화의 번식이 3D 플랫폼을 사용 해왔다. 단백질과 유전자 표현 분석은 검찰의 연결을 분화의 마지막 단계 후 티로신 hydroxylase의 증가 표현 (TH), DA 뉴런을위한 마커, 2 주 후에&gt; 100 폴드을 보여주었다. 우리는 알지네이트요의 microcapsules을 사용하여 Google 3D 플랫폼 확산을 공부 유용할 수있는 가상과 차별 감독각종 lineages에 hESC니다. 이 3D 시스템은 분화의 과정 중에 hESC에서 피더 세포의 분리를 허용하며 향후 이식시 면역 - 절연을위한 잠재력을 가지고 있습니다.

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Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells hESC to Different Lineages

우리는 endoderm 및 dopaminergic (DA) 뉴런에 전파하고 배아 줄기 세포의 분화에 대한 효과적인 3D 플랫폼으로 microencapsulation 기술을 최적화했습니다. 또한 이식하는 동안 호스트에서 세포의 면역 - 절연을위한 기회를 제공합니다. 이 플랫폼은 다른 세포 유형에 적응하실 수 있습니다.

다른 Lineages로 인간 배아 줄기 세포 (hESC)의 전파 및 차별 화를위한 3D 플랫폼으로서 알긴산의 Microcapsule

Human embryonic stem cells (hESC) are emerging as an attractive alternative source for cell replacement therapy since they can be expanded in culture ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells (hESC) to Different Lineages

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인간 세포 배양을위한 회전 세포 배양 시스템 : 모델로 인간 Trophoblast 셀

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Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

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