Name: analysis of neural crest migration and differentiation by cross-species transplantation
Uploaded: 2012-02-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation at JoVE.com

الكتاب أشكر أعضاء مختبر Lwigale للنقد من المخطوطة. ويدعم SLG من قبل L. روث زمالة NRSA كيرشتاين من المعهد الوطني للعيون (F32 EY02167301). ويدعم PYL من قبل المعهد الوطني للعيون (EY018050).

1. احتضان الفرخ والبيض السمان إلى المرحلة المطلوبة لHH9 الأجنة، مرات حضانة نموذجية تتراوح بين 29-33 ساعة عند 38 درجة مئوية 63 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غسل أي حطام من البيض مع الماء الفاتر. </li><li style=";text-align:rig...

ووصف عمليات ترقيع من الأنبوب العصبي السمان في افراخ الدجاج المضيف هنا هي تقنية بسيطة وغير مكلفة لتعقب مجموعات سكانية فرعية محددة من الهجرة البلدان المساهمة الصافية النابعة من مناطق مختلفة على طول المحور rostro-الذيلية 21،67-69. هذه التقنية تستفيد من سهولة الحصول عل?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> بيض الدجاج </td><td> مختلف - نستخدم تكساس A &amp; M في جامعة الدواجن وزارة العلوم وتكساس. </td><td></td></tr><tr><td> بيض السمان </td><td> مختلف - نستخدم أوزاركس الشركة البيض، MO. </td><td></td></tr><tr><td> البيض الحاضنة (رقمية عبر الاقمار الصناعية 1502 رياضي حاضنة ث / الرطوبة 110-120 فولت AC) </td><td> <a href="http://www.poultrysupply.com" target="_blank">www.poultrysupply.com</a> </td><td> 1502 </td></tr><tr><td> دومون AA ملقط، INOX إبوكسي المغلفة </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11210-10 </td></tr><tr><td> سكوتش الشريط </td><td> أي مخزن مكتب التوريد </td><td></td></tr><tr><td> منحني إيريس الملقط </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11065-07 </td></tr><tr><td> أنامطار الدوحة الدولي الجديد حبر </td><td> أي متجر فن العرض </td><td></td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا (البنسلين، الستربتوميسين) الحل </td><td> VWR الدولية </td><td> 101447-068 </td></tr><tr><td> التعبئة الشريط واضح </td><td> أي مخزن مكتب التوريد </td><td></td></tr><tr><td> إبرة جهاز سحب </td><td> Narashige، اليابان </td><td> PE-21 </td></tr><tr><td> سحبت إبرة الزجاج، وجعلت 1،5-1،8 100mm س أنبوب زجاجي البورسليكات الشعرية </td><td> كيمبل مطاردة </td><td> 34500 99 </td></tr><tr><td> سحبت زجاج ماصة، جعلت من 5 ¾ &quot;باستور ماصة </td><td> فيشر العلمية </td><td> 13-678-6A </td></tr><tr><td> الفم ماصة جهاز (الشافطة الجمعية أنبوب للماصة microcapillary معايرة) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> A5177-52A </td></tr><tr><td> دومون # 5 ملقط </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 11251-30 </td></tr><tr><td> برميل للخمرسلك gsten، وقطره 0.1mm </td><td> VWR الدولية </td><td> AA10404-H2 </td></tr><tr><td> أصحاب الإبرة (مطلي بالنيكل حائز دبوس) </td><td> أدوات العلم غرامة </td><td> 26018-17 </td></tr><tr><td> QCPN ضدي </td><td> الدراسات التنموية ورم هجين البنك، جامعة ولاية ايوا </td><td> QCPN </td></tr><tr><td> اليكسا فلور الأضداد الثانوية (على سبيل المثال، اليكسا فلور 594 ماعز مكافحة فأر IgG1) </td><td> إينفيتروجن </td><td> A21125 </td></tr><tr><td> محلول رينغر (2L): <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 14.4g كلوريد الصوديوم </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.34g CaCl 2 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.74g بوكل </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.230g نا 2 هبو 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.04g KH 2 PO 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DDH 2 O إلى 2L </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التصفية والتعقيم </li></ul></td><td> كل الكواشف من العلم فيشر </td><td><ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7647-14-5 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10043-52-4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7447-40-7 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7558-79-4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7778-77-0 </li></ul></td></tr></tbody></table>

analysis of neural crest migration and differentiation by cross-species transplantation

Avian embryos provide a unique platform for studying many vertebrate developmental processes, due to the easy access of the embryos within the egg. Chimeric avian embryos, in which quail donor tissue is transplanted into a chick embryo in ovo, combine the power of indelible genetic labeling of cell populations with the ease of manipulation presented by the avian embryo.
Quail-chick chimeras are a classical tool for tracing migratory neural crest cells (NCCs)1-3. NCCs are a transient migratory population of cells in the embryo, which originate in the dorsal region of the developing neural tube4. They undergo an epithelial to mesenchymal transition and subsequently migrate to other regions of the embryo, where they differentiate into various cell types including cartilage5-13, melanocytes11,14-20, neurons and glia21-32. NCCs are multipotent, and their ultimate fate is influenced by 1) the region of the neural tube in which they originate along the rostro-caudal axis of the embryo11,33-37, 2) signals from neighboring cells as they migrate38-44, and 3) the microenvironment of their ultimate destination within the embryo45,46. Tracing these cells from their point of origin at the neural tube, to their final position and fate within the embryo, provides important insight into the developmental processes that regulate patterning and organogenesis.
Transplantation of complementary regions of donor neural tube (homotopic grafting) or different regions of donor neural tube (heterotopic grafting) can reveal differences in pre-specification of NCCs along the rostro-caudal axis2,47. This technique can be further adapted to transplant a unilateral compartment of the neural tube, such that one side is derived from donor tissue, and the contralateral side remains unperturbed in the host embryo, yielding an internal control within the same sample2,47. It can also be adapted for transplantation of brain segments in later embryos, after HH10, when the anterior neural tube has closed47.
Here we report techniques for generating quail-chick chimeras via neural tube transplantation, which allow for tracing of migratory NCCs derived from a discrete segment of the neural tube. Species-specific labeling of the donor-derived cells with the quail-specific QCPN antibody48-56 allows the researcher to distinguish donor and host cells at the experimental end point. This technique is straightforward, inexpensive, and has many applications, including fate-mapping, cell lineage tracing, and identifying pre-patterning events along the rostro-caudal axis45. Because of the ease of access to the avian embryo, the quail-chick graft technique may be combined with other manipulations, including but not limited to lens ablation40, injection of inhibitory molecules57,58, or genetic manipulation via electroporation of expression plasmids59-61, to identify the response of particular migratory streams of NCCs to perturbations in the embryo's developmental program. Furthermore, this grafting technique may also be used to generate other interspecific chimeric embryos such as quail-duck chimeras to study NCC contribution to craniofacial morphogenesis, or mouse-chick chimeras to combine the power of mouse genetics with the ease of manipulation of the avian embryo.62

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation at JoVE.com

Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation

يوصف هذا النهج لتحليل الهجرة والمصير النهائي من الطيور الخلايا العصبية في قمة السمان، فرخ أجنة خيالية. هذا الأسلوب هو أسلوب بسيط ومباشر لتعقب الخلايا العصبية خلال قمة للهجرة والتمايز التي يصعب على خلاف ذلك للتمييز في جنين الفرخ unmanipulated.

تحليل للهجرة كريست العصبية والتمايز بواسطة الصليب الأنواع زرع

Avian embryos provide a unique platform for studying many vertebrate developmental processes, due to the easy access of the embryos within the egg. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Growth and Differentiation of Adult Hippocampal Arctic Ground Squirrel Neural Stem Cells

نمو وتمايز الخلايا القطب الشمالي الأرضي الكبار السنجاب الجذعية العصبية الحصين

Arctic ground squirrels (Urocitellus parryii, AGS) are unique in their ability to hibernate with a core body temperature near or below freezing 1. These ...

Production of Chick Embryo Extract for the Cultivation of Murine Neural Crest Stem Cells

إنتاج استخراج الجنين الفرخ لزراعة الخلايا الجذعية العصبية الفئران كريست

The neural crest arises from the neuro-ectoderm during embryogenesis and persists only temporarily. Early experiments already proofed pluripotent ...

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

الفسيولوجية والمورفولوجية وتوصيف الكيميائية العصبية من الخلايا العصبية عن طريق التضمين الحركة

The role of individual neurons and their function in neuronal circuits is fundamental to understanding the neuronal mechanisms of sensory and motor ...

Isolation and Culture of Neural Crest Stem Cells from Human Hair Follicles

العزلة وثقافة العصبية الخلايا الجذعية من بصيلات الشعر كريست الإنسان

Hair follicles undergo lifelong growth and hair cycle is a well-controlled process involving stem cell proliferation and quiescence. Hair bulge is a ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

T-المتاهة التناوب القسري والمهام التمييز بين اليسار واليمين لتقييم العمل ومرجع الذاكرة في الفئران

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Analysis of Trunk Neural Crest Cell Migration using a Modified Zigmond Chamber Assay

تحليل العصبية كريست الهجرة جذع الخلية باستخدام التعديل الفحص غرفة زيجموند

Neural crest cells (NCCs) are a transient population of cells present in vertebrate development that emigrate from the dorsal neural tube (NT) after ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

كشف عن نقص الأكسجة Microregional في اللحاء المخي الفأر بواسطة التصوير ثنائي الفوتون من الإسفار NADH الذاتية

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

استنساخه سحق الفأر العصب الوركي وتقييم لاحق للتجديد من قبل الجامعة جبل تحليل العضلات

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية كريست من الأنبوبة العصبية الجنينية الفئران

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field

A الفحص انجذاب غلفاني لتحليل حركية العصبية السلائف الهجرة خلية في الحقل الحالي مباشرة التطبيقية خارجيا الكهربائية

The discovery of neural stem and progenitor  cells (collectively termed neural precursor cells) (NPCs) in the adult  mammalian brain has led to a body of ...