Name: analysis of neural crest migration and differentiation by cross-species transplantation
Uploaded: 2012-02-07T13:00:00
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著者は、原稿の批評のためにLwigale研究室のメンバーに感謝。 SLGは、国立眼研究所（F32 EY02167301）からルースL.キルシュシュタインNRSAフェローシップでサポートされています。 PYLは、国立眼研究所（EY018050）によってサポートされています。

1。希望するステージにインキュベートひよこやウズラの卵 HH9胚については、典型的なインキュベーション時間は38℃63に29から33時間の範囲<ol><li>ぬるま湯と卵からの破片を洗ってください。 </li><li>水平トレイ上に鶏の卵を配置します。鉛筆で上を向く側をマークし、これは胚がローカライズされる領域に対応します。ウズラの卵平滑末端をインキュベートしま...

ホストのニワトリ胚にウズラの神経管の移植はrostro-尾軸に沿って21,67-69さまざまな地域から発せられるNCCSを移行し、特定の集団を追跡するための簡単で安価な手法であるここで説明する。この手法は、実験的に調べるために、鳥類の胚へのアクセスのしやすさ（哺乳類胚に比べて）を活用し、そのような組織切除、阻害分子の注入、または発現プラスミドのエレクトロポレーション?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>ひよこの卵</td><td>様々な - 私たちはテキサスA＆M大学の家禽科学部、TXを使用しています。 </td><td></td></tr><tr><td>ウズラの卵</td><td>様々な - 我々はオザークエッグ社、MOを使用しています。 </td><td></td></tr><tr><td>卵インキュベーター（デジタルリードアウト1502スポーツマンインキュベーターのw /湿度110から120ボルトAC） </td><td> <a href="http://www.poultrysupply.com" target="_blank">www.poultrysupply.com</a> </td><td> 1502 </td></tr><tr><td>デュモンAAピンセット、イノックスエポキシコーティング</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11210から10 </td></tr><tr><td>スコッチテープ</td><td>すべてのオフィス用品店</td><td></td></tr><tr><td>湾曲したアイリス鉗子</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11065から07 </td></tr><tr><td>私はndiaインク</td><td>任意の画材店</td><td></td></tr><tr><td>ペン/連鎖球菌（ペニシリン、ストレプトマイシン）ソリューション</td><td> VWRインターナショナル</td><td> 101447-068 </td></tr><tr><td>明確なパッキングテープ</td><td>すべてのオフィス用品店</td><td></td></tr><tr><td>針引っ張って装置</td><td> Narashige、日本</td><td> PE-21 </td></tr><tr><td> 1.5から1.8×100ホウケイ酸ガラス毛細管から作られたプルアップガラス針、 </td><td>キンブルチェイス</td><td> 34500 99 </td></tr><tr><td> 5から作られたガラスピペット、¾ &quot;パスツールピペットを引く</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 13から678-6A </td></tr><tr><td>口ピペット装置（キャリブレーションマイクロキャピラリーピペット用吸引チューブアセンブリ） </td><td> Sigma-Aldrich社</td><td> A5177-52A </td></tr><tr><td>デュモン＃5鉗子</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 11251から30 </td></tr><tr><td>トゥンgsten線、0.1ミリメートルの直径</td><td> VWRインターナショナル</td><td> AA10404-H2 </td></tr><tr><td>ニードルホルダー（ニッケルメッキピンホルダー） </td><td>ファイン科学ツール</td><td> 26018から17 </td></tr><tr><td> QCPN抗血清</td><td>発達研究ハイブリドーマバンク、アイオワ大学</td><td> QCPN </td></tr><tr><td>のAlexa Fluor®二次抗体（例えば、Alexa Fluor 594のヤギ抗マウスIgG1） </td><td>インビトロジェン</td><td> A21125 </td></tr><tr><td>リンゲル液（2L）： <ul><li> 14.4グラムのNaCl </li><li> 0.34グラムのCaCl 2 </li><li> 0.74グラムのKCl </li><li> 0.230グラムのNa 2 HPO 4 </li><li> 0.04グラムのKH 2 PO 4 </li><li> 2LまでのddH 2 O </li><li>フィルタとオートクレーブ</li></ul></td><td>フィッシャーサイエンティフィックからすべての試薬</td><td><ul><li> 7647-14-5 </li><li> 10043-52-4 </li><li> 7447-40-7 </li><li> 7558-79-4 </li><li> 7778-77-0 </li></ul></td></tr></tbody></table>

analysis of neural crest migration and differentiation by cross-species transplantation

鳥類の胚は卵内の胚​​の簡単なアクセスのために多くの脊椎動物の発達過程を研究するためのユニークなプラットフォームを提供します。ウズラのドナー組織が​​OVOでニワトリ胚に移植されたキメラ鳥類の胚は、鳥類の胚によって提示された操作の容易さと細胞集団の消えない遺伝標識のパワーを兼ね備えています。 ウズラ-ニワトリキメラ1-3渡り鳥神経堤細胞（NCCS）をトレースするための古典的なツールです。 NCCSは、発展途上の神経管4の背側領域に由来する胚における細胞の一過性の渡り鳥集団である。彼らは、葉への移行上皮を受け、その後、彼らは軟骨5-13、メラノサイト11,14-20、ニューロンとグリア21から32までを含む様々な種類の細胞に分化する胚の他の地域に移行します。 NCCSは多能性であり、その究極の運命はインフルです。1）彼らは胚11,33-37、2 rostro -尾軸に沿って発信された神経管の領域）が38から44に移行するように隣接セルからの信号を、その究極の3）微小で積んだ胚45,46内の宛先。胚内での最終的な位置と運命に、神経管に由来それらの点から、これらの細胞を追跡し、パターニングおよび器官形成を制御する発達過程に重要な洞察を提供します。 ドナー神経管（グラフトホモトピック）またはドナー神経管（グラフト異所性）の異なる領域の相補的領域の移植はrostro-尾軸に沿って2,47 NCCSの事前の仕様の違いを明らかにすることができます。この手法は、さらに一側がドナー組織由来されるように、神経管の一方的なコンパートメントを移植するように適応し、反対側の遺跡は、ホスト胚に動じない、yiをすることができます同じサンプル2,47の内部制御を薪。前方神経管47を閉じたときにも、HH10した後、後で胚の脳セグメントの移植に適合させることができます。 ここでは、神経管の独立したセグメントから派生した渡り鳥NCCSのトレースを可能にする神経管移植を介して、ウズラ - ニワトリキメラを生成するための手法を報告します。ウズラ固有QCPN抗体を48から56のドナー由来細胞の種特異的標識は、研究者は実験終了時点で、ドナーと宿主細胞を区別することができます。この手法は、安価で、簡単で、トレース、およびrostro-尾軸45に沿って事前にパターニングイベントを識別する運命マッピング、細胞系譜を含む多くのアプリケーションを持っています。ので、鳥類の胚へのアクセスのしやすさから、ウズラ-ニワトリ移植技術は、他の操作と組み合わせて含むが、レンズのアブレーション4に限定されるものではない0の場合、胚の発達プログラムの摂動にNCCSの特定の渡り鳥ストリームの応答を識別するために、阻害分子57,58、または59から61発現プラスミドのエレクトロポレーションを介した遺伝子操作の注入。さらに、この移植技術はまた、鳥類の胚の操作のしやすさとマウス遺伝学の力を組み合わせることがNCCの顔面形態形成への貢献や、マウス、ニワトリキメラを勉強するようなウズラ、アヒルのキメラのような他の種間キメラ胚を生成するために使用することができ62

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Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation

ウズラ - ニワトリキメラ胚における鳥類の神経堤細胞の遊走と最終的な運命を分析するためのアプローチが説明されています。このメソッドは、unmanipulatedニワトリ胚内で区別することはそうでなければ困難な移行および分化における神経堤細胞をトレースするためのシンプルで簡単なテクニックです。

クロス種の移植による神経堤の移行および分化の解析

Avian embryos provide a unique platform for studying many vertebrate developmental processes, due to the easy access of the embryos within the egg. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Growth and Differentiation of Adult Hippocampal Arctic Ground Squirrel Neural Stem Cells

成人海馬ホッキョクジリス神経幹細胞の増殖と分化

Arctic ground squirrels (Urocitellus parryii, AGS) are unique in their ability to hibernate with a core body temperature near or below freezing 1. These ...

Production of Chick Embryo Extract for the Cultivation of Murine Neural Crest Stem Cells

マウス神経堤幹細胞の培養のためのニワトリ胚抽出物の製造

The neural crest arises from the neuro-ectoderm during embryogenesis and persists only temporarily. Early experiments already proofed pluripotent ...

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

運動によって変調された神経細胞の生理的、形態学的および神経化学的キャラクタリゼーション

The role of individual neurons and their function in neuronal circuits is fundamental to understanding the neuronal mechanisms of sensory and motor ...

Isolation and Culture of Neural Crest Stem Cells from Human Hair Follicles

人間の毛包から神経堤幹細胞の単離および培養

Hair follicles undergo lifelong growth and hair cycle is a well-controlled process involving stem cell proliferation and quiescence. Hair bulge is a ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

マウスで作業していて、メモリの参照を評価するためのT-迷路強制交替と左右弁別課題

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Analysis of Trunk Neural Crest Cell Migration using a Modified Zigmond Chamber Assay

修正Zigmondチャンバーアッセイを使用してトランク神経冠細胞移動の解析

Neural crest cells (NCCs) are a transient population of cells present in vertebrate development that emigrate from the dorsal neural tube (NT) after ...

Detection of Microregional Hypoxia in Mouse Cerebral Cortex by Two-photon Imaging of Endogenous NADH Fluorescence

内在性NADH蛍光の二光子イメージングによるマウス大脳皮質におけるMicroregional低酸素の検出

The brain's ability to function at high levels of metabolic demand depends on continuous oxygen supply through blood flow and tissue oxygen diffusion. ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

ホールマウントマッスル分析による再現性のあるマウスの坐骨神経クラッシュと再生のその後の評価

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

胎児マウス神経管から神経堤細胞の単離および培養

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field

外部から印加された直流電界における神経前駆細胞の移行動態の解析のための走電性アッセイ

The discovery of neural stem and progenitor  cells (collectively termed neural precursor cells) (NPCs) in the adult  mammalian brain has led to a body of ...