Name: ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection
Uploaded: 2012-11-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

وكان ذلك بدعم من بنك العيون ليونز وادي ديلاوير لا تقدر بثمن لهذا العمل. كان الضد الأولية الماوس وحيدة النسيلة ضد ICP8 هدية عينية من الدكتور ديفيد Knipe (كلية هارفارد الطبية). نشكر أيضا الدكتور ستيفن جينينغز (جامعة دريكسيل كلية الطب) والدكتور بيتر Laibson (الوصايا معهد العيون) لإجراء مناقشات مفيدة والخبرات.

تم شراء جميع المعدات والكواشف معقمة أو تم تعقيمها قبل الإجراء. توضح هذه المقالة خطوات إنشاء نموذج الجسم الحي السابقين بدءا العين قبل منزوعة النواة. في تجاربنا، ونحن نستخدم كل مقل العيون العذبة من الأرانب (8-12 أسبوعا) الشباب البيضاء (PEL-فريز الحيوية، روجرز، AR). وبال...

<ol>
	<li>Kaye, S., Choudhary, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpes+simplex+keratitis.">Herpes simplex keratitis.</a> Prog. Retin. Eye Res. 25, 355-380 (2006).</li><li>Holmberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enucleation+of+exotic+pets.">Enucleation of exotic pets.</a> Journal of Exotic Pet Medicine. 16, 88-94 (2007).</li><li>Remeijer, L., Osterhaus, A., Verjans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+herpes+simplex+virus+keratitis:+the+pathogenesis+revisited.">Human herpes simplex virus keratitis: the pathogenesis revisited.</a> Ocul. Immunol. Inflamm. 12, 255-285 (2004).</li><li>Foreman, D. M., Pancholi, S., Jarvis-Evans, J., McLeod, D., Boulton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+organ+culture+model+for+assessing+the+effects+of+growth+factors+on+corneal+re-epithelialization.">A simple organ culture model for assessing the effects of growth factors on corneal re-epithelialization.</a> Exp. Eye Res. 62, 555-564 (1996).</li><li>Xu, K. P., Li, X. F., Yu, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+organ+culture+model+for+assessing+epithelial+responses+to+surfactants.">Corneal organ culture model for assessing epithelial responses to surfactants.</a> Toxicol. Sci. 58, 306-314 (2000).</li><li>Klausner, E. A., Peer, D., Chapman, R. L., Multack, R. F., Andurkar, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+gene+therapy.">Corneal gene therapy.</a> J. Control Release. 124, 107-133 (2007).</li><li>Halford, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ICP0+antagonizes+Stat+1-dependent+repression+of+herpes+simplex+virus:+implications+for+the+regulation+of+viral+latency.">ICP0 antagonizes Stat 1-dependent repression of herpes simplex virus: implications for the regulation of viral latency.</a> Virol. J. 3, 44 (2006).</li><li>Bhattacharjee, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+treatment+of+ocular+HSK+with+a+human+apolipoprotein+E+mimetic+peptide+in+a+mouse+eye+model.">Effective treatment of ocular HSK with a human apolipoprotein E mimetic peptide in a mouse eye model.</a> Invest Ophthalmol Vis. Sci. 49, 4263-4268 (2008).</li><li>Novitskaya, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Difficulties+imaging+herpes+simplex+keratitis+with+fluorescein+isothiocynate-labeled+anti-HSV-1+antibodies+in+an+ex+vivo+model.">Difficulties imaging herpes simplex keratitis with fluorescein isothiocynate-labeled anti-HSV-1 antibodies in an ex vivo model.</a> Cornea. 28, 421-425 (2009).</li><li>Sharma, A., Shimeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+immunofluorescence+to+diagnose+herpes+simplex+virus+keratitis+in+mice.">In vivo immunofluorescence to diagnose herpes simplex virus keratitis in mice.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 785-788 (1997).</li></ol>

في هذه المقالة الفيديو وصفنا طريقة لدراسة القرنية الطلائية الحاد HSV-1 الإصابة في نموذج الجسم الحي السابقين. هذا النموذج هو نقطة انطلاق مفيدة بين في المختبر والمجراة في نماذج، لأنه يسمح للمصادقة الناحية الفسيولوجية-دقيق لنتائج زراعة الخلايا، وبالتالي يحد م?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكواشف / لوازم </td><td> شركة </td><td> كتالوج # </td></tr><tr><td> الحد الأدنى الضروري متوسطة (MEM) </td><td> Mediatech </td><td> 10-010-CV </td></tr><tr><td> غير الأحماض الأمينية الأساسية (الحل 100X) </td><td> Mediatech </td><td> 25-025-CI </td></tr><tr><td> الجلوتامين L- </td><td> Mediatech </td><td> 25-005-CI </td></tr><tr><td> البنسلين G ملح الصوديوم </td><td> سيجما </td><td> P3032 </td></tr><tr><td> الستربتوميسين سلفات ملح </td><td> سيجما </td><td> S9137 </td></tr><tr><td> الاغاروز </td><td> إينفيتروجن </td><td> 15510-027 </td></tr><tr><td> التخزين المؤقت المالحة الفوسفات (PBS) </td><td> أعد المختبر </td><td> N / A </td></tr><tr><td> التربسين EDTA (1X) &lt;/ TD&gt; <td> Mediatech </td><td> 25-053-CI </td></tr><tr><td> DNeasy الدم والأنسجة كيت </td><td> QIAGEN </td><td> 69504 </td></tr><tr><td> RNeasy البسيطة كيت </td><td> QIAGEN </td><td> 74104 </td></tr><tr><td> Laemmli العازلة </td><td> أعد المختبر </td><td> N / A </td></tr><tr><td> درجة الحرارة المثلى للقطع (OCT) مجمع </td><td> الأنسجة تيك </td><td> 4583 </td></tr><tr><td> العيون كلها الأرنب (الشباب) </td><td> PEL-فريز </td><td> 41211-2 </td></tr><tr><td> الإنسان القرنيات والعيون الجامع </td><td> بنك العيون المحلية </td><td> N / A </td></tr><tr><td> 12 سبوت لوحة الخزف حسنا </td><td> توريد مختبر أفوجادرو </td><td> 1877 </td></tr><tr><td> 35 ملم صحن زراعة الأنسجة </td><td> صقر </td><td> 353001 </td></tr><tr><td> حسنا 6خلية لوحة الثقافة </td><td> غرينر بيو واحد </td><td> 657160 </td></tr><tr><td> Cryomold المتوسطة </td><td> الأنسجة تيك </td><td> 4566 </td></tr></tbody></table>

ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection

التهاب القرنية الهربس هو واحد من أشد الأمراض المرتبطة بفيروس الهربس البسيط من النوع 1 (HSV-1). التهاب القرنية الهربس هو حاليا السبب الرئيسي للعمى القرنية سواء المستمدة من العدوى المرتبطة بها وفي العالم المتقدم. عرض نموذجية من التهاب القرنية الهربس تشمل التهاب في ظهارة القرنية وأحيانا سدى القرنية أعمق والبطانة، مما يؤدي إلى الأمراض مثل القرنية كما تندب دائم، رقيق، والتعتيم 1. تدرس تقليديا القرنية HSV-1 الإصابة في نوعين من النماذج التجريبية. ونموذج في المختبر، حيث يتم تربيتها من المصابين monolayers الخلايا الظهارية القرنية في طبق بتري، ويقدم بساطة، مستوى عال من التكرار والتجارب سريع، وتكاليف منخفضة نسبيا. من ناحية أخرى، فإن نموذج في الجسم الحي، حيث يتم تلقيح الحيوانات مثل الأرانب أو الفئران مباشرة في القرنية، ويقدم الفسيولوجية متطورة للغايةالنظام، ولكن لديه ارتفاع التكاليف، تعد التجارب، من الضروري رعاية الحيوانات، ودرجة أكبر من التباين. في هذه المقالة الفيديو، ونحن نقدم مظاهرة مفصل لنموذج جديد من خارج الجسم القرنية الطلائية العدوى HSV-1، والذي يجمع بين نقاط القوة في كل من المختبر في وفي نماذج الجسم الحي. نموذج الجسم الحي السابقين يستخدم القرنيات سليمة الحفاظ organotypically في الثقافة والمصابين HSV-1. استخدام نموذج الجسم الحي السابقين يسمح للغاية من الناحية الفسيولوجية الاستنتاجات المستندة، ومع ذلك فهو غير مكلفة نوعا ما، ويتطلب التزاما زمنية مماثلة لتلك التي في النموذج المختبر.

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

في هذه المقالة الفيديو وصفنا استخدام جديد<em&gt; خارج الجسم</em&gt; نموذج من الهربس البسيط من النوع الحاد فيروس العدوى الظهارية القرنية I.

خارج الحي النموذجي القرنية عضوي النمط من الهربس البسيط من النوع الحاد طلائي الفيروسات I العدوى

Herpes keratitis is one of the most severe pathologies associated with the herpes simplex virus-type 1 (HSV-1).  Herpes keratitis is currently the leading ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

السابقين التثقيف المجراة من الجامعة، تطوير الأمخاخ ذبابة الفاكهة

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

The Corneal Micropocket Assay: A Model of Angiogenesis in the Mouse Eye

والقرنية Micropocket الفحص: نموذج من الأوعية الدموية في العين ماوس

The mouse corneal micropocket assay is a robust and quantitative in vivo assay for evaluating angiogenesis. By using standardized slow-release pellets ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

فيفو السابقين الاستعدادات للالميكعي الجهاز سليمة والإكسسوار الشم لمبة

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

ل<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; يسببها الليزر اصابات الحبل الشوكي نموذج لتقييم آليات محور عصبي تنكس في الوقت الحقيقي

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

مراقبة الحركة الهدبية من الخلايا المشيمية الضفيرة طلائي<em&gt; السابقين فيفو</em

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. ...

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

فيفو السابقين علم البصريات الوراثي تشريح الدوائر الخوف في الدماغ شرائح

Optogenetic approaches are now widely used to study the function of neural populations and circuits by combining targeted expression of light-activated ...

Visualization and Live Imaging of Oligodendrocyte Organelles in Organotypic Brain Slices Using Adeno-associated Virus and Confocal Microscopy

والتصور وتصوير مباشر من العضيات أوليجوديندروسيتي في المخ أورجانوتيبيك الشرائح باستخدام الفيروسات المرتبطة بالغدد والفحص المجهري [كنفوكل]

Neurons rely on the electric insulation and trophic support of myelinating oligodendrocytes. Despite the importance of oligodendrocytes, the advanced ...

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

في الموقع تصور نمو المحور العصبي وديناميكيات مخروط النمو في مزارع شرائح الدماغ الجنينية الحادة خارج الجسم الحي

During neuronal development, axons navigate the cortical environment to reach their final destinations and establish synaptic connections. Growth cones ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

الثقافات العضوية للقشرة البشرية البالغة كنموذج خارج الجسم الحي لزراعة الخلايا الجذعية البشرية والتحقق من صحتها

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...

Using Chick Embryo Brain as a Model to Study Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior (Video) | JoVE 

استخدام دماغ جنين الفرخ كنموذج للتحليلات داخل الجسم الحي وخارج الجسم الحي لسلوك خلايا الورم الأرومي الدبقي البشري

The chick embryo has been an ideal model system for the study of vertebrate development, particularly for experimental manipulations. Use of the chick ...