Name: ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection
Uploaded: 2012-11-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

התמיכה של בנק עין אריות דלאוור העמק הייתה רבה ערך עבור עבודה זו. נוגדן חד שבטי עכבר העיקרי נגד ICP8 היה מתנה מסוג ד&quot;ר דוד Knipe (הספר לרפואת הארוורד). אנו מודים גם לד&quot;ר סטיבן ג&#39;נינגס (דרקסל מכללה לרפואה של אוניברסיטה) ופיטר ד&quot;ר Laibson (צוואות Eye Institute) לדיונים מועילים ואת המומחיות.

כל ריאגנטים והציוד נרכשו סטרילי או עוקרו לפני ההליך. מאמר זה מתאר את השלבים של הקמת מודל vivo לשעבר מתחיל בעין מראש enucleated. בניסויים שלנו, אנו משתמשים בעיניים שלמות טריות מ( 8-12 wks) ארנבות בקנים צעירות (PEL-freez ביולוגי, רוג&#39;רס, AR). בנוסף, אנו משתמשים בקרניות של אדם שנלקחו...

<ol>
	<li>Kaye, S., Choudhary, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpes+simplex+keratitis.">Herpes simplex keratitis.</a> Prog. Retin. Eye Res. 25, 355-380 (2006).</li><li>Holmberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enucleation+of+exotic+pets.">Enucleation of exotic pets.</a> Journal of Exotic Pet Medicine. 16, 88-94 (2007).</li><li>Remeijer, L., Osterhaus, A., Verjans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+herpes+simplex+virus+keratitis:+the+pathogenesis+revisited.">Human herpes simplex virus keratitis: the pathogenesis revisited.</a> Ocul. Immunol. Inflamm. 12, 255-285 (2004).</li><li>Foreman, D. M., Pancholi, S., Jarvis-Evans, J., McLeod, D., Boulton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+organ+culture+model+for+assessing+the+effects+of+growth+factors+on+corneal+re-epithelialization.">A simple organ culture model for assessing the effects of growth factors on corneal re-epithelialization.</a> Exp. Eye Res. 62, 555-564 (1996).</li><li>Xu, K. P., Li, X. F., Yu, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+organ+culture+model+for+assessing+epithelial+responses+to+surfactants.">Corneal organ culture model for assessing epithelial responses to surfactants.</a> Toxicol. Sci. 58, 306-314 (2000).</li><li>Klausner, E. A., Peer, D., Chapman, R. L., Multack, R. F., Andurkar, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+gene+therapy.">Corneal gene therapy.</a> J. Control Release. 124, 107-133 (2007).</li><li>Halford, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ICP0+antagonizes+Stat+1-dependent+repression+of+herpes+simplex+virus:+implications+for+the+regulation+of+viral+latency.">ICP0 antagonizes Stat 1-dependent repression of herpes simplex virus: implications for the regulation of viral latency.</a> Virol. J. 3, 44 (2006).</li><li>Bhattacharjee, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+treatment+of+ocular+HSK+with+a+human+apolipoprotein+E+mimetic+peptide+in+a+mouse+eye+model.">Effective treatment of ocular HSK with a human apolipoprotein E mimetic peptide in a mouse eye model.</a> Invest Ophthalmol Vis. Sci. 49, 4263-4268 (2008).</li><li>Novitskaya, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Difficulties+imaging+herpes+simplex+keratitis+with+fluorescein+isothiocynate-labeled+anti-HSV-1+antibodies+in+an+ex+vivo+model.">Difficulties imaging herpes simplex keratitis with fluorescein isothiocynate-labeled anti-HSV-1 antibodies in an ex vivo model.</a> Cornea. 28, 421-425 (2009).</li><li>Sharma, A., Shimeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+immunofluorescence+to+diagnose+herpes+simplex+virus+keratitis+in+mice.">In vivo immunofluorescence to diagnose herpes simplex virus keratitis in mice.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 785-788 (1997).</li></ol>

במאמר זה יתאר וידאו שיטה ללימוד הזיהום חריף בקרנית אפיתל HSV-1 במודל vivo לשעבר. המודל הזה הוא קרש קפיצה שימושית בין במבחנה במודלי vivo, משום שהיא מאפשרת לאימות פיזיולוגית מדויקת-תוצאות תרביות תאים, ובכך מגבילה את כמות הניסויים בבעלי חיים שהם צריכים לבצע. בנוסף, מ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> ריאגנטים / ספקים </td><td> חברה </td><td> קטלוג # </td></tr><tr><td> בינוני חיוני מינימאלי (MEM) </td><td> Mediatech </td><td> 10-010-CV </td></tr><tr><td> חומצות אמינו לא חיוניות (פתרון 100x) </td><td> Mediatech </td><td> 25-025-CI </td></tr><tr><td> L-גלוטמין </td><td> Mediatech </td><td> 25-005-CI </td></tr><tr><td> מלח נתרן G פניצילין </td><td> סיגמא </td><td> P3032 </td></tr><tr><td> מלח סולפט סטרפטומיצין </td><td> סיגמא </td><td> S9137 </td></tr><tr><td> Agarose </td><td> Invitrogen </td><td> 15510-027 </td></tr><tr><td> נאגר מלוח פוספט (PBS) </td><td> הוכן במעבדה </td><td> N / </td></tr><tr><td> טריפסין EDTA (1x) &lt;/ Td&gt; <td> Mediatech </td><td> 25-053-CI </td></tr><tr><td> דם DNeasy &amp; קיט רקמות </td><td> Qiagen </td><td> 69504 </td></tr><tr><td> ערכת המיני RNeasy </td><td> Qiagen </td><td> 74104 </td></tr><tr><td> Laemmli המאגר </td><td> הוכן במעבדה </td><td> N / </td></tr><tr><td> חיתוך טמפרטורה אופטימלי מתחם (אוקטובר) </td><td> רקמה-Tek </td><td> 4583 </td></tr><tr><td> עיני ארנב שלמות (צעיר) </td><td> PEL-freez </td><td> 41211-2 </td></tr><tr><td> קרניות עיני אדם ושלם </td><td> בנק עיניים מקומי </td><td> N / </td></tr><tr><td> צלחת פורצלן ובכן ספוט 12 </td><td> אספקת מעבדת אבוגדרו </td><td> 1877 </td></tr><tr><td> תבשיל תרבית רקמה 35 מ&quot;מ </td><td> בז </td><td> 353001 </td></tr><tr><td> 6 ובכןפלייט תא התרבות </td><td> גריינר ביו אחד </td><td> 657160 </td></tr><tr><td> Cryomold ביניים </td><td> רקמה-Tek </td><td> 4566 </td></tr></tbody></table>

ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection

keratitis הרפס הוא האחת הפתולוגיות החמורות ביותר הקשורות לוירוסים מסוג 1 (HSV-1) הרפס סימפלקס. keratitis הרפס הוא כיום הגורם המוביל לשניהם נגזרו קרנית וזיהום הקשור בעיוורון בעולם המפותח. מצגת טיפוסית של הרפס קרטיטיס כוללת דלקת של האפיתל של הקרנית ולפעמים עמוקים יותר סטרומה ואנדותל בקרנית, מה שמוביל למחל קרנית קבועות כגון צלקות, דלילים, ואטימות 1. זיהום קרני HSV-1 הוא למד באופן מסורתי בשני סוגים של מודלי ניסויים. במבחנת מודל, שבי monolayers תרבית של תאי אפיתל קרניים נגוע בצלחת פטרי, מציע פשטות רמה גבוהה של replicability, ניסויים מהירים, ועלויות נמוכות יחסית. מצד השני, in vivo מודל, שבי חיות כמו ארנבים או עכברים מחוסנות באופן ישיר בקרנית, מציע פיסיולוגי מתוחכם ביותרמערכת, אבל יש עלויות גבוהות יותר, ניסויים ארוכים יותר, טיפול בבעלי חיים הכרחיים, ובמידה רבה יותר של השתנות. במאמר זה וידאו, אנו מספקים הדגמה מפורטת של דגם חדש vivo לשעבר של זיהום HSV-1 אפיתל קרני, המשלב את היתרונות של שניהם במבחנה במודלי vivo. מודל vivo לשעבר מנצל קרניות שלמות שמרו organotypically בתרבות ונגועה בHSV-1. השימוש במודל vivo לשעבר מאפשר למסקנות מאוד מבוססות מבחינה פיזיולוגית, ובכל זאת היא לא זולה ודורשת מחויבות זמן דומים לזה של מודל במבחנה.

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

במאמר זה יתאר וידאו השימוש חדש<em&gt; Vivo לשעבר</em&gt; מודל של הרפס סימפלקס סוג וירוס האקוטי אני זיהום האפיתל של קרנית.

דגם גופיים Organotypic הקרני של הרפס סימפלקס סוג אפיתל החריף וירוס אני זיהום

Herpes keratitis is one of the most severe pathologies associated with the herpes simplex virus-type 1 (HSV-1).  Herpes keratitis is currently the leading ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

אקס culturing vivo של שלם, פיתוח המוח תסיסנית

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

The Corneal Micropocket Assay: A Model of Angiogenesis in the Mouse Eye

קרנית Micropocket Assay: דגם של אנגיוגנזה בעין העכבר

The mouse corneal micropocket assay is a robust and quantitative in vivo assay for evaluating angiogenesis. By using standardized slow-release pellets ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo הכנות של הנורה Vomeronasal האיברים ואבזר חוש הריח הפגועה

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; חוט השדרה מושרה לייזר הפגיעה דגם להערכת מנגנוני axonal הניוון בזמן אמת

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

תצפית של תנועת ריסי תאי אפיתל דמית העין מקלעת<em&gt; Ex Vivo</em

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. ...

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo optogenetic Dissection של מעגלי פחד פרוסות המוח

Optogenetic approaches are now widely used to study the function of neural populations and circuits by combining targeted expression of light-activated ...

Visualization and Live Imaging of Oligodendrocyte Organelles in Organotypic Brain Slices Using Adeno-associated Virus and Confocal Microscopy

ויזואליזציה והדמיה בשידור חי של Organelles אוליגודנדרוציטים בפרוסות Organotypic המוח באמצעות וירוס Adeno-הקשורים ומיקרוסקופיה קונפוקלית

Neurons rely on the electric insulation and trophic support of myelinating oligodendrocytes. Despite the importance of oligodendrocytes, the advanced ...

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

באתרו הדמיה של גדילה וצמיחה של דינמיקת חרוט אקסון בתרביות פרוסות מוח עובריות אקס-ויוו חריפות

During neuronal development, axons navigate the cortical environment to reach their final destinations and establish synaptic connections. Growth cones ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

תרביות אורגנוטיפיות של קליפת המוח האנושית הבוגרת כמודל Ex vivo להשתלה ואימות של תאי גזע אנושיים

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...

Using Chick Embryo Brain as a Model to Study Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior (Video) | JoVE 

שימוש במוח עובר אפרוח כמודל לניתוחי In Vivo ו - Ex Vivo של התנהגות תאי גליובלסטומה אנושיים

The chick embryo has been an ideal model system for the study of vertebrate development, particularly for experimental manipulations. Use of the chick ...