Name: ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection
Uploaded: 2012-11-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

डेलावेयर घाटी के लायंस नेत्र बैंक के समर्थन के इस काम के लिए अमूल्य था. ICP8 के खिलाफ प्राथमिक माउस मोनोक्लोनल एंटीबॉडी डॉ. डेविड Knipe (हार्वर्ड मेडिकल स्कूल) से एक तरह का उपहार था. हम भी उपयोगी चर्चा और विशेषज्ञता के लिए डॉ. स्टीफन जेनिंग्स (मेडिसिन के Drexel विश्वविद्यालय कॉलेज) और डॉ. पीटर Laibson (विल्स नेत्र संस्थान) धन्यवाद.

सभी अभिकर्मकों और उपकरण बाँझ खरीदे गए थे या प्रक्रिया से पहले निष्फल रहे थे. इस लेख में पूर्व vivo पूर्व enucleated आंख के साथ शुरुआत मॉडल की स्थापना के चरणों का वर्णन करता है. हमारे प्रयोगों में, हम युवा (8-12 wks) स?...

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	<li>Kaye, S., Choudhary, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpes+simplex+keratitis.">Herpes simplex keratitis.</a> Prog. Retin. Eye Res. 25, 355-380 (2006).</li><li>Holmberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enucleation+of+exotic+pets.">Enucleation of exotic pets.</a> Journal of Exotic Pet Medicine. 16, 88-94 (2007).</li><li>Remeijer, L., Osterhaus, A., Verjans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+herpes+simplex+virus+keratitis:+the+pathogenesis+revisited.">Human herpes simplex virus keratitis: the pathogenesis revisited.</a> Ocul. Immunol. Inflamm. 12, 255-285 (2004).</li><li>Foreman, D. M., Pancholi, S., Jarvis-Evans, J., McLeod, D., Boulton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+organ+culture+model+for+assessing+the+effects+of+growth+factors+on+corneal+re-epithelialization.">A simple organ culture model for assessing the effects of growth factors on corneal re-epithelialization.</a> Exp. Eye Res. 62, 555-564 (1996).</li><li>Xu, K. P., Li, X. F., Yu, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+organ+culture+model+for+assessing+epithelial+responses+to+surfactants.">Corneal organ culture model for assessing epithelial responses to surfactants.</a> Toxicol. Sci. 58, 306-314 (2000).</li><li>Klausner, E. A., Peer, D., Chapman, R. L., Multack, R. F., Andurkar, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+gene+therapy.">Corneal gene therapy.</a> J. Control Release. 124, 107-133 (2007).</li><li>Halford, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ICP0+antagonizes+Stat+1-dependent+repression+of+herpes+simplex+virus:+implications+for+the+regulation+of+viral+latency.">ICP0 antagonizes Stat 1-dependent repression of herpes simplex virus: implications for the regulation of viral latency.</a> Virol. J. 3, 44 (2006).</li><li>Bhattacharjee, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+treatment+of+ocular+HSK+with+a+human+apolipoprotein+E+mimetic+peptide+in+a+mouse+eye+model.">Effective treatment of ocular HSK with a human apolipoprotein E mimetic peptide in a mouse eye model.</a> Invest Ophthalmol Vis. Sci. 49, 4263-4268 (2008).</li><li>Novitskaya, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Difficulties+imaging+herpes+simplex+keratitis+with+fluorescein+isothiocynate-labeled+anti-HSV-1+antibodies+in+an+ex+vivo+model.">Difficulties imaging herpes simplex keratitis with fluorescein isothiocynate-labeled anti-HSV-1 antibodies in an ex vivo model.</a> Cornea. 28, 421-425 (2009).</li><li>Sharma, A., Shimeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+immunofluorescence+to+diagnose+herpes+simplex+virus+keratitis+in+mice.">In vivo immunofluorescence to diagnose herpes simplex virus keratitis in mice.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 785-788 (1997).</li></ol>

इस वीडियो लेख में हम एक पूर्व vivo मॉडल में तीव्र corneal उपकला एचएसवी -1 संक्रमण का अध्ययन करने के लिए एक विधि का वर्णन है. इस मॉडल को इन विट्रो में और vivo मॉडल में के बीच एक उपयोगी कदम पत्थर है, क्योंक?...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मकों आपूर्ति / </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र # </td></tr><tr><td> न्यूनतम आवश्यक मध्यम (सदस्य) </td><td> Mediatech </td><td> 10-010-CV </td></tr><tr><td> गैर आवश्यक अमीनो एसिड (100x समाधान) </td><td> Mediatech </td><td> 25-025-CI </td></tr><tr><td> एल Glutamine </td><td> Mediatech </td><td> 25-005-CI </td></tr><tr><td> पेनिसिलीन जी सोडियम साल्ट </td><td> सिग्मा </td><td> P3032 </td></tr><tr><td> स्ट्रेप्टोमाइसिन सल्फेट नमक </td><td> सिग्मा </td><td> S9137 </td></tr><tr><td> Agarose </td><td> Invitrogen </td><td> 15510-027 </td></tr><tr><td> फास्फेट buffered खारा (पीबीएस) </td><td> प्रयोगशाला में तैयार </td><td> N / A </td></tr><tr><td> ट्रिप्सिन EDTA (1x) &lt;/ P&gt; <td> Mediatech </td><td> 25-053-CI </td></tr><tr><td> DNeasy रक्त और ऊतक किट </td><td> QIAGEN </td><td> 69504 </td></tr><tr><td> RNeasy मिनी किट </td><td> QIAGEN </td><td> 74104 </td></tr><tr><td> Laemmli बफर </td><td> प्रयोगशाला में तैयार </td><td> N / A </td></tr><tr><td> इष्टतम काटना तापमान यौगिक (अक्टूबर) </td><td> ऊतक टेक </td><td> 4583 </td></tr><tr><td> पूरे खरगोश आंखें (युवा) </td><td> Pel-Freez </td><td> 41211-2 </td></tr><tr><td> मानव corneas और साबुत आंखें </td><td> स्थानीय नेत्र बैंक </td><td> N / A </td></tr><tr><td> 12 खैर चीनी मिट्टी के बरतन स्पॉट प्लेट </td><td> Avogadro लैब आपूर्ति </td><td> 1877 </td></tr><tr><td> 35 मिमी टिशू कल्चर डिश </td><td> बाज़ </td><td> 353001 </td></tr><tr><td> 6 खैरसेल संस्कृति प्लेट </td><td> जैव एक Greiner </td><td> 657160 </td></tr><tr><td> Cryomold मध्यवर्ती </td><td> ऊतक टेक </td><td> 4566 </td></tr></tbody></table>

ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection

दाद keratitis एक सबसे गंभीर दाद सिंप्लेक्स 1 वायरस (एचएसवी -1) के साथ जुड़े विकृतियों के है. दाद keratitis वर्तमान में विकसित दुनिया में कॉर्निया व्युत्पन्न दोनों और संक्रमण से जुड़े अंधापन का प्रमुख कारण है. Corneal उपकला की दाद keratitis की विशिष्ट प्रस्तुति संक्रमण और कभी कभी गहरी corneal stroma और endothelium भी शामिल है, scarring के रूप में इस तरह के स्थायी corneal विकृतियों के लिए अग्रणी, thinning, और 1 अस्पष्टता. कॉर्नियल एचएसवी 1 संक्रमण परंपरागत रूप से प्रयोगात्मक मॉडल के दो प्रकार में अध्ययन किया है. इन विट्रो मॉडल, जिसमें corneal उपकला कोशिकाओं के सुसंस्कृत monolayers एक पेट्री डिश में संक्रमित हैं में सादगी, replicability की उच्च स्तर, तेजी से प्रयोगों, और अपेक्षाकृत कम लागत प्रदान करता है. दूसरी ओर, vivo मॉडल है, जो में खरगोश या चूहों जैसे जानवरों सीधे कॉर्निया में inoculated हैं में एक अत्यधिक परिष्कृत शारीरिक प्रदान करता हैप्रणाली है, लेकिन उच्च लागत, अब प्रयोगों, आवश्यक जानवरों की देखभाल, और परिवर्तनशीलता का एक बड़ा डिग्री है. इस वीडियो लेख में, हम corneal उपकला एचएसवी 1 संक्रमण के एक पूर्व vivo मॉडल है, जो दोनों में और vivo मॉडल में इन विट्रो की ताकत को जोड़ती है की एक विस्तृत प्रदर्शन प्रदान करते हैं. पूर्व vivo मॉडल बरकरार organotypically संस्कृति में बनाए रखा और एचएसवी -1 से संक्रमित corneas का उपयोग किया जाता है. पूर्व vivo मॉडल का उपयोग अत्यधिक physiologically के आधार पर निष्कर्ष के लिए अनुमति देता है, अभी तक यह बल्कि सस्ती है और समय के लिए इन विट्रो मॉडल में तुलनीय प्रतिबद्धता की आवश्यकता है.

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Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

इस वीडियो लेख में हम एक नया प्रयोग का वर्णन<em&gt; पूर्व vivo</emतीव्र दाद के मॉडल वायरस टाइप मैं corneal उपकला संक्रमण सिंप्लेक्स.

तीव्र उपकला हरपीज की पूर्व vivo organotypic में कॉर्नियल मॉडल वायरस प्रकार मैं संक्रमण सिंप्लेक्स

Herpes keratitis is one of the most severe pathologies associated with the herpes simplex virus-type 1 (HSV-1).  Herpes keratitis is currently the leading ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

पूर्व पूरे के vivo संवर्धन, विकास ड्रोसोफिला दिमाग

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

The Corneal Micropocket Assay: A Model of Angiogenesis in the Mouse Eye

कॉर्नियल Micropocket परख: माउस आँखों में angiogenesis की एक मॉडल

The mouse corneal micropocket assay is a robust and quantitative in vivo assay for evaluating angiogenesis. By using standardized slow-release pellets ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

बरकरार vomeronasal अंग और गौण घ्राण बल्ब की पूर्व vivo तैयारी

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

एक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; लेजर प्रेरित स्पाइनल कॉर्ड चोट मॉडल वास्तविक समय में axonal अध: पतन के तंत्र का आकलन करने के लिए

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

रंजित जाल उपकला कोशिकाओं के रोमक आंदोलन का अवलोकन<em&gt; पूर्व vivo</em

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. ...

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

ब्रेन स्लाइस में डर सर्किट के पूर्व vivo optogenetic विच्छेदन

Optogenetic approaches are now widely used to study the function of neural populations and circuits by combining targeted expression of light-activated ...

Visualization and Live Imaging of Oligodendrocyte Organelles in Organotypic Brain Slices Using Adeno-associated Virus and Confocal Microscopy

दृश्य और Organotypic मस्तिष्क Adeno-जुड़े वायरस और फोकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग स्लाइस में Oligodendrocyte Organelles के लाइव इमेजिंग

Neurons rely on the electric insulation and trophic support of myelinating oligodendrocytes. Despite the importance of oligodendrocytes, the advanced ...

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

सीटू में तीव्र पूर्व वीवो भ्रूण मस्तिष्क स्लाइस संस्कृतियों में अक्षतंतु विकास और विकास शंकु गतिशीलता का विज़ुअलाइज़ेशन

During neuronal development, axons navigate the cortical environment to reach their final destinations and establish synaptic connections. Growth cones ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

मानव स्टेम सेल प्रत्यारोपण और सत्यापन के लिए एक पूर्व विवो मॉडल के रूप में वयस्क मानव कॉर्टेक्स की ऑर्गेनोटाइपिक संस्कृतियां

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...

Using Chick Embryo Brain as a Model to Study Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior (Video) | JoVE 

मानव ग्लियोब्लास्टोमा सेल व्यवहार के विवो और एक्स विवो विश्लेषण के लिए एक मॉडल के रूप में चूजा भ्रूण मस्तिष्क का उपयोग करना

The chick embryo has been an ideal model system for the study of vertebrate development, particularly for experimental manipulations. Use of the chick ...