Name: ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection
Uploaded: 2012-11-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

Поддержке Банка Lions глаз Delaware Valley был бесценен для этой работы. Первичные мышиные моноклональные антитела против ICP8 был своего рода подарок от доктора Дэвида Knipe (Harvard Medical School). Мы также благодарим д-р Стивен Дженнингс (Drexel University медицинский колледж) и д-р Питер Laibson (завещания Eye Institute) за полезные обсуждения и экспертизы.

Все реагенты и оборудование были приобретены стерильные или были стерилизованы до процедуры. В данной статье описываются шаги создания экс модели естественных условиях, начиная с предварительного энуклеированных глаз. В наших экспериментах мы используем свежие целые глазн...

<ol>
	<li>Kaye, S., Choudhary, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpes+simplex+keratitis.">Herpes simplex keratitis.</a> Prog. Retin. Eye Res. 25, 355-380 (2006).</li><li>Holmberg, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enucleation+of+exotic+pets.">Enucleation of exotic pets.</a> Journal of Exotic Pet Medicine. 16, 88-94 (2007).</li><li>Remeijer, L., Osterhaus, A., Verjans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+herpes+simplex+virus+keratitis:+the+pathogenesis+revisited.">Human herpes simplex virus keratitis: the pathogenesis revisited.</a> Ocul. Immunol. Inflamm. 12, 255-285 (2004).</li><li>Foreman, D. M., Pancholi, S., Jarvis-Evans, J., McLeod, D., Boulton, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+organ+culture+model+for+assessing+the+effects+of+growth+factors+on+corneal+re-epithelialization.">A simple organ culture model for assessing the effects of growth factors on corneal re-epithelialization.</a> Exp. Eye Res. 62, 555-564 (1996).</li><li>Xu, K. P., Li, X. F., Yu, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+organ+culture+model+for+assessing+epithelial+responses+to+surfactants.">Corneal organ culture model for assessing epithelial responses to surfactants.</a> Toxicol. Sci. 58, 306-314 (2000).</li><li>Klausner, E. A., Peer, D., Chapman, R. L., Multack, R. F., Andurkar, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+gene+therapy.">Corneal gene therapy.</a> J. Control Release. 124, 107-133 (2007).</li><li>Halford, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ICP0+antagonizes+Stat+1-dependent+repression+of+herpes+simplex+virus:+implications+for+the+regulation+of+viral+latency.">ICP0 antagonizes Stat 1-dependent repression of herpes simplex virus: implications for the regulation of viral latency.</a> Virol. J. 3, 44 (2006).</li><li>Bhattacharjee, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+treatment+of+ocular+HSK+with+a+human+apolipoprotein+E+mimetic+peptide+in+a+mouse+eye+model.">Effective treatment of ocular HSK with a human apolipoprotein E mimetic peptide in a mouse eye model.</a> Invest Ophthalmol Vis. Sci. 49, 4263-4268 (2008).</li><li>Novitskaya, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Difficulties+imaging+herpes+simplex+keratitis+with+fluorescein+isothiocynate-labeled+anti-HSV-1+antibodies+in+an+ex+vivo+model.">Difficulties imaging herpes simplex keratitis with fluorescein isothiocynate-labeled anti-HSV-1 antibodies in an ex vivo model.</a> Cornea. 28, 421-425 (2009).</li><li>Sharma, A., Shimeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+immunofluorescence+to+diagnose+herpes+simplex+virus+keratitis+in+mice.">In vivo immunofluorescence to diagnose herpes simplex virus keratitis in mice.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 785-788 (1997).</li></ol>

В этом видео статье мы опишем метод изучения острых эпителия роговицы HSV-1 инфекции в бывшей моделью естественных условиях. Эта модель является полезной ступенью между в пробирке и в естественных условиях модели, поскольку она позволяет физиологически точную провер...

<table border="1"><tbody><tr><td> Реактивы / Расходные материалы </td><td> Компания </td><td> Catalogue # </td></tr><tr><td> Минимальную поддерживающую среду (MEM) </td><td> Mediatech </td><td> 10-010-CV </td></tr><tr><td> Номера для незаменимых аминокислот (100x раствор) </td><td> Mediatech </td><td> 25-025-ДИ </td></tr><tr><td> L-Глютамин </td><td> Mediatech </td><td> 25-005-ДИ </td></tr><tr><td> Пенициллин G натриевая соль </td><td> Сигма </td><td> P3032 </td></tr><tr><td> Соль стрептомицина сульфат </td><td> Сигма </td><td> S9137 </td></tr><tr><td> Агароза </td><td> Invitrogen </td><td> 15510-027 </td></tr><tr><td> Фосфатным буферным раствором (PBS) </td><td> Подготовлено в лаборатории </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Трипсин EDTA (1x) &lt;/ TD&gt; <td> Mediatech </td><td> 25-053-ДИ </td></tr><tr><td> DNeasy крови и тканей Kit </td><td> QIAGEN </td><td> 69504 </td></tr><tr><td> RNeasy Мини комплект </td><td> QIAGEN </td><td> 74104 </td></tr><tr><td> Laemmli буфера </td><td> Подготовлено в лаборатории </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Оптимальная температура резания (ОКТ) Соединение </td><td> Tissue-Tek </td><td> 4583 </td></tr><tr><td> Всего глаза кролика (Янг) </td><td> Пел-Freez </td><td> 41211-2 </td></tr><tr><td> Человека роговицы и всего глаза </td><td> Местный банк глаз </td><td> N / A </td></tr><tr><td> 12-луночный планшет спот фарфора </td><td> Лаборатория Авогадро питания </td><td> 1877 </td></tr><tr><td> 35 мм блюдо культуры ткани </td><td> Сокол </td><td> 353001 </td></tr><tr><td> 6 ХорошоПлита культуре клеток </td><td> Greiner Bio-One </td><td> 657160 </td></tr><tr><td> Cryomold промежуточного </td><td> Tissue-Tek </td><td> 4566 </td></tr></tbody></table>

ex vivo organotypic corneal model of acute epithelial herpes simplex virus type i infection

Герпетический кератит является одним из самых тяжелых патологий, связанных с вирусом простого герпеса типа 1 (HSV-1). Герпетический кератит настоящее время является ведущей причиной как роговица-инфекции получены и связанных слепоты в развитых странах мира. Типичные презентации кератит герпеса включает в себя инфекцию эпителия роговицы, а иногда и более глубокие стромы роговицы и эндотелия, что приводит к такому постоянному роговицы патологий, как рубцы, истончения и прозрачность 1. Роговицы HSV-1 инфекции традиционно изучается в двух типах экспериментальных моделей. В пробирке модель, в которой культурная монослоев эпителиальные клетки роговицы инфицированных в чашке Петри, предлагает простоту, высокую воспроизводимость, быстрый экспериментов, и относительно низких затратах. С другой стороны, в естественных условиях модель, в которой животные, такие как кролики или мыши прививку прямо в роговицу, предлагает весьма сложные физиологическиесистеме, но имеет более высокую стоимость, больше экспериментов, необходимых ухода за животными, и в большей степени изменчивости. В этом видео статье, мы предоставляем подробную демонстрацию новых моделей естественных бывший роговичного эпителиального HSV-1 инфекции, которая сочетает в себе сильные стороны обоих в пробирке и в естественных условиях модели. Экс модели естественных использует нетронутой роговицы organotypically поддерживаться в культуре и инфицированных ВПГ-1. Использование бывшей моделью естественных условиях позволяет высоко физиологически обоснованные выводы, но это сравнительно недорогой и требует времени приверженность сравнима с моделью в пробирке.

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection at JoVE.com

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

В этом видео статье мы опишем использование нового<em&gt; Бывших естественных условиях</em&gt; Модели острого вируса простого герпеса типа I эпителия роговицы инфекции.

Ex Vivo органотипической роговицы модели острой Эпителиальные Вирус простого герпеса I типа инфекции

Herpes keratitis is one of the most severe pathologies associated with the herpes simplex virus-type 1 (HSV-1).  Herpes keratitis is currently the leading ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Ex Vivo Organotypic Corneal Model of Acute Epithelial Herpes Simplex Virus Type I Infection

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Ex vivo Culturing of Whole, Developing Drosophila Brains

Экс естественных Культивирование полного Разработка Drosophila Brains

We describe a method for ex vivo culturing of whole Drosophila brains. This can be used as a counterpoint to chronic genetic manipulations for ...

The Corneal Micropocket Assay: A Model of Angiogenesis in the Mouse Eye

Роговицы Micropocket Анализ: Модель ангиогенеза в Mouse глаз

The mouse corneal micropocket assay is a robust and quantitative in vivo assay for evaluating angiogenesis. By using standardized slow-release pellets ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

Экс Vivo Препараты неповрежденной вомероназального органа и аксессуаров обонятельная луковица

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Лазерно-индуцированное Травма спинного мозга модель для оценки Механизмы дегенерации аксонов в режиме реального времени

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

Наблюдение за Мерцательная Движения сосудистое сплетение эпителиальных клеток<em&gt; Экс Vivo</em

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. ...

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo Optogenetic Dissection of Fear Circuits in Brain Slices

Ex Vivo оптогенетика Вскрытие страха схем в головном мозге Ломтики

Optogenetic approaches are now widely used to study the function of neural populations and circuits by combining targeted expression of light-activated ...

Visualization and Live Imaging of Oligodendrocyte Organelles in Organotypic Brain Slices Using Adeno-associated Virus and Confocal Microscopy

Визуализация и живой изображений Олигодендроциты органелл в Organotypic мозга фрагментов с помощью аденоассоциированный вирус и конфокальная микроскопия

Neurons rely on the electric insulation and trophic support of myelinating oligodendrocytes. Despite the importance of oligodendrocytes, the advanced ...

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

In Situ Visualization of Axon Growth and Growth Cone Dynamics in Acute Ex Vivo Embryonic Brain Slice Cultures

На месте Визуализация роста аксонов и динамики конуса роста в культурах эмбриональных срезов мозга Ex vivo

During neuronal development, axons navigate the cortical environment to reach their final destinations and establish synaptic connections. Growth cones ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Органотипические культуры коры головного мозга взрослого человека как модель ex vivo для трансплантации и валидации стволовых клеток человека

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...

Using Chick Embryo Brain as a Model to Study Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior

Using the Chick Embryo Brain as a Model for In Vivo and Ex Vivo Analyses of Human Glioblastoma Cell Behavior (Video) | JoVE 

Использование мозга эмбриона цыпленка в качестве модели для анализа поведения клеток глиобластомы человека in vivo и ex vivo

The chick embryo has been an ideal model system for the study of vertebrate development, particularly for experimental manipulations. Use of the chick ...