Name: the analysis of purkinje cell dendritic morphology in organotypic slice cultures
Uploaded: 2012-03-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل جامعة بازل، قسم الطب الحيوي، واللجنة الوطنية السويسرية مؤسسة العلوم (31003A-116624).

1. وضع ما يصل عضوي النمط الثقافات شريحة مخيخي يتم إعداد الثقافات شريحة مخيخي من يوم وما بعد الولادة 8 الجراء P الماوس (8) باستخدام طريقة حضانة المرض ساكنة 10. في مختبر لدينا، ونحن نستخدم B6CF1 الفئران. في بعض التجارب كانت تستخدم الف?...

<ol>
	<li>Bosman, L. W., Hartmann, J., Barski, J. J., Lepier, A., Noll-Hussong, M., Reichardt, L. F., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+TrkB+for+synapse+elimination+in+developing+cerebellar+Purkinje+cells.">Requirement of TrkB for synapse elimination in developing cerebellar Purkinje cells.</a> Brain Cell Biol. 35, 87-101 (2006).</li><li>Boukhtouche, F., Janmaat, S., Vodjdani, G., Gautheron, V., Mallet, J., Dusart, I., Mariani, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoid-related+orphan+receptor+alpha+controls+the+early+steps+of+Purkinje+cell+dendritic+differentiation.">Retinoid-related orphan receptor alpha controls the early steps of Purkinje cell dendritic differentiation.</a> J. Neurosci. 26, 1531-1538 (2006).</li><li>Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+control+of+dendritic+growth+and+development+of+cerebellar+Purkinje+cells.">Cellular and molecular control of dendritic growth and development of cerebellar Purkinje cells.</a> Prog. Histochem. Cytochem. 39, 131-182 (2004).</li><li>Kapfhammer, L. C., Doering, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+slice+cultures.">Cerebellar slice cultures.</a> Protocols for Neural cell culture. , 285-298 (2010).</li><li>Gugger, O. S., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+size+of+the+dendritic+tree+does+not+protect+Purkinje+cells+from+excitotoxic+death.">Reduced size of the dendritic tree does not protect Purkinje cells from excitotoxic death.</a> J. Neurosci. Res. 88, 774-783 (2010).</li><li>Li, J., Gu, X., Ma, Y., Calicchio, M. L., Kong, D., Teng, Y. D., Yu, L., Crain, A. M., Vartanian, T. K., Pasqualini, R., Arap, W., Libermann, T. A., Snyder, E. Y., Sidman, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mediates+Purkinje+cell+dendritic+development+via+lysyl+oxidase+propeptide+and+NF-&#954;B+signaling.">mediates Purkinje cell dendritic development via lysyl oxidase propeptide and NF-&#954;B signaling.</a> Neuron. 68, 45-60 (2010).</li><li>Metzger, F., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+kinase+C+activity+modulates+dendritic+differentiation+of+rat+Purkinje+cells+in+cerebellar+slice+cultures.">Protein kinase C activity modulates dendritic differentiation of rat Purkinje cells in cerebellar slice cultures.</a> Eur. J. Neurosci. 12, 1993-2005 (2000).</li><li>Schrenk, K., Kapfhammer, J. P., Metzger, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+dendritic+development+of+cerebellar+Purkinje+cells+in+slice+cultures+from+protein+kinase+C?-deficient+mice.">Altered dendritic development of cerebellar Purkinje cells in slice cultures from protein kinase C?-deficient mice.</a> Neuroscience. 110, 675-689 (2002).</li><li>Sirzen-Zelenskaya, A., Zeyse, J., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+class+I+metabotropic+glutamate+receptors+limits+dendritic+growth+of+Purkinje+cells+in+organotypic+slice+cultures.">Activation of class I metabotropic glutamate receptors limits dendritic growth of Purkinje cells in organotypic slice cultures.</a> Eur. J. Neurosci. 24, 2978-2986 (2006).</li><li>Stoppini, L., Buchs, P. -. A., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+organotypic+cultures+of+nervous+tissue.">A simple method for organotypic cultures of nervous tissue.</a> J. Neurosci. Methods. 37, 173-182 (1991).</li><li>Tomomura, M., Rice, D. S., Morgan, J. I., Yuzaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+Purkinje+cells+by+fluorescence-activated+cell+sorting+from+transgenic+mice+that+express+green+fluorescent+protein.">Purification of Purkinje cells by fluorescence-activated cell sorting from transgenic mice that express green fluorescent protein.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 57-63 (2001).</li><li>Weyer, A., Schilling, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+and+cell+type-specific+expression+of+the+neuronal+marker+NeuN+in+the+murine+cerebellum.">Developmental and cell type-specific expression of the neuronal marker NeuN in the murine cerebellum.</a> J. Neurosci. Res. 73, 400-409 (2003).</li></ol>

عرض الأساليب هنا تسمح لدراسة العصبية تنمية شجيري خلية في عضوي النمط الثقافات شريحة المخيخ وتقييم كمي العصبية التوسع شجيري الخلايا عن طريق قياس شجيري حجم الشجرة وكانت عدد من النقاط فرع شجيري. بطبيعة الحال، على تحليل أكثر شمولا وتطورا كميا من التشعبات الخلية العصبية ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> إدراج زراعة الأنسجة </td><td> ميليبور </td><td> PICM 03050 PICM ORG50 </td><td> يدرج PICMORG50 لها حافة منخفضة وتسمح بعرض الثقافات الحية في المجهر </td></tr><tr><td> MEM </td><td> Gibco، إينفيتروجن </td><td> 11012044 </td><td></td></tr><tr><td> Glutamax 1 </td><td> Gibco، إينفيتروجن </td><td> 35050038 </td><td></td></tr><tr><td> القاعدية Medum النسر </td><td> Gibco، إينفيتروجن </td><td> 41010026 </td><td></td></tr><tr><td> الحصان مصل </td><td> Gibco، إينفيتروجن </td><td> 26050070 </td><td></td></tr><tr><td> Phorbol 12-myristaالشركة المصرية للاتصالات 13-خلات (PMA) </td><td> Tocris </td><td> 1201 </td><td></td></tr><tr><td> (RS) -3،5-ثنائي هيدروكسي phenylglycine (DHPG) </td><td> Tocris </td><td> 0342 </td><td></td></tr><tr><td> أرنب المضادة للcalbindin D-28K </td><td> Swant </td><td> CB38 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة NeuN، استنساخ A60 </td><td> Chemicon، ميليبور </td><td> MAB377 </td><td></td></tr><tr><td> أرنب المضادة للGFP </td><td> Abcam </td><td> Ab290 </td><td></td></tr></tbody></table>

the analysis of purkinje cell dendritic morphology in organotypic slice cultures

الخلايا العصبية هي نظام نموذج جذاب لدراسة التنمية شجيري، لأن لديهم شجرة شجيري إعجاب وهو موجه بدقة في المستوى السهمي وتطوير معظمها في فترة ما بعد الولادة في القوارض الصغيرة 3. وعلاوة على ذلك، والأجسام المضادة تتوفر العديد من التي يجري الخلايا تسمية انتقائي وبشكل مكثف العصبية بما في ذلك جميع العمليات، مع المضادة للCalbindin D28K الأكثر استخداما على نطاق واسع. لمشاهدة من التشعبات في الخلايا الحية والفئران معربا عن EGFP انتقائي في الخلايا العصبية 11 هي المتاحة من خلال مختبرات جاكسون. عضوي النمط المخيخ شريحة الثقافات خلايا تسمح التلاعب التجريبية سهلة من الخلايا العصبية تنمية شجيري لأن معظم التوسع شجيري من شجيري العصبية شجرة الخلية تدور بالفعل خلال الفترة ثقافة 4. نقدم هنا باختصار، بروتوكول موثوقة وسهلة لعرض وتحليل مورفولوجيا شجيري الخلايا العصبية المزروعة في organotypiج الثقافات شريحة المخيخ. لأغراض كثيرة، والتقييم الكمي للشجيري العصبية شجرة الخلية أمر مرغوب فيه. ونحن نركز هنا على معلمتين، شجيري حجم الشجرة وأرقام النقطة فرع، والتي يمكن بسرعة وبسهولة تحديد من الألغام المضادة للcalbindin الملون الثقافات شريحة المخيخ. هذه المعلمتين تسفر عن مقياس موثوق وحساسة للتغيرات في شجرة الخلية الجذعية العصبية. باستخدام المثال من العلاجات مع بروتين كيناز C PMA المنشط (بي كي سي) ومستقبلات الغلوتامات metabotropic 1 (mGluR1) ونحن لشرح كيفية الاختلافات في التنمية شجيري هي تصور وتقييم كمي. مزيج من وجود شجرة شجيري واسعة، وأساليب المناعية انتقائية ومكثفة والثقافات شريحة عضوي النمط التي تغطي فترة من النمو شجيري ونموذج الفأر مع التعبير العصبية الخلية EGFP محددة تجعل الخلايا العصبية نظام نموذجي قوية لإبراز آليات شجيري التنمية.

Watch this Scientific Journal Video about The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures at JoVE.com

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

نقدم البروتوكول الذي يسمح لعرض وتقويم كمي والتشكل من شجرة شجيري الخلايا العصبية الفردية التي تزرع في عضوي النمط الثقافات شريحة المخيخ. ويهدف هذا البروتوكول إلى تعزيز الدراسات حول آليات الخلية العصبية تنمية شجيري.

على تحليل من الخليوي بركينيي علم الصرف شجيرى في الثقافات شريحة عضوي النمط

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

وعضوي النمط الثقافة شريحة الحصين النموذجي لفحص الإصابات متعلق بالخلايا العصبية

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

Automated Sholl Analysis of Digitized Neuronal Morphology at Multiple Scales

الآلي Sholl تحليل الصرف متعلق بالخلايا العصبية رقمية على مستويات متعددة

Neuronal morphology plays a significant role in determining how neurons function and communicate1-3.  Specifically, it affects the ability of neurons to ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

عضوي النمط الثقافات شريحة الحصين

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

Organotypic Cerebellar Cultures: Apoptotic Challenges and Detection

مخيخي الثقافات عضوي النمط : التحديات والكشف عن أفكارك

Organotypic cultures of neuronal tissue were first introduced by Hogue in 1947 1,2 and have constituted a major breakthrough in the field of neuroscience. ...

Whole Cell Recording from an Organotypic Slice Preparation of Neocortex

تسجيل خلية كاملة من إعداد عضوي النمط شريحة من القشرة المخية الحديثة

We have been studying the expression and functional roles of voltage-gated potassium channels in pyramidal neurons from rat neocortex.  Because of the ...

Analysis of Dendritic Spine Morphology in Cultured CNS Neurons

تحليل الصرف العمود الفقري شجيري الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي لؤلؤ

Dendritic spines are the sites of the majority of excitatory connections within the brain, and form the post-synaptic 
compartment of synapses. These ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

الثقافات شريحة عضوي النمط من المخ الأوسط بطني الجنينية : نظام لدراسة التنمية متعلق بالخلايا العصبية الدوبامينية في المختبر</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

Post-embedding Immunogold Labeling of Synaptic Proteins in Hippocampal Slice Cultures

بعد تضمين التعريف Immunogold من البروتينات متشابك في الثقافات شريحة الحصين

Immunoelectron microscopy is a powerful tool to study biological molecules at the subcellular level. Antibodies coupled to electron-dense markers such as ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

الثقافات شريحة عضوي النمط لدراسة ديناميات دبقية قليلة التغصن وتكون الميالين

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

وتحليل وعائية عصبية إعادة عرض في Entorhino-الحصين الثقافات شريحة عضوي النمط

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...