Name: the analysis of purkinje cell dendritic morphology in organotypic slice cultures
Uploaded: 2012-03-21T13:00:00
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यह काम बास्ले विश्वविद्यालय, बायोमेडिसिन विभाग, और स्विस राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (31003A 116,624) द्वारा समर्थित किया गया.

1. Organotypic अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों की स्थापना अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों प्रसवोत्तर दिन से 8 पी (8) माउस स्थिर ऊष्मायन 10 विधि का उपयोग पिल्ले को तैयार हैं. हमारी प्रयोगशाला में, हम ...

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	<li>Bosman, L. W., Hartmann, J., Barski, J. J., Lepier, A., Noll-Hussong, M., Reichardt, L. F., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+TrkB+for+synapse+elimination+in+developing+cerebellar+Purkinje+cells.">Requirement of TrkB for synapse elimination in developing cerebellar Purkinje cells.</a> Brain Cell Biol. 35, 87-101 (2006).</li><li>Boukhtouche, F., Janmaat, S., Vodjdani, G., Gautheron, V., Mallet, J., Dusart, I., Mariani, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoid-related+orphan+receptor+alpha+controls+the+early+steps+of+Purkinje+cell+dendritic+differentiation.">Retinoid-related orphan receptor alpha controls the early steps of Purkinje cell dendritic differentiation.</a> J. Neurosci. 26, 1531-1538 (2006).</li><li>Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+control+of+dendritic+growth+and+development+of+cerebellar+Purkinje+cells.">Cellular and molecular control of dendritic growth and development of cerebellar Purkinje cells.</a> Prog. Histochem. Cytochem. 39, 131-182 (2004).</li><li>Kapfhammer, L. C., Doering, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+slice+cultures.">Cerebellar slice cultures.</a> Protocols for Neural cell culture. , 285-298 (2010).</li><li>Gugger, O. S., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+size+of+the+dendritic+tree+does+not+protect+Purkinje+cells+from+excitotoxic+death.">Reduced size of the dendritic tree does not protect Purkinje cells from excitotoxic death.</a> J. Neurosci. Res. 88, 774-783 (2010).</li><li>Li, J., Gu, X., Ma, Y., Calicchio, M. L., Kong, D., Teng, Y. D., Yu, L., Crain, A. M., Vartanian, T. K., Pasqualini, R., Arap, W., Libermann, T. A., Snyder, E. Y., Sidman, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mediates+Purkinje+cell+dendritic+development+via+lysyl+oxidase+propeptide+and+NF-&#954;B+signaling.">mediates Purkinje cell dendritic development via lysyl oxidase propeptide and NF-&#954;B signaling.</a> Neuron. 68, 45-60 (2010).</li><li>Metzger, F., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+kinase+C+activity+modulates+dendritic+differentiation+of+rat+Purkinje+cells+in+cerebellar+slice+cultures.">Protein kinase C activity modulates dendritic differentiation of rat Purkinje cells in cerebellar slice cultures.</a> Eur. J. Neurosci. 12, 1993-2005 (2000).</li><li>Schrenk, K., Kapfhammer, J. P., Metzger, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+dendritic+development+of+cerebellar+Purkinje+cells+in+slice+cultures+from+protein+kinase+C?-deficient+mice.">Altered dendritic development of cerebellar Purkinje cells in slice cultures from protein kinase C?-deficient mice.</a> Neuroscience. 110, 675-689 (2002).</li><li>Sirzen-Zelenskaya, A., Zeyse, J., Kapfhammer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+class+I+metabotropic+glutamate+receptors+limits+dendritic+growth+of+Purkinje+cells+in+organotypic+slice+cultures.">Activation of class I metabotropic glutamate receptors limits dendritic growth of Purkinje cells in organotypic slice cultures.</a> Eur. J. Neurosci. 24, 2978-2986 (2006).</li><li>Stoppini, L., Buchs, P. -. A., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+organotypic+cultures+of+nervous+tissue.">A simple method for organotypic cultures of nervous tissue.</a> J. Neurosci. Methods. 37, 173-182 (1991).</li><li>Tomomura, M., Rice, D. S., Morgan, J. I., Yuzaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+Purkinje+cells+by+fluorescence-activated+cell+sorting+from+transgenic+mice+that+express+green+fluorescent+protein.">Purification of Purkinje cells by fluorescence-activated cell sorting from transgenic mice that express green fluorescent protein.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 57-63 (2001).</li><li>Weyer, A., Schilling, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+and+cell+type-specific+expression+of+the+neuronal+marker+NeuN+in+the+murine+cerebellum.">Developmental and cell type-specific expression of the neuronal marker NeuN in the murine cerebellum.</a> J. Neurosci. Res. 73, 400-409 (2003).</li></ol>

तरीके यहाँ प्रस्तुत organotypic अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों में Purkinje सेल वृक्ष के समान विकास का अध्ययन और मात्रात्मक वृक्ष के समान पेड़ आकार और वृक्ष के समान शाखा अंक की संख्या को मापने के द्वारा Purkinje सेल व?...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक के नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियां (वैकल्पिक) </td></tr><tr><td> टिशू कल्चर आवेषण </td><td> Millipore </td><td> PICM 03050 PICM ORG50 </td><td> PICMORG50 सम्मिलित कम रिम और एक माइक्रोस्कोप में जीना संस्कृतियों को देखने की अनुमति </td></tr><tr><td> सदस्य </td><td> Gibco, Invitrogen </td><td> 11012044 </td><td></td></tr><tr><td> 1 Glutamax </td><td> Gibco, Invitrogen </td><td> 35050038 </td><td></td></tr><tr><td> बेसल Medum ईगल </td><td> Gibco, Invitrogen </td><td> 41010026 </td><td></td></tr><tr><td> हार्स सीरम </td><td> Gibco, Invitrogen </td><td> 26050070 </td><td></td></tr><tr><td> Phorbol 12-myrista13 एसीटेट (PMA) ते </td><td> Tocris </td><td> 1201 </td><td></td></tr><tr><td> (राज्यसभा) -3,5 Dihydroxy - phenylglycine (DHPG) </td><td> Tocris </td><td> 0342 </td><td></td></tr><tr><td> खरगोश विरोधी calbindin D-28K </td><td> Swant </td><td> CB38 </td><td></td></tr><tr><td> एंटी NeuN, क्लोन A60 </td><td> Chemicon, Millipore </td><td> MAB377 </td><td></td></tr><tr><td> विरोधी GFP खरगोश </td><td> Abcam </td><td> Ab290 </td><td></td></tr></tbody></table>

the analysis of purkinje cell dendritic morphology in organotypic slice cultures

Purkinje कोशिकाओं वृक्ष के समान विकास के अध्ययन के लिए एक आकर्षक मॉडल की व्यवस्था कर रहे हैं, क्योंकि वे एक प्रभावशाली वृक्ष के समान पेड़ है जो बाण के समान विमान में कड़ाई से उन्मुख है और 3 छोटे कृन्तकों में प्रसवोत्तर अवधि में ज्यादातर विकसित है. इसके अलावा, कई एंटीबॉडी उपलब्ध हैं जो चुनिंदा और अधिकता सभी प्रक्रियाओं सहित लेबल Purkinje विरोधी Calbindin D28K साथ कोशिकाओं सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जा रहा है. जीवित कोशिकाओं में dendrites के देखने के लिए, चुनिंदा EGFP Purkinje 11 कोशिकाओं में व्यक्त चूहों जैक्सन प्रयोगशालाओं के माध्यम से उपलब्ध हैं. Organotypic अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों कोशिकाओं Purkinje सेल वृक्ष के समान विकास के लिए आसान प्रयोगात्मक हेरफेर की अनुमति Purkinje सेल वृक्ष के समान पेड़ के वृक्ष के समान विस्तार की सबसे क्योंकि वास्तव में संस्कृति 4 अवधि के दौरान जगह ले जा रहा है. हम यहाँ Purkinje कोशिकाओं के वृक्ष के समान आकारिकी organotypi में हो देखने और विश्लेषण करने के लिए एक छोटी, विश्वसनीय और आसान प्रोटोकॉल उपस्थितग अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों. कई प्रयोजनों के लिए, Purkinje सेल वृक्ष के समान पेड़ के एक मात्रात्मक मूल्यांकन वांछनीय है. हम यहाँ दो मापदंडों, वृक्ष के समान पेड़ के आकार और शाखा बिन्दु संख्या है, जो तेजी से और आसानी से विरोधी calbindin दाग अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों से निर्धारित किया जा सकता है पर ध्यान केंद्रित. इन दो मापदंडों Purkinje सेल वृक्ष के समान पेड़ के परिवर्तन की एक विश्वसनीय और संवेदनशील उपाय उपज. प्रोटीन kinase सी (PKC) उत्प्रेरक PMA और metabotropic ग्लूटामेट 1 रिसेप्टर (mGluR1) हम दिखाना है कि वृक्ष के समान विकास में मतभेद visualized और मात्रात्मक मूल्यांकन कर रहे हैं के साथ उपचार के उदाहरण का उपयोग करना. एक व्यापक वृक्ष के समान पेड़, चयनात्मक और तीव्र immunostaining विधियों, organotypic टुकड़ा संस्कृतियों जो Purkinje सेल विशिष्ट EGFP अभिव्यक्ति के साथ वृक्ष के समान विकास और एक माउस मॉडल की अवधि को कवर Purkinje वृक्ष के समान के तंत्र का खुलासा करने के लिए एक शक्तिशाली मॉडल प्रणाली कोशिकाओं को बनाने की उपस्थिति के संयोजन विकास.

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The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

हम एक प्रोटोकॉल है कि देखने है और मात्रात्मक गधे के लिए व्यक्तिगत Purkinje organotypic अनुमस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों में विकसित कोशिकाओं के वृक्ष के समान पेड़ की आकारिकी परमिट उपस्थित थे. यह प्रोटोकॉल का Purkinje सेल वृक्ष के समान विकास के तंत्र पर अध्ययन को बढ़ावा देने का इरादा है.

Organotypic टुकड़ा संस्कृतियों में Purkinje सेल वृक्ष के समान आकृति विज्ञान के विश्लेषण

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury

Neuronal चोट की जांच करने के लिए Organotypic hippocampal स्लाइस संस्कृति मॉडल

Organotypic hippocampal slice culture is an in vitro method to examine mechanisms of neuronal injury in which the basic architecture and composition of ...

Automated Sholl Analysis of Digitized Neuronal Morphology at Multiple Scales

एकाधिक लीब्रा डिजीटल Neuronal आकृति विज्ञान के स्वचालित Sholl विश्लेषण

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Organotypic Hippocampal Slice Cultures

Organotypic hippocampal टुकड़ा संस्कृतियों

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

Organotypic Cerebellar Cultures: Apoptotic Challenges and Detection

Organotypic अनुमस्तिष्क संस्कृति: apoptotic चुनौतियां और जांच

Organotypic cultures of neuronal tissue were first introduced by Hogue in 1947 1,2 and have constituted a major breakthrough in the field of neuroscience. ...

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Neocortex की एक Organotypic स्लाइस तैयारी से पूरे सेल रिकॉर्डिंग

We have been studying the expression and functional roles of voltage-gated potassium channels in pyramidal neurons from rat neocortex.  Because of the ...

Analysis of Dendritic Spine Morphology in Cultured CNS Neurons

संवर्धित सीएनएस न्यूरॉन्स में वृक्ष के समान रीढ़ आकृति विज्ञान के विश्लेषण

Dendritic spines are the sites of the majority of excitatory connections within the brain, and form the post-synaptic 
compartment of synapses. These ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

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भ्रूणीय ventral midbrain के Organotypic स्लाइस संस्कृति: एक डोपामिनर्जिक neuronal विकास अध्ययन प्रणाली इन विट्रो में</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

Post-embedding Immunogold Labeling of Synaptic Proteins in Hippocampal Slice Cultures

Hippocampal टुकड़ा संस्कृतियों में पोस्ट-embedding Synaptic प्रोटीन Immunogold लेबल

Immunoelectron microscopy is a powerful tool to study biological molecules at the subcellular level. Antibodies coupled to electron-dense markers such as ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

Organotypic स्लाइस संस्कृति Oligodendrocyte गतिशीलता और myelination अध्ययन

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

में neurovascular remodeling के विश्लेषण Entorhino-हिप्पोकैम्पस Organotypic स्लाइस संस्कृति

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...