Name: mame models for 4d live-cell imaging of tumor: microenvironment interactions that impact malignant progression
Uploaded: 2012-02-17T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression at JoVE.com

وأيد هذا العمل، في جزء منه، من قبل المعاهد الوطنية للصحة R01 CA131990 (BFS وRRM). تم تنفيذ الخلية الحية التصوير في الموارد الأساسية الميكروسكوب والتصوير والخلوي المعتمدة، في جزء منه، من قبل المعاهد الوطنية للصحة مركز منحة P30 CA22453 لمعهد السرطان كارمانوس، جامعة ولاية واين، وفرع بحوث الفترة المحيطة بالولادة من المعاهد الوطنية للصحة الطفل والتنمية ، جامعة واين ستيت.

1. إعداد DQ-ركائز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمح مجفف بالتجميد DQ-ركائز لتدفئة إلى درجة حرارة الغرفة قبل فتح قارورة، وإعداد حل الأوراق المالية من 1 ملغ / مل من DQ-الركيزة في الماء منزوع الأيونات، الفجوة إلى 50 aliquots ميكرولتر ومخزن في درجة مئوية 4 </li></ol>...

<ol>
	<li>Sameni, M., Dosescu, J., Sloane, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+imaging+of+proteolysis:+stromal+and+inflammatory+cells+increase+tumor+proteolysis.">Functional imaging of proteolysis: stromal and inflammatory cells increase tumor proteolysis.</a> Mol. Imaging. 2, 159-175 (2003).</li><li>Jedeszko, C., Sameni, M., Olive, M. B., Moin, K., Sloane, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+protease+activity+in+living+cells:+from+two+dimensions+to+four+dimensions.">Visualizing protease activity in living cells: from two dimensions to four dimensions.</a> Curr. Protoc. Cell Biol. 39, (2008).</li><li>Jedeszko, C., Victor, B. C., Podgorski, I., Sloane, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast+hepatocyte+growth+factor+promotes+invasion+of+human+mammary+ductal+carcinoma+in+situ.">Fibroblast hepatocyte growth factor promotes invasion of human mammary ductal carcinoma in situ.</a> Cancer Res. 69, 9148-9155 (2009).</li><li>Sameni, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+live-cell+imaging+demonstrates+that+beta1-integrin+promotes+type+IV+collagen+degradation+by+breast+and+prostate+cancer+cells.">Functional live-cell imaging demonstrates that beta1-integrin promotes type IV collagen degradation by breast and prostate cancer cells.</a> Mol. Imaging. 7, 199-213 (2008).</li><li>Li, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p21-activated+kinase+1+coordinates+aberrant+cell+survival+and+pericellular+proteolysis+in+a+three-dimensional+culture+model+for+premalignant+progression+of+human+breast+cancer.">p21-activated kinase 1 coordinates aberrant cell survival and pericellular proteolysis in a three-dimensional culture model for premalignant progression of human breast cancer.</a> Neoplasia. 10, 314-328 (2008).</li><li>Sameni, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+quantifying+the+dynamics+of+tumor+associated+proteolysis.">Imaging and quantifying the dynamics of tumor associated proteolysis.</a> Clin. Exp. Metastasis. 26, 299-309 (2009).</li><li>Cavallo-Medved, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+imaging+demonstrates+that+proteases+in+caveolae+of+endothelial+cells+degrade+extracellular+matrix.">Live-cell imaging demonstrates that proteases in caveolae of endothelial cells degrade extracellular matrix.</a> Exp. Cell. Res. 315, 1234-1246 (2009).</li><li>Fukumura, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+microvasculature+and+microenvironment:+novel+insights+through+intravital+imaging+in+pre-clinical+models.">Tumor microvasculature and microenvironment: novel insights through intravital imaging in pre-clinical models.</a> Microcirculation. 17, 206-225 (2010).</li></ol>

كما ثبت، ويمكن استخدام cocultures مامي للخلية الحية التصوير في الوقت الحقيقي من التفاعلات بين المكونات الخلوية المختلفة التي تتألف منها وجود ورم الثدي والمكروية لها. في الدراسات الجارية في مختبرنا، وقد استخدمنا مامي cocultures لتحديد مسارات بروتين يرتبط مع الانتقال من DCIS لس?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> كاشف / معدات </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> المعاد الغشاء القاعدي (Cultrex) </td><td> Trevigen </td><td> 3445-005-01 </td><td> مقارنة Matrigel دينار بحريني (العلوم البيولوجية) </td></tr><tr><td> الكولاجين أنا </td><td> تماسك مختبرات </td><td> 5005-B </td><td></td></tr><tr><td> DQ-ركائز (الكولاجين الأول والرابع) </td><td> إينفيتروجن </td><td> DQ كولونيل I-D12060 DQ كولونيل الرابع D12052 </td><td></td></tr><tr><td> 22 ملم coverslips البلاستيك </td><td> فيشر العلمية المحدودة </td><td> 12-547 </td><td> خفضت الى النصف، وترك في الايثانول 70٪ لمدة 10 دقيقة والهواء الجاف قبل استخدام. </td></tr><tr><td> خلية ثقافة المتوسط </td><td> Lonza </td><td> MEBM-PRF CC-3153 MEGM CC-4136 </td><td> الفينول الحمراء الخالية </td></tr><tr><td> ibiTreat μ-الصحن </td><td> Ibidi </td><td> 80136 </td><td></td></tr><tr><td> Volocity البرمجيات </td><td> بيركن، إلمر </td><td> الإصدار 5.5 </td><td> ويمكن استخدام العلامات التجارية الأخرى من برامج التصوير لتوليد اعادة البناء 3D والأفلام. </td></tr></tbody></table>

mame models for 4d live-cell imaging of tumor: microenvironment interactions that impact malignant progression

قمنا بتطوير نماذج coculture 3D، والتي نحن مامي مصطلح (م 1 عماري rchitecture وم ngineering icroenvironment ه)، واستخدموه لحية خلية التصوير في الوقت الحقيقي من الخلية: التفاعلات الخلية. وكان هدفنا العام لتطوير النماذج التي تلخص في الهندسة المعمارية من آفات الثدي سابق للغزو لدراسة تقدم بها إلى النمط الظاهري الغازية. على وجه التحديد، قمنا بتطوير نماذج لتحليل التفاعلات بين المتغيرات الثدي ما قبل الخبيثة الخلايا الظهارية وأنواع أخرى من الخلايا السرطانية التي المكروية قد تورطت في تعزيز أو الحد من تطور خلايا الثدي الظهارية سابق للغزو لسرطان الأقنية الغازية. أنواع الخلايا الأخرى دراسته حتى الآن هي خلايا myoepithelial، الخلايا الليفية، الضامة والدم والخلايا اللمفاوية الاوعية الدموية الدقيقة البطانية. بالإضافة إلى نماذج مامي، والتي تهدف إلى تلخيص التفاعلات الخلوية داخل الثدي خلالتطور السرطان، وقمنا بتطوير نماذج قابلة للمقارنة لتطور سرطان البروستاتا. نحن هنا لتوضيح الإجراءات اللازمة لإنشاء cocultures 3D جنبا إلى جنب مع استخدام خلايا حية التصوير وفحص التحلل البروتيني وظيفي لمتابعة عملية الانتقال من cocultures من سرطان الثدي الأقنية في الموقع (DCIS) الخلايا والخلايا الليفية إلى النمط الظاهري الغازية على مر الزمن، في هذه الحالة أكثر من 23 أيام في الثقافة. وcocultures مامي تتكون من طبقات متعددة. هي جزء لا يتجزأ الليفية في الطبقة السفلى من النوع الأول من الكولاجين. يتم وضعها على أن طبقة من الغشاء القاعدي المعاد (RBM) في الخلايا التي بذرت DCIS. يتم تضمين طبقة أعلى من الإدارة القائمة على النتائج النهائية 2٪، وتتجدد مع كل تغيير في وسائل الاعلام. إلى التحلل البروتيني صورة المرتبطة تقدم إلى النمط الظاهري الغازية، ونحن نستخدم صبغ مروي (DQ) فلوري البروتينات المصفوفة (DQ-الكولاجين أنا مختلطة مع طبقة من الكولاجين وأنا الرابع DQ-الكولاجين مختلطة مع طبقة وسطى من الميزانية العاديةم) ومراعاة الثقافات الحية باستخدام متحد البؤر المجهري. ويتم التقاط المقاطع البصرية، ومعالجتها وإعادة بنائها في 3D مع برنامج التصور Volocity. على مدار 23 يوما في cocultures مامي، والخلايا DCIS تتكاثر وتتجمع في الهياكل الغازية الكبيرة. الليفية الهجرة ويندمج في هذه الهياكل الغازية. تم العثور على شظايا بروتين فلوري من collagens بالتعاون مع سطح هياكل DCIS، intracellularly، وفرقت أيضا في جميع أنحاء المصفوفة المحيطة بها. الأدوية التي بروتين الهدف، chemokine / خلوى وكيناز المسارات أو تعديلات في تركيبة الخلوية من cocultures يمكن أن تقلل من الغازية، مما يوحي بأن ويمكن استخدام نماذج مامي والشاشات قبل السريرية للنهج علاجية جديدة.

Watch this Scientific Journal Video about MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression at JoVE.com

MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression

قمنا بتطوير نماذج coculture 3D لحية خلية التصوير في الوقت الحقيقي من التفاعل بين الخلايا السرطانية والخلايا الطبيعية الأخرى في المكروية في أن تقدم إلى تأثير النمط الظاهري الغازية. ويمكن لهذه النماذج بمثابة الشاشات قبل السريرية على المخدرات لاستهداف نظير الصماوي التي يسببها بروتين، chemokine / خلوى وكيناز المسارات المتورطين في الغازية.

نماذج مامي لتصوير الخلايا الحية 4D من ورم: التفاعلات المكروية أن التقدم تأثير الخبيثة

We have developed 3D coculture models, which we term MAME (mammary architecture and microenvironment engineering), and used them for live-cell imaging in ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Xenografting of Human Luciferase-Tagged Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumor Cells for in vivo Testing of Candidate Therapeutic Agents

Orthotopic Xenografting of Human Luciferase-Tagged Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumor Cells for in vivo Testing of Candidate Therapeutic Agents

من مثلي Xenografting Luciferase الموسومة الإنسان الخبيثة ورم الخلايا العصبية المحيطية لغمد في الجسم الحي اختبار وكلاء المرشح علاجي

Although in vitro screens are essential for the initial identification of candidate therapeutic agents, a rigorous assessment of the drug's ability to ...

Evaluation of Cancer Stem Cell Migration Using Compartmentalizing Microfluidic Devices and Live Cell Imaging

تقييم الخلية الجذعية السرطانية الهجرة عن طريق أجهزة ميكروفلويديك Compartmentalizing والتصوير لايف الخليوي

In the last 40 years, the United States invested over 200 billion dollars on cancer research, resulting in only a 5% decrease in death rate. A major ...

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

في الفحص المختبري التخليص الظهارية النماذج أن الخطوات في وقت مبكر من الإنبثاث سرطان المبيض

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

غيروي ثلاثي الأبعاد<em&gt; في المختبر</em&gt; نمذجة التفاعلات اللحمية-طلائي سرطان المبيض خلال بدء والتقدم

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

يعيش التصوير من الاستجابة للأدوية الأورام المكروية في في نماذج الماوس من سرطان الثدي

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

رواية عالية الدقة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; تقنية التصوير لدراسة الاستجابة الديناميكية للمنشآت داخل القحف لنمو الورم والتداوي

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

نموذج مثلي إضاءة الحيوية من سرطان البنكرياس التقدم

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

عالية التردد التصوير بالموجات فوق الصوتية للماوس عنق الرحم الغدد الليمفاوية

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

A Brain Tumor/Organotypic Slice Co-culture System for Studying Tumor Microenvironment and Targeted Drug Therapies

ورم في المخ / شريحة عضوي النمط المشارك ثقافة النظام لدراسة ورم المكروية والمستهدفة المخدرات العلاجات

Brain tumors are a major cause of cancer-related morbidity and mortality. Developing new therapeutics for these cancers is difficult, as many of these ...

Bioluminescence-Based Tumor Quantification Method for Monitoring Tumor Progression and Treatment Effects in Mouse Lymphoma Models

الطريقة ورم الكمي القائم على تلألؤ بيولوجي لتطور الورم الرصد وآثار العلاج في نماذج الماوس الغدد اللمفاوية

Although bioluminescence imaging (BLI) shows promise for monitoring tumor burden in animal models of cancer, these analyses remain mostly qualitative. ...