Name: investigating intestinal inflammation in dss-induced model of ibd
Uploaded: 2012-02-01T13:00:00
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Este trabalho é suportado por concessões do Canadian Institutes of Health Research (CIHR) e por Crohn e Colite Fundação de Canadá (CCFC).

1. Modelo murino de DSS-induzida colite aguda <ol><li> Adicionar dextran sulfato de sódio (DSS) para água potável autoclavado à concentração final desejada (1-5%) (wt / vol) (ie Para fazer uma solução de DSS 5%, adicionar 25 mg de pó de DSS para 500 ml de água esterilizada) . Solução estoque podem ser deixados em temperatura ambiente por até uma semana ou a 4 ° C até o uso. </li><li> Em uma capa de biossegurança, despeje solução DSS estoque em 50 mL Falcon tubos (um necessário por gaiola). Manter a ...

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	<li>Sands, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+symptom+to+diagnosis:+clinical+distinctions+among+various+forms+of+intestinal+inflammation.">From symptom to diagnosis: clinical distinctions among various forms of intestinal inflammation.</a> Gastroenterology. 126, 1518-1532 (2004).</li><li>Danese, S., Fiocchi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Etiopathogenesis+of+inflammatory+bowel+diseases.">Etiopathogenesis of inflammatory bowel diseases.</a> World J. Gastroenterol. 12, 4807-4812 (2006).</li><li>Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. 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DSS colite é um modelo amplamente utilizado induzido quimicamente de inflamação intestinal. Neste modelo, os camundongos são dadas de água potável suplementado com DSS, que é pensado para ser tóxico para células epiteliais do intestino e perturbar a integridade da barreira mucosa. 10 Administração da SAD induz uma colite aguda que se caracteriza por fezes, sangramento fecal, e infiltração com granulócitos. DSS 10 Durante a administração, colite é normalmente associada com perda de ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente / equipamento: </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários </td></tr><tr><td> Tubo de microcentrífuga Eppendorf Safe-Lock (2 ml) </td><td> eppendorf </td><td> 0030 120.094 </td><td></td></tr><tr><td> Biotek EL808 leitor de placas de absorbância </td><td> Biotek </td><td> EL808 </td><td></td></tr><tr><td> Dextran sulfato de sódio grau reagente sal (peso molecular 36,000-50,000 Da) </td><td> Biomedicals MP </td><td> 160110 </td><td></td></tr><tr><td> Gen5 (software) </td><td> Biotek </td><td> Versão 1.10.8 </td><td></td></tr><tr><td> Brometo de hexadeciltrimetilamônio (HTAB) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> H5882-100G </td><td></td></tr><tr><td> Peróxido de hidrogênio, 30 wt solução.% Em água </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 216763 </td><td> Armazenar de 2-8 ° C </td></tr><tr><td> Microtest plcomeu de 96 poços de fundo plano </td><td> Sarstedt </td><td> 82,1581 </td><td> Para uso único </td></tr><tr><td> o-dianisidina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D-3252 </td><td> Sensível à luz. Armazenar de 2-8 ° C </td></tr><tr><td> Fosfato de potássio dibásico </td><td> Caledon </td><td> 6620-1 </td><td></td></tr><tr><td> Fosfato de potássio monobásico </td><td> Merck Química </td><td> PX1565-1 </td><td></td></tr><tr><td> Protease cocktail inibidor </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P8340 </td><td> Armazenar a -20 ° C </td></tr><tr><td> Triton X-100 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T8787 </td><td></td></tr><tr><td> Tungsten Carbide contas para Tissue Lyser II </td><td> QUIAGEN </td><td> 69997 </td><td></td></tr></tbody></table>

investigating intestinal inflammation in dss-induced model of ibd

Doença inflamatória intestinal (DII) engloba uma gama de patologias intestinais, o mais comum dos quais são a colite ulcerosa (UC) e Doença de Crohn (DC). Ambos UC e CD, quando presentes no cólon, gerar um perfil de sintomas similares que podem incluir sangramento, diarréia retal, dor abdominal e perda de peso. 1 Embora a patogênese da DII permanece desconhecida, é descrita como uma doença multifatorial que envolve tanto componentes genéticos e ambientais. 2 Existem inúmeros modelos animais e variável de inflamação do cólon que se assemelham a várias funcionalidades do IBD. Modelos animais de colite gama daqueles surge espontaneamente em estirpes sensíveis de certas espécies para aqueles que requerem a administração de concentrações específicas de colite indutores de produtos químicos, como dextran sulfato de sódio (DSS). Química induzida por modelos de inflamação intestinal são os modelos mais usados ​​e melhor descrito de IBD. Adminidemonstração de DSS na água potável produz colite aguda ou crônica, dependendo do protocolo de administração. 3 Animais dada a perda de peso DSS exposição e sinais de fezes moles ou diarréia, às vezes com evidências de sangramento retal 4,5. Aqui, descrevemos os métodos pelos quais colite desenvolvimento ea resposta inflamatória pode ser caracterizado após a administração de DSS. Estes métodos incluem a análise histológica de hematoxilina / eosina seções cólon manchado, medição de citocinas pró-inflamatórias, e determinação de mieloperoxidase (MPO), atividade que pode ser usado como um marcador da inflamação 6. A extensão da resposta inflamatória em estado de doença pode ser avaliada pela presença de sintomas clínicos ou por alteração na histologia nos tecidos da mucosa. Dano histológico do cólon é avaliado por meio de um sistema de pontuação que considera perda de cripta arquitetura, infiltração de células inflamatórias, músculo thickening, a depleção de células caliciformes, e cripta abscesso. 7 Quantitativamente, os níveis de citocinas pró-inflamatórias agudas inflamatórias, como a interleucina (IL)-1β, IL-6 e fator de necrose tumoral (TNF)-α, pode ser determinada usando métodos convencionais de ELISA. Além disso, a atividade de MPO pode ser mensurado através de um ensaio colorimétrico e usado como um índice de inflamação. 8 Na colite experimental, a gravidade da doença é muitas vezes relacionada com um aumento na atividade MPO e os níveis mais altos de citocinas pró-inflamatórias. Gravidade e colite associada à inflamação danos podem ser avaliados através da análise de consistência das fezes e sangramento, além de avaliar o estado histopatológico do intestino usando hematoxilina / eosina secções de tecido do cólon. Fragmentos de tecido do cólon pode ser usado para determinar a atividade MPO e produção de citocinas. Juntas, essas medidas podem ser utilizadas para avaliar a resposta inflamatória intestinal emmodelos animais de colite experimental.

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Investigating Intestinal Inflammation in DSS-induced Model of IBD

Modelos experimentais de doença inflamatória intestinal nos permitiram analisar a complexa inata e adaptativa respostas imunes associadas com a patogênese. Usando pontuação histológico, quantificação de citocinas pró-inflamatórias e atividade da mieloperoxidase, pode-se começar a avaliar essas respostas visto na doença inflamatória intestinal.

Investigando inflamação intestinal em DSS-induzida Modelo de IBD

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