Name: induction of graft-versus-host disease and in vivo t cell monitoring using an mhc-matched murine model
Uploaded: 2012-08-29T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model at JoVE.com

اننا مدينون لGaughan أليس وانغ جينغ جياو-المعلقة التي الدعم التقني والمدخلات الفكرية، والدعم المعنوي كان لهم دور فعال في تحريك هذه الدراسات في المستقبل. وقدم الدعم لهذه الدراسات من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح AI036532 لجاه.

1. قاتلة تشعيع <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع ما يصل إلى 10 في الفئران المتلقية قفص microisolator متوافق مع irradiator لاستخدامه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أشرق في 2 جرعات متساوية تلخيص الجرعة الإجمالية (الجرعة الإجمالية = 9 CGY للمستلمين BALB.B). يجب أن يكون تشعي...

<ol>
	<li>Cooke, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+idiopathic+pneumonia+syndrome+after+bone+marrow+transplantation:+The+roles+of+minor+H+antigens+and+endotoxin.">An experimental model of idiopathic pneumonia syndrome after bone marrow transplantation: The roles of minor H antigens and endotoxin.</a> Blood. 88, 3230-3239 (1996).</li><li>Berger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+subsets+involved+in+lethal+graft-versus-host+disease+directed+to+immunodominant+minor+histocompatibility+antigens.">T cell subsets involved in lethal graft-versus-host disease directed to immunodominant minor histocompatibility antigens.</a> Transplantation. 57, 1095-1102 (1994).</li><li>Nimer, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+depletion+of+CD8++cells+for+prevention+of+graft-versus-host+disease+after+bone+marrowtransplantation.+A+randomized+controlled+trial.">Selective depletion of CD8+ cells for prevention of graft-versus-host disease after bone marrowtransplantation. A randomized controlled trial.</a> Transplantation. 57, 82-87 (1994).</li><li>Korngold, R., Sprent, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+markers+of+T+cells+causing+lethal+graft-vs-host+disease+to+class+I+vs+class+II+H-2+differences.">Surface markers of T cells causing lethal graft-vs-host disease to class I vs class II H-2 differences.</a> Journal of Immunology. 135, 3004-3010 (1985).</li><li>Cao, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging+using+labeled+donor+tissues+reveals+patterns+of+engraftment,+rejection,+and+survival+in+transplantation.">Molecular imaging using labeled donor tissues reveals patterns of engraftment, rejection, and survival in transplantation.</a> Transplantation. 80, 134-139 (2005).</li><li>Asady, R. E. l. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-{beta}-dependent+CD103+expression+by+CD8(+)+T+cells+promotes+selective+destruction+of+the+host+intestinal+epithelium+during+graft-versus-host+disease.">TGF-{beta}-dependent CD103 expression by CD8(+) T cells promotes selective destruction of the host intestinal epithelium during graft-versus-host disease.</a> J. Exp. Med. 201, 1647-1657 (2005).</li><li>Larson, R. S., Springer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+leukocyte+integrins.">Structure and function of leukocyte integrins.</a> Immunol Rev. 114, 181-217 (1990).</li><li>Karecla, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+of+E-cadherin+on+epithelial+cells+by+the+mucosal+T+cell+integrin+alpha+M290+beta+7+(alpha+E+beta+7).">Recognition of E-cadherin on epithelial cells by the mucosal T cell integrin alpha M290 beta 7 (alpha E beta 7).</a> Eur. J. Immunol. 25, 852-856 (1995).</li><li>Cepek, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesion+between+epithelial+cells+and+T+lymphocytes+mediated+by+E-cadherin+and+the+alpha+E+beta+7+integrin.">Adhesion between epithelial cells and T lymphocytes mediated by E-cadherin and the alpha E beta 7 integrin.</a> Nature. 372, 190-193 (1994).</li><li>Malarkannan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+and+functional+characterization+of+a+dominant+minor+H+antigen,+H60.">The molecular and functional characterization of a dominant minor H antigen, H60.</a> J. Immunol. 161, 3501-3509 (1998).</li></ol>

بروتوكول لإحداث GVHD في الفئران المقدمة هنا يمثل نموذجا ذات الصلة سريريا من GVHD الفئران. أنشئت أصلا من قبل بيرغر وآخرون في عام 1994، وC57BL / 6 إلى مزيج سلالة BALB.B هو MHC-المتطابقة، مع معدل وفيات GVHD بوساطة CD4 التابعة، CD8 T المستجيبات 2، تتشابه بشكل كبير مع السيناريو السر...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> RPMI 1640 </td><td> إينفيتروجن </td><td> 12633-012 </td><td></td></tr><tr><td> الجنين مصل العجل </td><td> إينفيتروجن </td><td> 10439016 </td><td></td></tr><tr><td> 40 ميكرومتر مصفاة الخلية </td><td> BD العلوم البيولوجية </td><td> 352340 </td><td></td></tr><tr><td> CD3e-البيوتين </td><td> Miltenyi التكنولوجيا الحيوية </td><td> 130-093-021 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة البيوتين Microbeads </td><td> Miltenyi التكنولوجيا الحيوية </td><td> 130-091-147 </td><td></td></tr><tr><td> CD8a Microbeads </td><td> Miltenyi التكنولوجيا الحيوية </td><td> 130-049-401 </td><td> تستخدم الخلايا CD8 في استنزاف T من الطحال. </td></tr><tr><td> CD8a كوكتيل تنقية الجسم المضاد </td><td> Miltenyi التكنولوجيا الحيوية </td><td> 130-095-236 </td><td> تستخدم في تنقيةCD8 خلايا T من الطحال. </td></tr><tr><td> D-وسيفيرين </td><td> الفرجار العلوم الحياتية </td><td> 122796 </td><td></td></tr></tbody></table>

induction of graft-versus-host disease and in vivo t cell monitoring using an mhc-matched murine model

الطعم ضد المضيف المرض (GVHD) هو الحد الحاجز لاستخدام واسعة من زرع نخاع العظم كعلاج العلاجية لمجموعة متنوعة من أوجه القصور الدم. ويتسبب GVHD بواسطة الخلايا T الناضجة alloreactive موجودة في العظام الكسب غير المشروع نخاع التي غرست في المتلقي وتسبب تلفا للأعضاء المضيف. ومع ذلك، في الفئران، يجب إضافة خلايا T حتى العظم نخاع أن يسبب اللقاح GVHD. على الرغم من القيام بأعمال مكثفة لوصف T اضافة رد زرع الخلايا، bioluminescent تكنولوجيا التصوير هو وسيلة غير عدوانية لرصد أنماط الاتجار T خلية في الجسم الحي. بعد التشعيع قاتلة، تزرع الفئران المتلقية مع خلايا نخاع العظام وsplenocytes الفئران من الجهات المانحة. يتم تضمين مجموعات فرعية من الخلايا T L2G85.B6 (الفئران المعدلة وراثيا التي تعبر عن وسيفيراز جوهري) في عملية الزرع. عن طريق زرع الخلايا مجموعات فرعية معينة فقط T، واحد قادر على تتبع مجموعات فرعية محددة الخلايا T في الجسم الحي،واستنادا إلى موقعها وتطوير الفرضيات فيما يتعلق بدور مجموعات فرعية محددة الخلايا T في تعزيز GVHD في نقاط زمنية مختلفة. في فترات محددة سلفا زرع آخر، وتصوير الفئران المتلقية باستخدام كاميرا CCD Xenogen IVIS. يمكن كميا شدة الضوء باستخدام برنامج السكن لتوليد صورة صورة زائفة الألوان يعتمد على كثافة الفوتون (أحمر = كثافة عالية، البنفسجي = منخفض الكثافة). بين 4-7 أيام آخر زرع والفئران المتلقية تبدأ تظهر علامات سريرية للGVHD. وضعت كوك وآخرون. 1 (أ) لنظام التسجيل quantitate تطور المرض استنادا إلى الفراء نسيج المتلقي الفئران وسلامة الجلد، والنشاط، وفقدان الوزن، والموقف. وسجل الفئران يوميا، والموت الرحيم عندما تصبح المحتضرة. الفئران المتلقية أصبحت تحتضر عموما 20-30 زرع آخر أيام. نماذج الفئران هي أدوات قيمة لدراسة علم المناعة من GVHD. زرع الخلايا بشكل انتقائي خاص T مجموعات فرعية آلأدنى مستوى لتحديد دقيق لأدوار كل مجموعة فرعية يلعب. غير جراحية تتبع استجابات الخلايا T في الجسم الحي يضيف طبقة أخرى ذات قيمة للنماذج GVHD الفئران.

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model at JoVE.com

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

الفئران زرع نخاع العظام هو أسلوب يستخدم على نطاق واسع لدراسة آليات المناعية التي تحكم الطعم ضد المضيف المرض لدى البشر. القدرة على رصد أنماط الاتجار خلية T<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; يسمح لتحليل مفصل للوضع وإدامة استجابات الخلايا T خلال الطعم ضد المضيف المرض.

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

تنبيغ من فيروسات تي خلية المستقبلات في الخلايا التائية ماوس

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

ل<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; نموذج لهجوم T-خلية الموجه دبقية قليلة التغصن في الدماغ الحادة شرائح

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

تحريض الفئران المعوية التهاب عن طريق نقل بالتبني من المستجيب CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; عالية</sup&gt; خلايا T في الفئران العوز المناعي

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

Femur Window Chamber Model for In Vivo Cell Tracking in the Murine Bone Marrow

عظم الفخذ نافذة الغرفة نموذج ل<em&gt; في فيفو</em&gt; تتبع الخلايا في الفئران نخاع العظام

Bone marrow is a complex organ that contains various hematopoietic and non-hematopoietic cells. These cells are involved in many biological processes, ...

An In Vitro Model of the Blood-brain Barrier Using Impedance Spectroscopy: A Focus on T Cell-endothelial Cell Interaction

An In Vitro Model of the Blood-brain Barrier Using Impedance Spectroscopy: A Focus on T Cell-endothelial Cell Interaction

ل<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من حاجز الدم في الدماغ عن طريق التحليل الطيفي المعاوقة: التركيز على التفاعل خلية تي خلية البطانية

Breakdown of the blood-brain barrier (BBB) is a critical step in the development of autoimmune diseases such as multiple sclerosis (MS) and its animal ...

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

In Vivo Assay for Detection of Antigen-specific T-cell Cytolytic Function Using a Vaccination Model

في فيفو الفحص للكشف عن وظيفة محددة مستضد تي خلية عن استخدام نموذج التطعيم

Current methodologies for antigen-specific killing are limited to in vitro use or utilized in infectious disease models. However, there is not a protocol ...

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo

بروتوكول نفطة شفط لدراسة الخلية تي البشرية استدعاء الاستجابات في فيفو

Cutaneous antigen-recall models allow for studies of human memory responses in vivo. When combined with skin suction blister (SB) induction, this model ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

نموذج السابقين فيفو الابتدائي بورسال خلية ثقافة دجاج لدراسة الأمراض المعدية بورسال الفيروسات المرضية

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Multicolor Flow Cytometry-based Quantification of Mitochondria and Lysosomes in T Cells

التدفق متعدد الألوان المستندة إلى الخلوي الكمي الميتوكوندريا وليسوسوميس في خلايا تي

T cells utilize different metabolic programs to match their functional needs during differentiation and proliferation. Mitochondria are crucial cellular ...

Determination of Regulatory T Cell Subsets in Murine Thymus, Pancreatic Draining Lymph Node and Spleen Using Flow Cytometry

تحديد المجموعات الفرعية التنظيمية تي الخلية في الغدة الصعترية مورين، البنكرياس تصب العقدة الليمفاوية والطحال باستخدام التدفق الخلوي

Our immune system consists of a number and variety of immune cells including regulatory T cells (Treg) cells. Treg cells can be divided into two subsets, ...