Name: assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure
Uploaded: 2012-03-20T13:00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

אנו רוצים להודות מונטה ווסטרפילד, מקוטו קוביאשי ו יאצק Topczewski על המתנות של פלסמידים שכן ההכלאה באתרם microinjections mRNA. אנו מודים סטף ארהרד עבור המופיע בסרטון. כמו כן, אנו רוצים להודות סיוע של ויליאם Goossens עם מיקרוסקופיה confocal רואים בסרט. טיילר שוונד סיפק תמונות בשימוש וידאו, ואת רודני דייל סייעה לקראת וידאו. כמו כן, אנו מודים לצוות CMRC טיפול בבעלי חיים לעבודה עם בעלי דג הזברה. עבודה זו מומנה על ידי מענק NIH R21 AA13596 כדי SCA.

<ol>
	<li>Streissguth, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+syndrome+in+adolescents+and+adults.">Fetal alcohol syndrome in adolescents and adults.</a> Jama. 265 (15), 1961-1967 (1991).</li><li>Floyd, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observations+from+the+CDC.+Preventing+alcohol-exposed+pregnancies+among+women+of+childbearing+age:+the+necessity+of+a+preconceptional+approach.">Observations from the CDC. Preventing alcohol-exposed pregnancies among women of childbearing age: the necessity of a preconceptional approach.</a> J. Womens Health Gend. Based Med. 8 (6), 733-736 (1999).</li><li>Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+analysis+of+acute+ethanol+exposure+in+zebrafish+development:+a+critical+time+window+and+resilience.">Large-scale analysis of acute ethanol exposure in zebrafish development: a critical time window and resilience.</a> PLoS One. 6 (5), e20037-e20037 (2011).</li><li>Dlugos, C. A., Rabin, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+effects+of+developmental+exposure+to+ethanol+on+the+zebrafish+heart.">Structural and functional effects of developmental exposure to ethanol on the zebrafish heart.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 34 (6), 1013-1021 (2010).</li><li>Fernandes, Y., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+behavioral+changes+in+response+to+early+developmental+exposure+to+ethanol+in+zebrafish.">Long-term behavioral changes in response to early developmental exposure to ethanol in zebrafish.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 33 (4), 601-609 (2009).</li><li>Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+embryonic+exposure+to+ethanol+on+zebrafish+visual+function.">Effects of embryonic exposure to ethanol on zebrafish visual function.</a> Neurotoxicol. Teratol. 24 (6), 759-766 (2002).</li><li>Tanguay, R. L., Reimers, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+ethanol+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Analysis of ethanol developmental toxicity in zebrafish.</a> Methods Mol. Biol. 447, 63-74 (2008).</li><li>Blader, P., Strahle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+impairs+migration+of+the+prechordal+plate+in+the+zebrafish+embryo.">Ethanol impairs migration of the prechordal plate in the zebrafish embryo.</a> Dev. Biol. 201 (2), 185-201 (1998).</li><li>Loucks, E., Carvan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3rd,+Strain-dependent+effects+of+developmental+ethanol+exposure+in+zebrafish.">3rd, Strain-dependent effects of developmental ethanol exposure in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 745-755 (2004).</li><li>Ahlgren, S. C., Preedy, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Fetal+Alcohol+Syndrome:+Shh-signaling.">Molecular Mechanisms of Fetal Alcohol Syndrome: Shh-signaling.</a> Comprehensive Handbook of Alcohol Related Pathology. , (2004).</li><li>Reimers, M. J., Flockton, A. R., Tanguay, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol-+and+acetaldehyde-mediated+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Ethanol- and acetaldehyde-mediated developmental toxicity in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 769-781 (2004).</li><li>Pfaffl, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+mathematical+model+for+relative+quantification+in+real-time+RT-PCR.">A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR.</a> Nucleic Acids Res. 29 (9), 45-45 (2001).</li><li>Jowett, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tissue in situ hybridization: methods in animal development. , 128-128 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciphering+the+role+of+Shh+signaling+in+axial+defects+produced+by+ethanol+exposure.">Deciphering the role of Shh signaling in axial defects produced by ethanol exposure.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 86, 556-567 (2009).</li><li>Schwend, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+Npc1+and+availability+of+cholesterol+for+early+embryonic+cell+movements+in+zebrafish.">Requirement of Npc1 and availability of cholesterol for early embryonic cell movements in zebrafish.</a> J. Lipid Res. 52 (7), 1328-1344 (2011).</li><li>Spohr, H. L., Willms, J., Steinhausen, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+spectrum+disorders+in+young+adulthood.">Fetal alcohol spectrum disorders in young adulthood.</a> J. Pediatr. 150 (2), 175-179 (2007).</li><li>Strauss, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+intrauterine+environment+on+childhood+growth.">Effects of the intrauterine environment on childhood growth.</a> Br. Med. Bull. 53 (1), 81-95 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Schwend, T., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+changes+associated+with+teratogen-induced+cyclopia.">Molecular changes associated with teratogen-induced cyclopia.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 79 (9), 642-651 (2007).</li><li>Schwend, T., Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+Gli+activity+in+craniofacial+tissues+of+hedgehog-pathway+reporter+transgenic+zebrafish.">Visualization of Gli activity in craniofacial tissues of hedgehog-pathway reporter transgenic zebrafish.</a> PLoS One. 5 (9), 14396-14396 (2011).</li><li>Chrisman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+ethanol+exposure+disrupts+the+expression+of+FGF8+and+Sonic+hedgehog+during+limb+patterning.">Gestational ethanol exposure disrupts the expression of FGF8 and Sonic hedgehog during limb patterning.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 70 (4), 163-171 (2004).</li></ol>

אין לנו מה למסור.

בשיטות שתוארו כאן את התוצאות המוצגות להוכיח רק קצה איך דג הזברה יכול לשמש כדי לחקור ליקויים התפתחותיים. בגלל הנגישות של העובר, מספר גבוה של ביצים על המצמד כל אחד, שחזור גבוהה של התוצאות, חוליות אלה הם אידיאליים עבור מחקרים טרטוגניות. הדג יכול גם לטפל להכיל מולקולות ניאון להשתמש ככתב חזותית גן מסוים או מסלול של ריבית 19. במחקרים אתנול, במינונים המשמשים נראה די גבוה לעומת רמות אלכוהול בדם יונקים. עם זאת, רמות אלה משקפים את מה נמצא בתוך המים, ולא כל אתנול מועבר לעובר. יחדיו, בשיטות המתוארות ו כמפורט לעיל עולה כי עוברי דג הזברה הם שימושיים מאוד בדוגמנות מומים מולדים אדם הקשורים לחשיפה אתנול. יתר על כן, הביטוי של גנים השינויים שנמצאו דג הזברה אושרו על ידי אחריםבמערכות מודל יונקים 20, טוען כי השפעת ההתפתחות של אתנול נשמרות על פני החוליות. רבים טכניקות הפגינו לעיל ניתן להשתמש עם עלבונות סביבתיים או תרופות אחרות על מנת לאתר בקלות ובמהירות teratogens פוטנציאליים ולקבוע את המנגנונים התורמים teratogenesis של חומר מסוים.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> רקמת RNA ערכת: 5-ראש PerfectPure </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> FP2302410 </td></tr><tr><td> פלטינום SYBR ירוק QPCR SuperMix-UDG </td><td> Invitrogen </td><td> 11733038 </td></tr><tr><td> mMessage תשואה גבוהה mMachine כתרים ערכת שעתוק RNA </td><td> יישומי Biosystems </td><td> תלוי פולימראז רנ&quot;א פלסמיד שלך </td></tr></tbody></table>

assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure

תסמונת אלכוהול עוברית (FAS) הוא ביטוי חמור של חשיפה עוברית על אתנול. הוא מציג עם מומים האופייניים על הפנים איברים, כולל פיגור שכלי עקב התפתחות המוח ועל סדר פגום. ספקטרום אלכוהול עוברית הפרעה (FASD) הוא מונח המשמש לכיסוי רצף של מומים מולדים המתרחשות עקב צריכת אלכוהול של האם, ומופיע כ -4% מהילדים שנולדו בארצות הברית. עם 50% הפוריות לנשים בגיל דיווח על צריכת אלכוהול, ומחצית ההריונות להיות מתוכנן, חשיפה לא מכוונת הוא נושא מתמשך 2. על מנת להבין בצורה הטובה ביותר את הנזק המיוצר על ידי אתנול, ובנוסף לייצר מודל שבאמצעותו אפשר לבדוק התערבויות פוטנציאליות, פיתחנו מודל של חשיפה באמצעות אתנול התפתחותית עובר דג הזברה. דג הזברה הם אידיאליים עבור סוג זה של מחקר teratogen 3-8. כל זוג מטילה מאות ביצים, אז מה שיכול להיות שנאספו מבלי לפגוע הבוגרתדגים. עובר דג הזברה שקוף ניתן הדמיה בקלות עם כל מספר של כתמים. ניתוח של עוברים אלה לאחר חשיפה אתנול במינון ובזמנים שונים של משך מראה כי יישום הליקויים ההתפתחותיים ברוטו אתנול המיוצר על ידי עולים בקנה אחד עם מום הלידה האנושית. שתוארו כאן הם הטכניקות הבסיסיות המשמשות ללמוד ולטפל מודל FAS דג הזברה.

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

כדי להבין את המנגנונים המולקולריים של אתנול הנזק הנגרמת התפתחותית, פיתחנו מודל של דג הזברה חשיפה אתנול בוחנים את פיזיים, שינויים הסלולר, וגנטיים המתרחשות לאחר החשיפה אתנול<sup&gt; 1</sup&gt;. לאחר מכן, אנו מבקשים למצוא התערבויות פוטנציאליות במהירות לבדוק אותם במודל בעלי חיים.

הערכת שינויים teratogenic במודל דג הזברה של חשיפה אלכוהול עוברית

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

פוליוויניל אלכוהול ספוג דגם השרשה

Wound healing is a complicated, multistep process involving many cell types, growth factors and compounds1-3. Because of this complexity, wound healing ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

גישה ניתוחית חדשנית למנהל Intratracheal של סוכני יו במודל של עכברים עוברי

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

הקרנה למכפילים מלנומה תוך שימוש במודל גידול כבני מקום דג זברה

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

הערכת שינויים בנדיפות כללית הרדמה רגישות של עכברים לאחר התערבות תרופתי מקומית או מערכתית

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

מודל אפשרי דג הזברה של מחלת כליות פוליציסטיות: מציאה של<em&gt; Wnt5a</em&gt; גורם ציסטות בכליות דג הזברה

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

דגם עור עכבר עוברי של תיקון פצע צלקות

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

דור של מחלת ריאות חסימתית כרונית מודל בעכברים על ידי חשיפה חוזרת ונשנית האוזון

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

בנייה והערכה של מודל מאתר Osteolysis Calvarial על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo ב התרופפות אספטי

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

Model Surgical Training: Skills Acquisition in Fetoscopic Laser Photocoagulation of Monochorionic Diamniotic Twin Placenta Using Realistic Simulators

תרגולי דגם: רכישת מיומנויות של לייזר Fetoscopic Photocoagulation של Monochorionic Diamniotic טווין השליה באמצעות סימולטורים מציאותי

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome ...