Name: assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure
Uploaded: 2012-03-20T13:00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

我々は、in situハイブリダイゼーションおよびmRNA microinjections のためのプラスミドのギフトのためモンテウェスター、小林誠とヤツェクTopczewskiに感謝したいと思います。我々は、ビデオに表示されるためにステフエアハードに感謝しています。また、ビデオに示すように、共焦点顕微鏡でウィリアムグーセンの支援を承諾したがっています。タイラーSchwendは、ビデオで使用されている画像を提供し、ロドニーデールは、ビデオの準備を支援。また、ゼブラフィッシュとの飼育の仕事のためCMRC動物のケアスタッフを認める。この作品は、SCAにNIHグラントR21 AA13596によって資金を供給された。

<ol>
	<li>Streissguth, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+syndrome+in+adolescents+and+adults.">Fetal alcohol syndrome in adolescents and adults.</a> Jama. 265 (15), 1961-1967 (1991).</li><li>Floyd, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observations+from+the+CDC.+Preventing+alcohol-exposed+pregnancies+among+women+of+childbearing+age:+the+necessity+of+a+preconceptional+approach.">Observations from the CDC. Preventing alcohol-exposed pregnancies among women of childbearing age: the necessity of a preconceptional approach.</a> J. Womens Health Gend. Based Med. 8 (6), 733-736 (1999).</li><li>Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+analysis+of+acute+ethanol+exposure+in+zebrafish+development:+a+critical+time+window+and+resilience.">Large-scale analysis of acute ethanol exposure in zebrafish development: a critical time window and resilience.</a> PLoS One. 6 (5), e20037-e20037 (2011).</li><li>Dlugos, C. A., Rabin, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+effects+of+developmental+exposure+to+ethanol+on+the+zebrafish+heart.">Structural and functional effects of developmental exposure to ethanol on the zebrafish heart.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 34 (6), 1013-1021 (2010).</li><li>Fernandes, Y., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+behavioral+changes+in+response+to+early+developmental+exposure+to+ethanol+in+zebrafish.">Long-term behavioral changes in response to early developmental exposure to ethanol in zebrafish.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 33 (4), 601-609 (2009).</li><li>Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+embryonic+exposure+to+ethanol+on+zebrafish+visual+function.">Effects of embryonic exposure to ethanol on zebrafish visual function.</a> Neurotoxicol. Teratol. 24 (6), 759-766 (2002).</li><li>Tanguay, R. L., Reimers, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+ethanol+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Analysis of ethanol developmental toxicity in zebrafish.</a> Methods Mol. Biol. 447, 63-74 (2008).</li><li>Blader, P., Strahle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+impairs+migration+of+the+prechordal+plate+in+the+zebrafish+embryo.">Ethanol impairs migration of the prechordal plate in the zebrafish embryo.</a> Dev. Biol. 201 (2), 185-201 (1998).</li><li>Loucks, E., Carvan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3rd,+Strain-dependent+effects+of+developmental+ethanol+exposure+in+zebrafish.">3rd, Strain-dependent effects of developmental ethanol exposure in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 745-755 (2004).</li><li>Ahlgren, S. C., Preedy, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Fetal+Alcohol+Syndrome:+Shh-signaling.">Molecular Mechanisms of Fetal Alcohol Syndrome: Shh-signaling.</a> Comprehensive Handbook of Alcohol Related Pathology. , (2004).</li><li>Reimers, M. J., Flockton, A. R., Tanguay, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol-+and+acetaldehyde-mediated+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Ethanol- and acetaldehyde-mediated developmental toxicity in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 769-781 (2004).</li><li>Pfaffl, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+mathematical+model+for+relative+quantification+in+real-time+RT-PCR.">A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR.</a> Nucleic Acids Res. 29 (9), 45-45 (2001).</li><li>Jowett, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tissue in situ hybridization: methods in animal development. , 128-128 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciphering+the+role+of+Shh+signaling+in+axial+defects+produced+by+ethanol+exposure.">Deciphering the role of Shh signaling in axial defects produced by ethanol exposure.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 86, 556-567 (2009).</li><li>Schwend, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+Npc1+and+availability+of+cholesterol+for+early+embryonic+cell+movements+in+zebrafish.">Requirement of Npc1 and availability of cholesterol for early embryonic cell movements in zebrafish.</a> J. Lipid Res. 52 (7), 1328-1344 (2011).</li><li>Spohr, H. L., Willms, J., Steinhausen, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+spectrum+disorders+in+young+adulthood.">Fetal alcohol spectrum disorders in young adulthood.</a> J. Pediatr. 150 (2), 175-179 (2007).</li><li>Strauss, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+intrauterine+environment+on+childhood+growth.">Effects of the intrauterine environment on childhood growth.</a> Br. Med. Bull. 53 (1), 81-95 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Schwend, T., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+changes+associated+with+teratogen-induced+cyclopia.">Molecular changes associated with teratogen-induced cyclopia.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 79 (9), 642-651 (2007).</li><li>Schwend, T., Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+Gli+activity+in+craniofacial+tissues+of+hedgehog-pathway+reporter+transgenic+zebrafish.">Visualization of Gli activity in craniofacial tissues of hedgehog-pathway reporter transgenic zebrafish.</a> PLoS One. 5 (9), 14396-14396 (2011).</li><li>Chrisman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+ethanol+exposure+disrupts+the+expression+of+FGF8+and+Sonic+hedgehog+during+limb+patterning.">Gestational ethanol exposure disrupts the expression of FGF8 and Sonic hedgehog during limb patterning.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 70 (4), 163-171 (2004).</li></ol>

我々は、開示することは何もありません。

方法はここで説明すると示された結果は、発達障害を調べるために使用する方法ゼブラフィッシュの氷山を示しています。ので、胚へのアクセスのしやすさ、各クラッチ、結果の高い再現性のために卵の数が多い、これらの脊椎動物では、催奇形性試験に最適です。魚はまた、特定の目的の遺伝子または19の経路の視覚的レポーターとして使用する蛍光分子を含むように操作することができます。エタノールの研究では、使用される用量は、哺乳動物の血中アルコール濃度に比べて非常に高く表示されます。しかし、これらのレベルは、水の中に存在するものを反映ではなく、すべてのエタノールは、胚に配信されます。 一緒になって、上記と詳述した方法は、ゼブラフィッシュ胚は、エタノール暴露に関連するヒトの先天性欠損症のモデル化に極めて有用であることを示唆している。さらに、ゼブラフィッシュで見つかった遺伝子発現の変化は、他のユーザーによって確認されている20哺乳類モデルシステムでは、エタノールの発達効果は脊椎動物間で保持されていることを示唆している。上で示したテクニックの多くは、迅速かつ容易に潜在的な催奇形を検出し、特定の物質の催奇形性に寄与する基本的なメカニズムを決定するために他の環境または医薬侮辱で使用することができます。

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>組織RNAキット：5内閣総理PerfectPure </td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> FP2302410 </td></tr><tr><td>プラチナSYBRグリーン定量PCRスーパーミックス-UDG </td><td>インビトロジェン</td><td> 11733038 </td></tr><tr><td> mMessage mMachine高収率で覆われたRNA転写キット</td><td>アプライドバイオシステムズ</td><td>あなたのプラスミドにRNAポリメラーゼに依存</td></tr></tbody></table>

assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure

胎児性アルコール症候群（FAS）は、エタノールへの胚の曝露の重篤な症状である。それは無秩序と損傷した脳の発達に起因する精神遅滞を含む顔や臓器に特徴的な欠陥を呈する。胎児性アルコールスペクトラム障害（FASD）は、母親のアルコール消費量が原因で発生する先天性欠損症の連続をカバーするために使用される用語であり、米国で生まれた子どもの約4％で発生します。出産年齢の女性の50％がアルコールの消費量を報告し、すべての妊娠の半数は計画外であると、意図的曝露が継続問題2です。最高のエタノールによって生成された損傷を理解し、プラス電位の介入をテストするためのモデルを生成するために、我々はゼブラフィッシュ胚を用いた発達エタノール暴露のモデルを開発しました。ゼブラフィッシュでは、催奇形性試験3-8のこのような理想的です。各ペアは、大人を損なうことなく収集することができる卵の数百を産む魚。ゼブラフィッシュ胚は透明であり、容易に汚れ、任意の数で撮像することができます。エタノールによって生成された総発達障害は、人間の先天性欠損症と一致している期間とアプリケーションのショーの異なった用量および時間でエタノールに暴露した後、これらの胚の解析。ここで説明したゼブラフィッシュFASモデルを研究し、操作するために使用される基本的なテクニックがあります。

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

エタノール誘発性発達損傷の分子機構を理解するために、我々は、エタノール暴露のゼブラフィッシュモデルを開発しており、エタノールの暴露後に発生する物理的な、携帯電話、および遺伝的変化を模索している<sup&gt; 1</sup&gt;。我々は、潜在的な介入を見つけて、急速にこの動物モデルでそれらをテストしようとします。

胎児性アルコール暴露のゼブラフィッシュモデルの催奇形性変化を評価する

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

ポリビニルアルコールスポンジモデル注入

Wound healing is a complicated, multistep process involving many cell types, growth factors and compounds1-3. Because of this complexity, wound healing ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

胎児のマウスモデルにおける生物活性剤の気管内投与のための新しい手術アプローチ

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

ゼブラ土着腫瘍モデルを用いたメラノーマの修飾のためのスクリーニング

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

胎児心エコー検査と子宮内発育制限のウサギモデルにおけるパルス波ドップラー超音波

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

局所または全身薬理学的介入後のマウスの揮発性全身麻酔の感度変化を評価する

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

多発性嚢胞腎疾患の可能性のあるゼブラフィッシュモデル：のノックダウン<em&gt; WNT5A</em&gt;ゼブラフィッシュ腎臓で嚢胞を引き起こす

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

瘢痕創傷修復のマウス胎児皮膚モデル

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

繰り返しオゾン暴露によるマウスの慢性閉塞性肺疾患モデルの生成

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

無菌を緩める CoCrMo 粒子への暴露によるマウス頭蓋骨融解モデルの構築と評価

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

Model Surgical Training: Skills Acquisition in Fetoscopic Laser Photocoagulation of Monochorionic Diamniotic Twin Placenta Using Realistic Simulators

リアルなシミュレータを使用した Monochorionic Diamniotic ツイン胎盤の胎児レーザー光凝固でモデル手術トレーニング: スキルの習得

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome ...