Name: assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure
Uploaded: 2012-03-20T13:00:00
Duration: 10 min 7 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

Мы хотели бы поблагодарить Монте Westerfield, Макото Кобаяси и Яцек Topczewski для подарков плазмид для в гибридизация и мРНК микроинъекций. Мы благодарны Стеф Эрхард за появление в видео. Мы также хотели бы выразить признательность за помощь Уильяма Гуссенс с конфокальной микроскопии показано на видео. Тайлер Schwend условии изображения, используемые в видео, и Родни Дейл помощь в подготовке к видео. Мы также признаем CMRC персонала для ухода за животными своего хозяйства работе с данио. Эта работа финансировалась NIH грант R21 AA13596 в SCA.

<ol>
	<li>Streissguth, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+syndrome+in+adolescents+and+adults.">Fetal alcohol syndrome in adolescents and adults.</a> Jama. 265 (15), 1961-1967 (1991).</li><li>Floyd, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observations+from+the+CDC.+Preventing+alcohol-exposed+pregnancies+among+women+of+childbearing+age:+the+necessity+of+a+preconceptional+approach.">Observations from the CDC. Preventing alcohol-exposed pregnancies among women of childbearing age: the necessity of a preconceptional approach.</a> J. Womens Health Gend. Based Med. 8 (6), 733-736 (1999).</li><li>Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+analysis+of+acute+ethanol+exposure+in+zebrafish+development:+a+critical+time+window+and+resilience.">Large-scale analysis of acute ethanol exposure in zebrafish development: a critical time window and resilience.</a> PLoS One. 6 (5), e20037-e20037 (2011).</li><li>Dlugos, C. A., Rabin, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+effects+of+developmental+exposure+to+ethanol+on+the+zebrafish+heart.">Structural and functional effects of developmental exposure to ethanol on the zebrafish heart.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 34 (6), 1013-1021 (2010).</li><li>Fernandes, Y., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+behavioral+changes+in+response+to+early+developmental+exposure+to+ethanol+in+zebrafish.">Long-term behavioral changes in response to early developmental exposure to ethanol in zebrafish.</a> Alcohol Clin. Exp. Res. 33 (4), 601-609 (2009).</li><li>Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+embryonic+exposure+to+ethanol+on+zebrafish+visual+function.">Effects of embryonic exposure to ethanol on zebrafish visual function.</a> Neurotoxicol. Teratol. 24 (6), 759-766 (2002).</li><li>Tanguay, R. L., Reimers, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+ethanol+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Analysis of ethanol developmental toxicity in zebrafish.</a> Methods Mol. Biol. 447, 63-74 (2008).</li><li>Blader, P., Strahle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol+impairs+migration+of+the+prechordal+plate+in+the+zebrafish+embryo.">Ethanol impairs migration of the prechordal plate in the zebrafish embryo.</a> Dev. Biol. 201 (2), 185-201 (1998).</li><li>Loucks, E., Carvan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3rd,+Strain-dependent+effects+of+developmental+ethanol+exposure+in+zebrafish.">3rd, Strain-dependent effects of developmental ethanol exposure in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 745-755 (2004).</li><li>Ahlgren, S. C., Preedy, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Fetal+Alcohol+Syndrome:+Shh-signaling.">Molecular Mechanisms of Fetal Alcohol Syndrome: Shh-signaling.</a> Comprehensive Handbook of Alcohol Related Pathology. , (2004).</li><li>Reimers, M. J., Flockton, A. R., Tanguay, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethanol-+and+acetaldehyde-mediated+developmental+toxicity+in+zebrafish.">Ethanol- and acetaldehyde-mediated developmental toxicity in zebrafish.</a> Neurotoxicol. Teratol. 26 (6), 769-781 (2004).</li><li>Pfaffl, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+mathematical+model+for+relative+quantification+in+real-time+RT-PCR.">A new mathematical model for relative quantification in real-time RT-PCR.</a> Nucleic Acids Res. 29 (9), 45-45 (2001).</li><li>Jowett, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Tissue in situ hybridization: methods in animal development. , 128-128 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciphering+the+role+of+Shh+signaling+in+axial+defects+produced+by+ethanol+exposure.">Deciphering the role of Shh signaling in axial defects produced by ethanol exposure.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 86, 556-567 (2009).</li><li>Schwend, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+of+Npc1+and+availability+of+cholesterol+for+early+embryonic+cell+movements+in+zebrafish.">Requirement of Npc1 and availability of cholesterol for early embryonic cell movements in zebrafish.</a> J. Lipid Res. 52 (7), 1328-1344 (2011).</li><li>Spohr, H. L., Willms, J., Steinhausen, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+alcohol+spectrum+disorders+in+young+adulthood.">Fetal alcohol spectrum disorders in young adulthood.</a> J. Pediatr. 150 (2), 175-179 (2007).</li><li>Strauss, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+intrauterine+environment+on+childhood+growth.">Effects of the intrauterine environment on childhood growth.</a> Br. Med. Bull. 53 (1), 81-95 (1997).</li><li>Loucks, E. J., Schwend, T., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+changes+associated+with+teratogen-induced+cyclopia.">Molecular changes associated with teratogen-induced cyclopia.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 79 (9), 642-651 (2007).</li><li>Schwend, T., Loucks, E. J., Ahlgren, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+Gli+activity+in+craniofacial+tissues+of+hedgehog-pathway+reporter+transgenic+zebrafish.">Visualization of Gli activity in craniofacial tissues of hedgehog-pathway reporter transgenic zebrafish.</a> PLoS One. 5 (9), 14396-14396 (2011).</li><li>Chrisman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+ethanol+exposure+disrupts+the+expression+of+FGF8+and+Sonic+hedgehog+during+limb+patterning.">Gestational ethanol exposure disrupts the expression of FGF8 and Sonic hedgehog during limb patterning.</a> Birth Defects Res. A. Clin. Mol. Teratol. 70 (4), 163-171 (2004).</li></ol>

Нам нечего раскрывать.

Методы, описанные здесь, и результаты, показанные продемонстрировать лишь верхушка того, как данио рерио могут быть использованы для допроса пороки развития. Из-за доступности эмбриона, большое количество яиц, отложенных для каждого сцепление и высокую воспроизводимость результатов этих позвоночных являются идеальным решением для тератогенных исследованиях. Рыба также можно манипулировать, чтобы содержать флуоресцентных молекул для использования в качестве визуального репортер отдельного гена или путь интерес 19. В этаноле исследований дозах появляются довольно высока по сравнению с уровнем млекопитающих алкоголя в крови. Тем не менее, эти уровни отражают то, что присутствует в воде, и не все из этанола доставляется в зародыше. Взятые вместе, методы, описанные выше и подробно показывают, что у эмбрионов данио рерио очень полезны для моделирования человеческих врожденных дефектов, связанных с воздействием этанола. Кроме того, изменения экспрессии генов находятся в данио были подтверждены другимиВ млекопитающих модель 20, что свидетельствует о развитии эффекты этанола сохраняются через позвоночных. Многие из методов было показано выше может быть использована с другими экологическими или фармацевтических оскорбления быстро и легко обнаружить потенциальную тератогенами и определить основные механизмы, которые способствуют тератогенез конкретного вещества.

<table border="1"><tbody><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td></tr><tr><td> Ткань РНК комплекте: 5-премьер PerfectPure </td><td> Fisher Scientific </td><td> FP2302410 </td></tr><tr><td> Платиновый SYBR зеленый КПЦР СУПЕРМИКС-UDG </td><td> Invitrogen </td><td> 11733038 </td></tr><tr><td> mMessage mMachine высокий выход ограничен РНК транскрипции комплект </td><td> Applied Biosystems </td><td> Зависит от РНК-полимеразы в плазмиды </td></tr></tbody></table>

assessing teratogenic changes in a zebrafish model of fetal alcohol exposure

Фетальный алкогольный синдром (ФАС) является серьезным проявлением эмбриональных воздействия этанола. В нем представлены с характерными дефектами лица и органы, в том числе умственная отсталость из-за неупорядоченных и повреждения развития мозга. Плод алкоголь спектр расстройств (FASD) это термин, используемый для покрытия континуум врожденные дефекты, которые возникают в связи с материнской потребления алкоголя, и встречается примерно у 4% детей, рожденных в Соединенных Штатах. С 50% в детородном возрасте женщины сообщив о потреблении алкоголя, а половина всех беременностей быть незапланированными, непреднамеренного воздействия является постоянной проблемой 2. Для того, чтобы лучше понять повреждения производства этанола, а также производить модель для тестирования возможных мер, мы разработали модель развития воздействия этанола помощью рыбок данио эмбриона. Данио рерио идеально подходят для такого рода исследований тератогенным 3-8. Каждая пара откладывает сотни яиц, которые затем могут быть собраны без ущерба для взрослыхрыбы. Данио эмбрион является прозрачным и может быть легко, полученную с использованием любого количества пятен. Анализ этих эмбрионов после воздействия этанола в разных дозах и времени продолжительности и применения показывает, что валовой пороки развития производства этанола в соответствии с человека врожденный дефект. Описанный здесь основные методы, используемые для изучения и управления данио модель ФАС.

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure at JoVE.com

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Для того чтобы понять молекулярные механизмы этанол-индуцированного повреждения развития, мы разработали модель данио воздействие этанола и изучают физические, клеточном и генетические изменения, которые происходят после воздействия этанола<sup&gt; 1</sup&gt;. Затем мы стремимся найти потенциальных вмешательств и быстро проверить их в животных моделях.

Оценка Тератогенные Изменения в модели данио рерио внутриутробного развития плода алкоголь

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The Polyvinyl Alcohol Sponge Model Implantation

Губка поливинилового спирта модели имплантации

Wound healing is a complicated, multistep process involving many cell types, growth factors and compounds1-3. Because of this complexity, wound healing ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

Новый хирургический подход к интратрахеального введения биологически активных веществ в фетальный модель мыши

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

Скрининг на Меланома Модификаторы помощью рыбок данио автохтонные модели опухоли

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Эхокардиография плода и импульсной волны ультразвуковая допплерография в модели кролика внутриутробной задержки роста

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Assessing Changes in Volatile General Anesthetic Sensitivity of Mice after Local or Systemic Pharmacological Intervention

Оценивая изменения в летучих общим наркозом чувствительность мышей после местного или системного фармакологического вмешательства

One desirable endpoint of general anesthesia is  the state of unconsciousness, also known as hypnosis. Defining the hypnotic state in animals is  less ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

Возможно данио рерио Модель поликистоза почек: Нокдаун<em&gt; Wnt5a</em&gt; Причины кисты у рыбок данио почек

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Мышь кожу плода Модель шрамов заживления ран

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Generation of a Chronic Obstructive Pulmonary Disease Model in Mice by Repeated Ozone Exposure

Поколение модели хронической обструктивной болезни легких у мышей, воздействие неоднократные озона

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is characterized by persistent airflow limitation and lung parenchymal destruction. It has a very high ...

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

Строительство и оценке модели мышиных подвздошную остеолиза под воздействием CoCrMo частиц в асептических рыхления

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

Model Surgical Training: Skills Acquisition in Fetoscopic Laser Photocoagulation of Monochorionic Diamniotic Twin Placenta Using Realistic Simulators

Хирургического обучения модели: Приобретение навыков в Fetoscopic лазерная фотокоагуляция диамниальные дихориально Twin плаценты, используя реалистичные тренажеры

Fetoscopic laser coagulation of arterio-venous anastomoses (AVA) in a monochorionic placenta is the standard of care for twin-twin transfusion syndrome ...