Name: the neuroblast assay: an assay for the generation and enrichment of neuronal progenitor cells from differentiating neural stem cell progeny using flow cytometry
Uploaded: 2012-04-22T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytomet

وأيد هذا العمل من خلال تمويل من مؤسسة Overstreet.

1. مجموعة أساسية حتى قبل الشروع في زراعة الخلايا <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم خلط NeuroCult NSC متوسطة القاعدية وNeuroCult ملاحق مجلس الأمن القومي انتشار الأسلحة النووية في نسبة 9:1، على التوالي، إلى جعل مجلس الأمن القومي الشامل المتوسطة. </li><li style=";text-align:...

<ol>
	<li>Azari, H., Rahman, M., Sharififar, S., Reynolds, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Expansion+of+the+Adult+Mouse+Neural+Stem+Cells+Using+the+Neurosphere+Assay.">Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay.</a> J. Vis. Exp. (45), e2393 (2010).</li><li>Azari, H., Sharififar, S., Rahman, M., Ansari, S., Reynolds, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+Embryonic+Mouse+Neural+Stem+Cell+Culture+Using+the+Neurosphere+Assay.">Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay.</a> J. Vis. Exp. (47), e2457 (2011).</li><li>Siebzehnrubl, F. A., Vedam-Mai, V., Azari, H., Reynolds, B. A., Deleyrolle, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Characterization+of+Adult+Neural+Stem+Cells.">Isolation and Characterization of Adult Neural Stem Cells.</a> Methods. Mol. Biol. 750, 61-77 (2011).</li><li>Scheffler, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+and+functional+characterization+of+adult+brain+neuropoiesis.">Phenotypic and functional characterization of adult brain neuropoiesis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102, 9353-9358 (2005).</li><li>Azari, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+immature+neuronal+cells+from+neural+stem+cell+progeny.">Purification of immature neuronal cells from neural stem cell progeny.</a> PLoS One. 6, e20941-e20941 (2011).</li><li>Amariglio, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor-Derived+Brain+Tumor+Following+Neural+Stem+Cell+Transplantation+in+an+Ataxia+Telangiectasia+Patient.">Donor-Derived Brain Tumor Following Neural Stem Cell Transplantation in an Ataxia Telangiectasia Patient.</a> Plos Medicine. 6, 221-231 (2009).</li></ol>

قد القدرة على عزل تعريف السكان الخلايا العصبية (العصبونات، أي الخلايا النجمية وoligodendrocytes) حل بعض العقبات المرتبطة التطبيق السريري من الخلايا الجذعية العصبية (NSCs). الأول، أنه يساعدنا على وصف كامل للسكان بدءا من الخلايا المانحة. الثانية، لأنها تتيح لنا استخدام نوع خلية...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم كاشف </td><td> نوع </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> NeuroCult NSC متوسطة بصل </td><td> متوسط </td><td> وقف سيل تكنولوجيز </td><td> 05700 </td><td></td></tr><tr><td> NeuroCult NSC ملاحق انتشار الأسلحة النووية </td><td> متوسط ​​الملحق </td><td> وقف سيل تكنولوجيز </td><td> 05701 </td><td></td></tr><tr><td> 0.05٪ التربسين-EDTA </td><td> الكاشف </td><td> Gibco </td><td> 25300-062 </td><td></td></tr><tr><td> فول الصويا مثبط التربسين </td><td> الكاشف </td><td> سيغما </td><td> T6522 </td><td></td></tr><tr><td> القلم / بكتيريا </td><td> الكاشف </td><td> Gibco </td><td> 15140-122 </td><td></td></tr><tr><td> * MEM </td><td> الكاشف </td><td> Gibco </td><td> 41500-018 </td><td> HEM مكون </td></tr><tr><td> * HEPES </td><td> الكاشف </td><td> سيغما </td><td> H4034 </td><td> HEM مكون </td></tr><tr><td> * الماء المقطر </td><td> الكاشف </td><td> Gibco </td><td> 15230-147 </td><td></td></tr><tr><td> خلية مصفاة </td><td> غربال </td><td> دينار بحريني الصقر </td><td> 352340 </td><td></td></tr><tr><td> T25 قارورة </td><td> ثقافة وير </td><td> Nalge نونك الدولية </td><td> 136196 </td><td></td></tr><tr><td> T80 قارورة </td><td> ثقافة وير </td><td> Nalge نونك الدولية </td><td> 178905 </td><td></td></tr><tr><td> 15 مل من أنابيب </td><td> ثقافة وير </td><td> دينار بحريني الصقر </td><td> 352096 </td><td></td></tr><tr><td> 50 مل من أنابيب </td><td> ثقافة وير </td><td> دينار بحريني الصقر </td><td> 352070 </td><td&gt; </td></tr><tr><td> EGF </td><td> عامل النمو </td><td> R &amp; D </td><td> 2028-EG </td><td></td></tr><tr><td> ب. جمعية جيل المستقبل </td><td> عامل النمو </td><td> R &amp; D </td><td> 3139-FB </td><td></td></tr><tr><td> الهيبارين </td><td> عامل النمو </td><td> سيغما </td><td> H4784 </td><td> أعيد في برنامج تلفزيوني </td></tr><tr><td> مكافحة PSA-NCAM-PE </td><td> الجسم المضاد </td><td> Miltenyi بيوتيك </td><td> 130-093-274 </td><td></td></tr><tr><td> PE-مترافق الماوس IgG1 </td><td> Isotype سيطرة الجسم المضاد </td><td> دينار بحريني Pharminogen </td><td> 556029 </td><td></td></tr><tr><td> الهيبارين </td><td> عامل النمو </td><td> سيغما </td><td> H4784 </td><td> أعيد في برنامج تلفزيوني </td></tr><tr><td> HrBMP-4 </td><td> عامل النمو </td><td> R &amp; D </td><td> 314-BP-010 </td><td></td></tr><tr><td> بولي-L-Ornitهايني </td><td> الكاشف </td><td> سيغما </td><td> P4957 </td><td></td></tr><tr><td> الجنين مصل العجل </td><td> متوسط ​​الملحق </td><td> Gibco </td><td> 10099-141 </td><td></td></tr><tr><td> GFAP </td><td> الجسم المضاد </td><td> DAKO </td><td> Z0334 </td><td></td></tr><tr><td> B-III تويولين </td><td> الجسم المضاد </td><td> Promega </td><td> G7121 </td><td></td></tr></table> * لجعل HEM، مزيج 1 × علبة L 10 من MEM و 160 مل من HEPES 1M وتحقيق وحدة التخزين إلى 8.75 لتر باستخدام الماء المقطر. تعيين PH النهائي إلى 7.4 وتخزينه في درجة مئوية 4

the neuroblast assay: an assay for the generation and enrichment of neuronal progenitor cells from differentiating neural stem cell progeny using flow cytometry

يمكن عزل الخلايا الجذعية العصبية (NSCs)، وتوسعت في نطاق واسع، وذلك باستخدام الفحص neurosphere ومتباينة إلى ثلاثة أنواع رئيسية من خلايا الجهاز العصبي المركزي (CNS)، وهي الخلايا النجمية، oligodendrocytes والخلايا العصبية. هذه الخصائص تجعل الجذعية العصبية والخلايا الاولية مصدرا قيما قابلة للتجديد الخلايا للدراسات في المختبر مثل فحص المخدرات، neurotoxicology والكهربية، وكذلك لعلاج استبدال الخلية في العديد من الأمراض العصبية. في الممارسة العملية، ومع ذلك، عدم تجانس ذرية مجلس الأمن القومي، وإنتاج منخفض من الخلايا العصبية وoligodendrocytes، وغلبة تمايز الخلايا النجمية بعد تحد تطبيقاتها السريرية. هنا، نحن تصف منهجية جديدة لتنقية جيل لاحق من الخلايا العصبية وغير ناضج من ذرية NSC الفئران باستخدام مضان الفرز الخلية تفعيلها (FACS) التكنولوجيا. باستخدام هذه المنهجية، يمكن التوصل الى التخصيب الخلية العصبية سلف سكان خفة دمالحوت أي نجمية ملحوظ وبحسن نية تلوث مجلس الأمن القومي. الإجراء يشمل التفريق بين ذرية معزولة وتوسيع مجلس الأمن القومي من eminences الماوس E14 العقدية باستخدام مقايسة neurosphere، تليها العزلة وإثراء غير ناضج الخلايا العصبية على أساس خصائصها الفيزيائية (الحجم والتعقيد الداخلية) وفلوري باستخدام تكنولوجيا تدفق الخلوي. وعموما، يستغرق 5-7 أيام لتوليد neurospheres و 6-8 أيام في التفريق NSC ذرية وعزل عالي النقاء الخلايا العصبية غير ناضج.

Watch this Scientific Journal Video about The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytomet

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

هذا البروتوكول الفيديو يشرح طريقة جديدة لتوليد وتنقية لاحق من الخلايا العصبية السلف من مصدر متجدد للخلايا الجذعية العصبية (NSCs) على أساس (الحبوبية حجم والداخلية) والخصائص الجسدية فلوري باستخدام تكنولوجيا تدفق الخلوي.

الفحص Neuroblast: والفحص للانشاء وإثراء خلايا متعلق بالخلايا العصبية السلف من التفريق العصبية الجذعية آله الخلية باستخدام التدفق الخلوي

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolation and Expansion of the Adult Mouse Neural Stem Cells Using the Neurosphere Assay

العزل والتوسع في الخلايا الجذعية العصبية الكبار باستخدام الفحص Neurosphere

Isolation and expansion of the putative neural stem cells (NSCs) from the adult murine brain was first described by Reynolds and Weiss in 1992 employing a ...

Establishing Embryonic Mouse Neural Stem Cell Culture Using the Neurosphere Assay

تأسيس الخلايا الجذعية الجنينية الماوس العصبية الثقافة باستخدام الفحص Neurosphere

In mammalians, stem cells acts as a source of undifferentiated cells to maintain cell genesis and renewal in different tissues and organs during the life ...

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

العصبية تشكيل مستعمرة الفحص الخلوي : إن الفحص تميز بحسن نية الخلايا الجذعية العصبية من الخلايا العصبية السلف

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

تعيش خلية التصوير الحسي للخلايا السليمة في الجهاز السلائف ذبابة الفاكهة شرانق

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

العزلة والثقافة من الخلايا العصبية كريست من الأنبوبة العصبية الجنينية الفئران

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Feeder-free Derivation of Neural Crest Progenitor Cells from Human Pluripotent Stem Cells

خالية من التغذية اشتقاق الخلايا العصبية كريست السلف من افرة القوة البشرية الخلايا الجذعية

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have great potential for studying human embryonic development, for modeling human diseases in the dish and as a ...

Flow Cytometry Protocols for Surface and Intracellular Antigen Analyses of Neural Cell Types

التدفق الخلوي بروتوكولات لالسطحية وبين الخلايا مستضد تحليلات العصبية أنواع الخلايا

Flow cytometry has been extensively used to define cell populations in immunology, hematology and oncology. Here, we provide a detailed description of ...

Cell Sorting of Neural Stem and Progenitor Cells from the Adult Mouse Subventricular Zone and Live-imaging of their Cell Cycle Dynamics

فرز خلية العصبية الجذعية وخلايا السلف من الفأر Subventricular المنطقة الكبار وحية على التصوير من حيوية دورة الخلية الخاصة

Neural stem cells (NSCs) in the subventricular zone of the lateral ventricles (SVZ) sustain olfactory neurogenesis throughout life in the mammalian brain. ...

Enumeration of Neural Stem Cells Using Clonal Assays

تعداد الخلايا الجذعية العصبية باستخدام نسيلي فحوصات

Neural stem cells (NSCs) have the ability to self-renew and generate the three major neural lineages &#8212; astrocytes, neurons and oligodendrocytes. ...

Identifying Cell Surface Markers of Primary Neural Stem and Progenitor Cells by Metabolic Labeling of Sialoglycan

تحديد علامات سطح الخلية من الجذعية العصبية الأولية والخلايا السلف عن طريق وضع العلامات الأيضية من Sialoglycan

Neural stem and progenitor cells (NSPCs) are the cellular basis for the complex structures and functions of the brain. They are located in specialized ...