Name: measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Dette arbejde blev finansieret dels ved NIH tilskud HL087653 og HL105314. Nogle af de metoder, der blev udviklet i laboratoriet af Dr. Robert Mecham ved Washington University School of Medicine.

1. Ultralyd og tryksystem <ol><li> Starte ultralyd-systemet ifølge producentens instruktioner (Vevo 770, Visualsonics). Fyld den passende probe (alder E18 - P7 = model 708, alder&gt; P7 = model 707B) med destilleret vand og forbindelse til ultralydssystemet. Placere sonden i det justerbare stand på ca orientering nødvendig for at opnå en LV lange akse visning for en mus monteret på billeddannelse platformen, således at LV toppunkt peger mod injektionsenden arm. </li><li> Trykket Systemet består af en væskefyld...

<ol>
	<li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper.">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li><li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos.">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li><li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth.">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li><li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice.">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li><li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice.">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice.">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice.">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li><li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease.">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li><li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease,+supravalvular+aortic+stenosis.">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li><li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tools+for+the+developmental+biologist:+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development.">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li></ol>

Protokollen præsenteres her tilvejebringer en fremgangsmåde til måling af LV-tryk i slutningen embryonisk og begyndelsen neonatale mus. Den væsentligste begrænsning af denne protokol er den tidsmæssige opløsning af tryksystem. Tryksignalet dæmpes, når den bevæger af LV gennem nålen til transduceren, og kun middeltrykket værdier kan registreres. Dæmpningen kan minimeres ved hjælp af størst nålen er muligt, men nålen skal passe ind i LV lumen for forskellige ældede mus. Fordi det diastoliske tryk kan til...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagenset / udstyr </td><td> Firma </td><td> Katalog nummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Høj opløsning ultralydssystemet </td><td> Visualsonics </td><td> Vevo 770 </td><td> Eller et andet egnet ultralydsystem </td></tr><tr><td> Højfrekvente ultralydsonderne </td><td> Visualsonics </td><td> 708 og 707B </td><td></td></tr><tr><td> Billeddannelse platform og injektion arm </td><td> Visualsonics </td><td> Imaging Station 2 </td><td> Med EKG og temperatur feedback kontrol af platform </td></tr><tr><td> Tryktransducer </td><td> AD Instrumenter </td><td> MLT 844 </td><td></td></tr><tr><td> Bridge forstærker </td><td> AD Instrumenter </td><td> ML221 </td><td></td></tr><tr><td> Datafangstsystem </td&gt; <td> AD Instrumenter </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> Dataregistrering software </td><td> AD Instrumenter </td><td> LabChart </td><td></td></tr><tr><td> Ring stå og klemme </td><td> Forskellige leverandører </td><td></td><td> At holde tryktransducer under målingerne </td></tr><tr><td> 3-vejs stophaner med luer-forbindelser, mandlige lås </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-02 </td><td></td></tr><tr><td> 1/16 &quot;ID Tygon-røret </td><td> Cole Parmer </td><td> 06408 </td><td></td></tr><tr><td> Mandlige og kvindelige luers m / 1/16 &quot;slange modhage </td><td> Cole Parmer </td><td> 45510-50 45510-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 &quot;rør med han-og hun-luer ved hver ende </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-60 </td><td></td></tr><tr><td> 3 og 10 ml sprøjter </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 og 25G nåle </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> 1,5 inches i længden </td></tr><tr><td> Big Ben manometer </td><td> Riester </td><td> 1456-100 </td><td></td></tr><tr><td> Saline </td><td> Forskellige leverandører </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Heparin </td><td> Forskellige leverandører </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ultralyd gel </td><td> Parker </td><td> Aquasonic 100 </td><td></td></tr><tr><td> Hair remover lotion </td><td> Nair </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice

Blodtrykket stiger betydeligt under fosterudviklingen og postnatal udvikling hos hvirveldyr. Hos mus, er blodstrømmen første påviselige omkring embryonisk dag (E) 8,5 1. Systolisk venstre ventrikel (LV) tryk er 2 mm Hg ved E9.5 og 11 mmHg ved E14.5 2. Ved disse midten fosterstadiet er LV tydeligt gennem brystvæggen for invasive trykmålinger fordi ribberne og huden ikke er fuldt udviklet. Mellem E14.5 og fødsel (ca. E21) billeddiagnostiske metoder skal bruges til at se LV. Efter fødslen, gennemsnitligt arterietryk stiger fra 30 - 70 mmHg fra postnatal dag (P) 2-35 3. Ud over P20, kan blodtryk måles med solid state-katetre (dvs. Millar eller Scisense). Før P20, er disse katetre for stor til at udvikle mus arterier og arterielt tryk skal måles med brugerdefinerede trukket plastik katetre knyttet til væskefyldte tryktransducere 3 eller glas mikropipetter attgjorde ondt at servo null tryktransducere 4. Vores seneste arbejde har vist, at den største stigning i blodtrykket sker i de sene embryonale til tidlige postnatale periode i mus 5-7. Denne store stigning i blodtrykket kan have indflydelse på glat-muskelcelle (SMC) fænotype i udviklingslandene arterier og udløse vigtige mechanotransduction begivenheder. I sygdomme hos mennesker, hvor de mekaniske egenskaber af udviklingslandenes arterier er kompromitteret af defekter i ekstracellulære matrixproteiner (dvs. Marfan Syndrom 8 og Supravalvulær aortastenose 9) de hurtige ændringer i blodtrykket i løbet af denne periode kan bidrage til sygdommens fænotype og sværhedsgrad gennem ændringer i mechanotransduction signaler. Derfor er det vigtigt at være i stand til at måle ændringer i blodtrykket i slutningen embryonisk og den neonatale periode i musemodeller for human sygdom. Beskriver vi en fremgangsmåde til måling LV-tryk i slutningenembryonale (E18) og tidlige postnatale (P1 - 20) mus. En nål fastgjort til en væskefyldt tryktransducer indsat i LV ved hjælp af ultralyd. Omhu for at opretholde normal hjertefunktion i forsøgsprotokollen, især for de embryoniske mus. Repræsentative data præsenteres og begrænsninger af protokollen drøftes.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Måling tryk i venstre ventrikel (LV) i embryoniske og neonatale mus er beskrevet. Trykket måles ved at indsætte en nål forbundet til en væskefyldt transduceren i LV ved hjælp af ultralyd. Må drages omsorg for at opretholde normal hjertefunktion i forsøgsprotokollen.

Måling af tryk i venstre ventrikel i slutningen af ​​embryoner og neonatale mus

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Måling og modellering kontraktile Tørring i Human stratum corneum

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Ammonia Synthesis at Low Pressure

Ammoniak syntese ved lavt tryk

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomisk realistisk Neonatal hjerte Model til brug i Neonatal Patient simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

Musemodel af tryksår efter rygmarvsskade

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Måling af Global cellulære Matrix Metalloproteinase og metaboliske aktivitet i 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Metoder til in vivo -Biomekanisk testning af brachial plexus til neonatal smågrise

Neonatal brachial plexus palsy (NBPP) is a stretch injury that occurs during the birthing process in nerve complexes located in the neck and shoulder ...

Optical Imaging of Isolated Murine Ventricular Myocytes

Optisk billeddannelse af isolerede murine ventrikulære Myocytter

The ability to isolate adult cardiac myocytes has permitted researchers to study a variety of cardiac pathologies at the single cell level. While advances ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Mønster for geometrien af humane embryonale stamcelle kolonier på kompatible substrater til kontrol af Vævsniveau mekanik

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Evaluation of Left Ventricular Structure and Function using 3D Echocardiography

Evaluering af venstre ventrikulær struktur og funktion ved hjælp af 3D-ekkokardiografi

Three-dimensional (3D) quantification of the left ventricle (LV) provides significant added value in terms of diagnostic accuracy and precise risk ...

Measuring 3D In-vivo Shoulder Kinematics using Biplanar Videoradiography

Måling af 3D In-vivo Skulder kinematics ved hjælp af Biplanar Videoradiography

The shoulder is one of the human body's most complex joint systems, with motion occurring through the coordinated actions of four individual joints, ...

Måling af tryk i venstre ventrikel i slutningen af ​​embryoner og neonatale mus

Måling af tryk i venstre ventrikel i slutningen af embryoner og neonatale mus