Name: measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd, voor een deel, door de NIH subsidies HL087653 en HL105314. Sommige van de methoden werden ontwikkeld in het laboratorium van Dr Robert Mecham aan de Washington University School of Medicine.

1. Echografie en druk systeem <ol><li> Start de ultrasone volgens de instructies van de fabrikant (Vevo 770 Visualsonics). Vul de juiste sonde (leeftijd E18 - P7 = model 708, leeftijd&gt; P7 = model 707B) met gedestilleerd water en maak verbinding met de echo systeem. Plaats de sonde in de verstelbare standaard op de geschatte oriëntatie nodig is om een ​​LS-lange-as weergave voor een muis gemonteerd op de imaging platform, zodat de LV apex is gericht op de injectie arm te verkrijgen. </li><li> De druk bestaat ui...

<ol>
	<li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper.">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li><li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos.">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li><li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth.">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li><li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice.">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li><li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice.">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice.">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice.">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li><li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease.">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li><li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease,+supravalvular+aortic+stenosis.">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li><li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tools+for+the+developmental+biologist:+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development.">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li></ol>

Het protocol hier gepresenteerde een werkwijze voor het meten van de druk LV eind embryonale en vroege neonatale muizen. De belangrijkste beperking van dit protocol is de temporele resolutie van het druksysteem. De druk signaal wordt gedempt als het reizen van de LV door de naald van de transducer, en alleen maar betekenen drukwaarden kunnen worden opgenomen. De demping kan worden geminimaliseerd door gebruik te maken van de grootste naald mogelijk, maar de naald moet binnen de LV lumen geschikt is voor verschillende ou...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het reagens / apparatuur </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td><td> Reacties </td></tr><tr><td> Hoge resolutie echografie systeem </td><td> Visualsonics </td><td> Vevo 770 </td><td> Of andere passende ultrasound systeem </td></tr><tr><td> Hoge frequentie ultrageluid sondes </td><td> Visualsonics </td><td> 708 en 707B </td><td></td></tr><tr><td> Imaging platform en injectie arm </td><td> Visualsonics </td><td> Imaging Station 2 </td><td> Met ECG en temperatuur feedback controle van het platform </td></tr><tr><td> Drukopnemer </td><td> AD Instrumenten </td><td> MLT 844 </td><td></td></tr><tr><td> Brugversterker </td><td> AD Instrumenten </td><td> ML221 </td><td></td></tr><tr><td> Data acquisitie systeem </td&gt; <td> AD Instrumenten </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> Gegevens opname software </td><td> AD Instrumenten </td><td> LabChart </td><td></td></tr><tr><td> Ring staan ​​en klem </td><td> Diverse leveranciers </td><td></td><td> Om de druk transducer te houden tijdens de metingen </td></tr><tr><td> 3-weg kranen met Luer-aansluiting, man slot </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-02 </td><td></td></tr><tr><td> 1/16 &quot;ID Tygon Tubing </td><td> Cole Parmer </td><td> 06408 </td><td></td></tr><tr><td> Mannelijke en vrouwelijke Luers w / 1/16 &quot;slang barb </td><td> Cole Parmer </td><td> 45510-50 45510-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 &quot;buis met mannelijke en vrouwelijke luer aan elk uiteinde </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-60 </td><td></td></tr><tr><td> 3 en 10 ml spuiten </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 en 25G naalden </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> 1,5 inch lang </td></tr><tr><td> Big Ben manometer </td><td> Riester </td><td> 1456-100 </td><td></td></tr><tr><td> Zoutoplossing </td><td> Diverse leveranciers </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Heparine </td><td> Diverse leveranciers </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ultrasound gel </td><td> Parker </td><td> Aquasonic 100 </td><td></td></tr><tr><td> Hair remover lotion </td><td> Nair </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice

De bloeddruk stijgt aanzienlijk tijdens de embryonale en postnatale ontwikkeling van gewervelde dieren. In de muis, de doorbloeding is in de eerste detecteerbaar rond embryonale dag (E) 8.5 1. Systolische linker ventrikel (LV) druk is 2 mmHg bij E9.5 en 11 mmHg bij E14.5 2. Bij deze mid-embryonale stadia, de LV is duidelijk zichtbaar door de borstwand voor invasieve drukmetingen, omdat de ribben en de huid nog niet volledig ontwikkeld. Tussen E14.5 en geboorte (ongeveer E21) imaging methoden moeten worden gebruikt om de LV te bekijken. Na de geboorte, gemiddelde arteriële druk stijgt 30 tot 70 mmHg van de dagen na de geboorte (P) 2 - 35 3. Beyond P20, kan arteriële druk gemeten worden met solid-state katheters (dat wil zeggen Millar of Scisense). Voor P20, deze katheters zijn te groot voor de ontwikkeling van de muis slagaders en de arteriële druk moet worden gemeten met aangepaste getrokken plastic katheters aan met vloeistof gevulde druktransducers 3 of glas micropipetten attdeed pijn om servo null druktransducers 4. Onze recente werk heeft aangetoond dat de grootste stijging van de bloeddruk optreedt tijdens het einde van de embryonale om vroege postnatale periode bij muizen 5-7. Deze grote stijging van de bloeddruk kunnen beïnvloeden gladde spiercellen (SMC) fenotype bij de ontwikkeling van bloedvaten en leiden tot belangrijke mechanotransductie gebeurtenissen. Ziekten bij de mens, waar de mechanische eigenschappen van de ontwikkeling van bloedvaten in het gedrang komen door gebreken in de extracellulaire matrix eiwitten (dat wil zeggen Marfan syndroom 8 en supravalvulaire aortastenose 9) de snelle veranderingen in de bloeddruk tijdens deze periode kan bijdragen aan de ziekte van fenotype en de ernst door middel van veranderingen in mechanotransductie signalen. Daarom is het belangrijk te kunnen veranderingen in de bloeddruk te meten tijdens late embryonale en neonatale perioden muismodellen van menselijke ziekten. Wij beschrijven een werkwijze voor het meten LV druk eindembryonale (E18) en de vroege postnatale (P1 - 20) muizen. Een naald bevestigd aan een met vloeistof gevulde drukopnemer is aangesloten op de LV onder echografische begeleiding. Er wordt op normale hartfunctie handhaven tijdens de experimentele protocol, vooral voor de embryonale muizen. Representatieve gegevens worden gepresenteerd en de beperkingen van het protocol worden besproken.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Het meten van linker ventrikel druk (LV) in embryonale en neonatale muizen wordt beschreven. De druk wordt gemeten door het inbrengen van een naald is aangesloten op een met vloeistof gevulde transducer in de LV onder echografische begeleiding. Er moet worden normaal hartfunctie handhaven tijdens de experimentele protocol.

Het meten van linker ventrikel druk in de late embryonale en neonatale muizen

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Meten en Modeling Contractiele Drogen in Human hoornlaag

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Ammonia Synthesis at Low Pressure

Synthese van ammoniak bij lage druk

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomisch realistische neonatale hart Model voor gebruik in neonatale patiënt simulatoren

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

Muismodel van decubitus na dwarslaesie

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Meten mondiale cellulaire Matrix Metalloproteinase en metabole activiteit in 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methoden voor in vivo biomechanische tests op brachiale plexus in neonatale biggen

Neonatal brachial plexus palsy (NBPP) is a stretch injury that occurs during the birthing process in nerve complexes located in the neck and shoulder ...

Optical Imaging of Isolated Murine Ventricular Myocytes

Optische beeldvorming van geïsoleerde Murine ventriculaire Myocyten

The ability to isolate adult cardiac myocytes has permitted researchers to study a variety of cardiac pathologies at the single cell level. While advances ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Patroon van de geometrie van menselijke embryonale stamcel kolonies op conforme ondergronden om de mechanismen van Weefselniveau te beheersen

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Evaluation of Left Ventricular Structure and Function using 3D Echocardiography

Evaluatie van linkerventrikelstructuur en -functie met behulp van 3D-echocardiografie

Three-dimensional (3D) quantification of the left ventricle (LV) provides significant added value in terms of diagnostic accuracy and precise risk ...

Measuring 3D In-vivo Shoulder Kinematics using Biplanar Videoradiography

Meten van 3D in-vivo schouderkinematica met behulp van biplanaire videoradiografie

The shoulder is one of the human body's most complex joint systems, with motion occurring through the coordinated actions of four individual joints, ...