Name: measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Questo lavoro è stato finanziato, in parte, da sovvenzioni NIH HL087653 e HL105314. Alcuni dei metodi sono stati sviluppati in laboratorio del Dr. Robert Mecham presso la Washington University School of Medicine.

1. L&#39;ecografia e la pressione del sistema <ol><li> Avviare il sistema ad ultrasuoni secondo le istruzioni del produttore (Vevo 770, Visualsonics). Riempire il sonda appropriata (età E18 - P7 = modello 708, età&gt; = P7 modello 707B) con acqua distillata e connettersi al sistema ad ultrasuoni. Posizionare la sonda nel supporto regolabile in orientamento approssimativo necessaria per ottenere un asse lungo LV per un mouse montato sulla piattaforma di imaging in modo che l&#39;apice LV è puntato verso il braccio d...

<ol>
	<li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper.">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li><li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos.">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li><li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth.">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li><li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice.">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li><li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice.">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice.">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice.">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li><li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease.">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li><li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease,+supravalvular+aortic+stenosis.">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li><li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tools+for+the+developmental+biologist:+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development.">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li></ol>

Il protocollo qui presentata fornisce un metodo per misurare la pressione in LV fine embrionale e nei primi topi neonati. Il limite principale di questo protocollo è la risoluzione temporale del sistema di pressione. Il segnale di pressione viene smorzato mentre viaggia dal LV attraverso l&#39;ago al trasduttore, e solo i valori medi di pressione possono essere registrati. Lo smorzamento può essere minimizzato utilizzando la più ampia ago possibile, ma l&#39;ago deve inserirsi all&#39;interno del lume LV per diverse ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reagente / apparecchiatura </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Comments </td></tr><tr><td> Sistema ad ultrasuoni ad alta risoluzione </td><td> Visualsonics </td><td> Vevo 770 </td><td> O un altro sistema ad ultrasuoni appropriato </td></tr><tr><td> Sonde ad ultrasuoni ad alta frequenza </td><td> Visualsonics </td><td> 708 e 707B </td><td></td></tr><tr><td> Imaging piattaforma e braccio per iniezioni </td><td> Visualsonics </td><td> Imaging Station 2 </td><td> Con ECG e il feedback di controllo della temperatura della piattaforma </td></tr><tr><td> Trasduttore di pressione </td><td> AD Instruments </td><td> MLT 844 </td><td></td></tr><tr><td> Ponte amplificatore </td><td> AD Instruments </td><td> ML221 </td><td></td></tr><tr><td> Sistema di acquisizione dati </td&gt; <td> AD Instruments </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> Dati software di registrazione </td><td> AD Instruments </td><td> LabChart </td><td></td></tr><tr><td> Anello e morsetto </td><td> Diversi fornitori </td><td></td><td> Per mantenere trasduttore di pressione durante le misurazioni </td></tr><tr><td> Rubinetti a 3 vie con connessioni Luer lock maschio </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-02 </td><td></td></tr><tr><td> 1/16 &quot;ID Tubing Tygon </td><td> Cole Parmer </td><td> 06408 </td><td></td></tr><tr><td> Luer maschio e femmina w &quot;aletta / 1/16 tubo </td><td> Cole Parmer </td><td> 45510-50 45510-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 &quot;tubo maschio e femmina luer a ciascuna estremità </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-60 </td><td></td></tr><tr><td> 3 e 10 ml siringhe </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 e aghi 25G </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> 1,5 pollici di lunghezza </td></tr><tr><td> Big Ben manometro </td><td> Riester </td><td> 1456-100 </td><td></td></tr><tr><td> Salino </td><td> Diversi fornitori </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Eparina </td><td> Diversi fornitori </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Gel a ultrasuoni </td><td> Parker </td><td> Aquasonic 100 </td><td></td></tr><tr><td> Depilatore lozione </td><td> Nair </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice

La pressione sanguigna aumenta in modo significativo durante lo sviluppo embrionale e postnatale negli animali vertebrati. Nel topo, flusso di sangue è rilevabile prima intorno giorni embrionale (E) 8,5 1. Sistolica del ventricolo sinistro (LV) è di 2 mmHg di pressione a E9.5 e 11 mmHg a E14.5 2. A queste fasi di mid-embrionali, la LV è chiaramente visibile attraverso la parete toracica per la misurazione della pressione invasive, perché le costole e la pelle non sono pienamente sviluppati. Tra E14.5 e la nascita (circa E21) i metodi di imaging deve essere utilizzato per visualizzare il LV. Dopo la nascita, significa aumento della pressione arteriosa da 30 a 70 mmHg fin dal primo giorno post-natale (P) 2 - 35 3. Oltre P20, la pressione arteriosa può essere misurata con cateteri a stato solido (cioè Millar o Scisense). Prima di P20, questi cateteri sono troppo grandi per lo sviluppo di arterie del mouse e la pressione arteriosa deve essere misurata con l&#39;abitudine tirato cateteri di plastica attaccati al piene di liquido trasduttori di pressione 3 o vetro micropipette attdoleva di servo trasduttori di pressione nulle 4. Il nostro lavoro recente ha dimostrato che il maggior incremento della pressione arteriosa avviene durante le embrionali tardivi al primo periodo post-natale nei topi 5-7. Questo forte aumento della pressione arteriosa può influenzare cellule muscolari lisce (SMC) fenotipo nelle arterie di sviluppo e innescare eventi meccanotrasduzione importanti. Nella malattia umana, dove vengono compromesse le proprietà meccaniche delle arterie in via di sviluppo da difetti di proteine ​​della matrice extracellulare (ad esempio sindrome di Marfan 8 e stenosi aortica sopravalvolare 9) i rapidi cambiamenti della pressione sanguigna durante questo periodo può contribuire al fenotipo della malattia e la gravità con alterazioni meccanotrasduzione segnali. Pertanto, è importante essere in grado di misurare le variazioni della pressione durante il fine embrionale e periodi neonatali in modelli murini di malattie umane. Noi descriviamo un metodo per la misurazione della pressione LV fineembrionale (E18) e l&#39;inizio del post-natale (P1 - 20) i topi. Un ago attaccato ad una piena di fluido trasduttore di pressione viene inserito nella LV sotto guida ecografica. Si presta attenzione a mantenere una normale funzione cardiaca durante il protocollo di sperimentazione, soprattutto per i topi embrionali. Dati rappresentativi sono presentati e le limitazioni del protocollo sono discussi.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Misurazione della pressione ventricolare sinistra (LV) nei topi embrionali e neonatale è descritto. La pressione è misurata inserendo un ago connesso ad un trasduttore riempito di fluido nella LV sotto guida ecografica. Si deve prestare attenzione a mantenere una normale funzione cardiaca durante il protocollo sperimentale.

Misurazione della pressione ventricolare sinistra nel tardo Mice embrionali e neonatale

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Misurazione e modellazione contrattile asciugatura in Human strato corneo

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Ricerca

Bioingegneria

Ammonia Synthesis at Low Pressure

Sintesi dell'ammoniaca a bassa pressione

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Modello di cuore neonatale anatomicamente realistici per l'uso in simulatori paziente neonatale

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

Modello murino di ulcere da pressione dopo la ferita del midollo spinale

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Misurazione della proteinasi metallica della matrice cellulare globale e l'attività metabolica in idrogel 3D

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Metodi per il test biomeccanico In Vivo su plexus brachiale in porcellini neoatali

Neonatal brachial plexus palsy (NBPP) is a stretch injury that occurs during the birthing process in nerve complexes located in the neck and shoulder ...

Optical Imaging of Isolated Murine Ventricular Myocytes

Imaging ottico di miociti Murine Ventricolari isolati

The ability to isolate adult cardiac myocytes has permitted researchers to study a variety of cardiac pathologies at the single cell level. While advances ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Modellazione della geometria delle colonie di cellule staminali embrionali umane su substrati conformi per controllare la meccanica a livello di tessuto

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Evaluation of Left Ventricular Structure and Function using 3D Echocardiography

Valutazione della struttura e della funzione ventricolare sinistra mediante ecocardiografia 3D

Three-dimensional (3D) quantification of the left ventricle (LV) provides significant added value in terms of diagnostic accuracy and precise risk ...

Measuring 3D In-vivo Shoulder Kinematics using Biplanar Videoradiography

Misurazione della cinematica della spalla 3D in vivo utilizzando la videoradiografia biplanare

The shoulder is one of the human body's most complex joint systems, with motion occurring through the coordinated actions of four individual joints, ...