Name: measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Dette arbeidet ble finansiert, delvis ved NIH tilskudd HL087653 og HL105314. Noen av metodene ble utviklet i laboratoriet av Dr. Robert Mecham ved Washington University School of Medicine.

1. Ultralyd og trykk system <ol><li> Start ultralyd systemet i henhold til produsentens anvisning Vevo 770, Visualsonics). Fyll riktig probe (alder E18 - P7 = 708 modell, alder&gt; P7 = modell 707B) med destillert vann og koble til ultralyd systemet. Plasser sonden i den justerbare stand på omtrentlig orientering nødvendig for å oppnå en LV lang akse visning for en mus montert på bildebehandling plattformen slik at LV apex peker mot injeksjon arm. </li><li> Trykket Systemet består av en væskefylt trykkgiver, br...

<ol>
	<li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper.">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li><li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos.">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li><li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth.">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li><li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice.">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li><li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice.">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice.">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice.">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li><li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease.">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li><li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease,+supravalvular+aortic+stenosis.">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li><li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tools+for+the+developmental+biologist:+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development.">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li></ol>

Protokollen presenteres her gir en metode for måling av LV press i slutten av embryonale og tidlige neonatale mus. Den viktigste begrensning av denne protokollen er den temporale oppløsningen av presset systemet. Trykket signalet er dempet som det reiser fra LV gjennom nålen til svingeren, og bare bety trykkverdier kan registreres. De demping kan minimeres ved å bruke den største nålen mulig, men nålen må passe innenfor LV lumen for ulike alderen mus. Fordi det diastoliske trykket kan tilnærmes som null, kan de...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagens / utstyr </td><td> Firma </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Høy oppløsning ultralydsystem </td><td> Visualsonics </td><td> Vevo 770 </td><td> Eller annen egnet ultralydsystem </td></tr><tr><td> Høyfrekvente ultralyd prober </td><td> Visualsonics </td><td> 708 og 707B </td><td></td></tr><tr><td> Imaging plattformen og injeksjon arm </td><td> Visualsonics </td><td> Imaging Station 2 </td><td> Med EKG og temperatur tilbakemeldinger kontroll av plattformen </td></tr><tr><td> Trykkgiver </td><td> AD Instrumenter </td><td> MLT 844 </td><td></td></tr><tr><td> Bridge forsterker </td><td> AD Instrumenter </td><td> ML221 </td><td></td></tr><tr><td> Datainnsamling system </td&gt; <td> AD Instrumenter </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> Dataregistrering programvare </td><td> AD Instrumenter </td><td> LabChart </td><td></td></tr><tr><td> Ring stå og klemme </td><td> Ulike leverandører </td><td></td><td> Å holde trykktransduser under målingene </td></tr><tr><td> 3-veis stoppekraner med Luer tilkoblinger, mannlig lås </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-02 </td><td></td></tr><tr><td> 1/16 &quot;ID Tygon Tubing </td><td> Cole Parmer </td><td> 06408 </td><td></td></tr><tr><td> Mannlige og kvinnelige luers w / 1/16 &quot;slange Barb </td><td> Cole Parmer </td><td> 45510-50 45510-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 &quot;rør med mannlig og kvinnelig luer i hver ende </td><td> Cole Parmer </td><td> 30600-60 </td><td></td></tr><tr><td> 3 og 10 ml sprøyter </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 og 25G nåler </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> 1.5 inches i lengde </td></tr><tr><td> Big Ben manometer </td><td> Riester </td><td> 1456-100 </td><td></td></tr><tr><td> Saline </td><td> Ulike leverandører </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Heparin </td><td> Ulike leverandører </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ultralyd gel </td><td> Parker </td><td> Aquasonic 100 </td><td></td></tr><tr><td> Hair remover lotion </td><td> Nair </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice

Blodtrykket øker vesentlig i løpet av embryo-og postnatal utvikling i virveldyr. I mus, er blodstrømmen første påvisbare rundt embryonale dag (E) 8.5 1. Systolisk venstre ventrikkel (LV) trykket er 2 mmHg ved E9.5 og 11 mmHg ved E14.5 to. På disse mid-embryonale stadier, er det LV godt synlig gjennom brystveggen for invasive trykkmålinger fordi ribbeina og huden ikke er fullt utviklet. Mellom E14.5 og fødsel (ca. E21) imaging metoder må brukes for å vise LV. Etter fødselen, mener arterielle trykket øker fra 30 - 70 mmHg fra postnatal dag (P) 2 - 35 3. Beyond P20, kan arterietrykk måles med solid-state kateter (dvs. Millar eller Scisense). Før P20, disse katetrene er for store for å utvikle mus arterier og arterietrykk må måles med custom trukket plast katetre knyttet til væskefylte trykk transdusere 3 eller glass mikropipetter ATTverket til servo null press svingere 4. Vårt siste arbeid har vist at den største økningen i blodtrykk oppstår i løpet av slutten fosterstadiet til tidlig postnatal periode i mus 5-7. Denne store økningen i blodtrykk kan påvirke glatt muskelcelle (SMC) fenotypen i utviklingsland arterier og utløse viktige mechanotransduction hendelser. I menneskelig sykdom, hvor de mekaniske egenskapene til utviklingsland arterier blir kompromittert av feil i ekstracellulære matrix proteiner (dvs. Marfans syndrom 8 og Supravalvular Aortastenose 9) de raske endringer i blodtrykk i løpet av denne perioden kan bidra til sykdom fenotype og alvorlighetsgrad gjennom endringer i mechanotransduction signaler. Derfor er det viktig å kunne måle blodtrykk forandringer i løpet av slutten av embryonale og neonatale perioder i musemodeller av sykdom hos mennesker. Vi beskriver en metode for måling LV press i slutten avembryonale (E18) og tidlige postnatale (P1 - 20) mus. En nål festet til en væskefylt trykkgiver settes inn i LV i henhold til ultralyd veiledning. Care er tatt for å opprettholde normal hjertefunksjon under forsøksprotokoll, spesielt for de embryonale mus. Representative data presenteres og begrensninger av protokollen blir diskutert.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Måling venstre ventrikkel trykk (LV) i embryonale og neonatal mus er beskrevet. Trykket måles ved å sette inn en nål tilkoblet en væskefylt svingeren i LV i henhold til ultralyd veiledning. Det må tas for å opprettholde normal hjertefunksjon under forsøksprotokoll.

Måling Venstre ventrikkels Trykket i sen Embryonale og Neonatal Mus

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Måling og modellering kontraktile Tørking i Human stratum corneum

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Ammonia Synthesis at Low Pressure

Ammoniakk syntese med lavt trykk

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomisk realistisk Neonatal hjertet modell for bruk i Neonatal pasienten simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

Musemodell av trykket magesår etter ryggmargsskade

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Måling av Global mobilnettet matrise Metalloproteinase og metabolsk aktivitet i 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Metoder for in vivo biomekaniske testing på brachialis plexus i nyfødt grisunger

Neonatal brachial plexus palsy (NBPP) is a stretch injury that occurs during the birthing process in nerve complexes located in the neck and shoulder ...

Optical Imaging of Isolated Murine Ventricular Myocytes

Optisk avbildning av isolert murine ventrikkel myocytter

The ability to isolate adult cardiac myocytes has permitted researchers to study a variety of cardiac pathologies at the single cell level. While advances ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Mønstre geometrien av menneskelige embryonale Stamcelle kolonier på kompatible underlag for å kontrollere vevs nivået mekanikk

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Evaluation of Left Ventricular Structure and Function using 3D Echocardiography

Evaluering av venstre ventrikulær struktur og funksjon ved hjelp av 3D-ekkokardiografi

Three-dimensional (3D) quantification of the left ventricle (LV) provides significant added value in terms of diagnostic accuracy and precise risk ...

Measuring 3D In-vivo Shoulder Kinematics using Biplanar Videoradiography

Måling av 3D In-vivo skulderkinematikk ved hjelp av biplanet videoradiografi

The shoulder is one of the human body's most complex joint systems, with motion occurring through the coordinated actions of four individual joints, ...