Name: measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Detta arbete finansieras delvis av NIH bidrag HL087653 och HL105314. Några av de metoder som utvecklades i laboratoriet av Dr Robert Mecham vid Washington University School of Medicine.

1. Ultraljud och tryck systemet <ol><li> Starta ultraljudssystemet enligt tillverkarens instruktioner (VEVO 770, Visualsonics). Fyll lämplig sond (ålder E18 - P7 = modell 708, ålder&gt; P7 = modell 707B) med destillerat vatten och ansluta till ultraljud systemet. Placera sonden i den justerbara monter på den ungefärliga riktningen krävs för att få en LV länge axeln vy för en mus monterad på imaging-plattformen så att LV spetsen pekar mot injektionen armen. </li><li> Trycket systemet består av en vätskefy...

<ol>
	<li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper.">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li><li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos.">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li><li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth.">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li><li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice.">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li><li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice.">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice.">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li><li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice.">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li><li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease.">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li><li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease,+supravalvular+aortic+stenosis.">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li><li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice.">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li><li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+tools+for+the+developmental+biologist:+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development.">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li></ol>

Protokollet som presenteras här ger en metod för mätning av LV-tryck i sen embryo och tidiga neonatala möss. Den största begränsningen av detta protokoll är den temporala upplösningen av trycket systemet. Trycksignalen dämpas när den färdas från LV genom nålen till omvandlaren, och endast betyda tryckvärden kan registreras. Dämpningen kan minimeras genom att använda största nålen möjligt, men nålen måste passa inom LV lumen för olika åldrade möss. Eftersom det diastoliska trycket kan approximeras...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namn på reagens / utrustning </td><td> Företaget </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Hög upplösning ultraljudssystemet </td><td> Visualsonics </td><td> VEVO 770 </td><td> Eller annan lämplig ultraljudssystemet </td></tr><tr><td> Högfrekventa ultraljudsprober </td><td> Visualsonics </td><td> 708 och 707B </td><td></td></tr><tr><td> Imaging plattform och injektion arm </td><td> Visualsonics </td><td> Imaging Station 2 </td><td> Med EKG och temperatur återkopplingsstyrning av plattform </td></tr><tr><td> Tryckomvandlare </td><td> AD Instruments </td><td> MLT 844 </td><td></td></tr><tr><td> Bridge förstärkare </td><td> AD Instruments </td><td> ML221 </td><td></td></tr><tr><td> Datainsamlingssystem </td&gt; <td> AD Instruments </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> Data inspelningsprogram </td><td> AD Instruments </td><td> LabChart </td><td></td></tr><tr><td> Ringen stå och klämma </td><td> Olika leverantörer </td><td></td><td> Att hålla tryckomvandlare under mätningar </td></tr><tr><td> 3-vägs kranar med luer anslutningar, män lås </td><td> Cole Parmer </td><td> 30.600-02 </td><td></td></tr><tr><td> 1/16 &quot;ID Tygon-slang </td><td> Cole Parmer </td><td> 06.408 </td><td></td></tr><tr><td> Manliga och kvinnliga luers w / 1/16 &quot;slanganslutning </td><td> Cole Parmer </td><td> 45510-50 45510-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 &quot;rör med han-och hon-Luer vid varje ände </td><td> Cole Parmer </td><td> 30.600-60 </td><td></td></tr><tr><td> 3 och 10 ml-sprutor </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 och 25G nålar </td><td> BD Biosciences </td><td></td><td> 1.5 inches i längd </td></tr><tr><td> Big Ben manometer </td><td> Riester </td><td> 1456-100 </td><td></td></tr><tr><td> Saltlösning </td><td> Olika leverantörer </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Heparin </td><td> Olika leverantörer </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ultraljudsgel </td><td> Parker </td><td> Aquasonic 100 </td><td></td></tr><tr><td> Hårborttagare lotion </td><td> Nair </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

measuring left ventricular pressure in late embryonic and neonatal mice

Blodtrycket ökar kraftigt under embryonal och postnatal utveckling i ryggradsdjur. I mus är blodflödet första detekterbara runt embryonal dag (E) 8,5 1. Systoliskt vänster kammare (LV) tryck är 2 mmHg vid E9.5 och 11 mmHg vid E14.5 2. Vid dessa i mitten av embryonala stadier, är LV tydligt genom bröstväggen för invasiva tryckmätningar eftersom revbenen och huden inte är fullt utvecklade. Mellan E14.5 och förlossning (ca E21) avbildande metoder måste användas för att visa LV. Efter födseln, arteriella trycket ökar från 30 - 70 mmHg från postnatal dag (P) 2 - 35 3. Utöver P20 kan artärtryck mätas med solid-state katetrar (dvs. Millar och Scisense). Innan P20, dessa katetrar är för stora för att utveckla mus artärer och arteriellt tryck måste mätas med anpassade dras plastkatetrar knutna till vätskefyllda tryckgivare 3 eller glas mikropipetter AtTvärkte att servo null tryckomvandlare 4. Vårt senaste arbete har visat att den största ökningen av blodtrycket sker under slutet av embryonal till tidig postnatal period i möss 5-7. Denna stora ökning av blodtrycket kan påverka glatta muskelceller (SMC) fenotyp i utvecklingsländer artärer och utlösa viktiga mechanotransduction händelser. I human sjukdom, där de mekaniska egenskaperna hos utvecklingsländernas artärer äventyras av brister i extracellulära matrix proteiner (dvs. Marfans syndrom 8 och supravalvulär Aortastenos 9) de snabba förändringarna i blodtrycket under denna period kan bidra till sjukdom fenotyp och svårighetsgrad genom förändringar i mechanotransduction signaler. Därför är det viktigt att kunna mäta förändringar i blodtrycket under sena embryonala och neonatala perioder musmodeller för mänsklig sjukdom. Vi beskriver ett förfarande för mätning LV tryck i slutetembryonal (E18) och tidiga postnatala (P1 - 20) möss. En nål fäst till en vätskefylld tryckomvandlare är införd i LV enligt ultraljud. Man ser till att upprätthålla en normal hjärtfunktion under det experimentella protokollet, särskilt för de embryonala möss. Representativa data presenteras och begränsningar av protokollet diskuteras.

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice at JoVE.com

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

Mätning vänster kammare tryck (LV) i embryonala och neonatala möss beskrivs. Trycket mäts genom att sätta in en nål ansluten till en vätskefylld omvandlaren in i LV enligt ultraljud. Försiktighet måste vidtas för att upprätthålla en normal hjärtfunktion under det experimentella protokollet.

Mätning vänster kammare Tryck i Sena embryonala och neonatala möss

Blood pressure increases significantly during embryonic and postnatal development in vertebrate animals. In the mouse, blood flow is first detectable ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Mätning och modellering kontraktila Torkning i Human hornlagret

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Ammonia Synthesis at Low Pressure

Ammoniak syntes vid lågt tryck

Ammonia can be synthesized at low pressure by the use of an ammonia selective absorbent. The process can be driven with wind energy, available locally in ...

Anatomically Realistic Neonatal Heart Model for Use in Neonatal Patient Simulators

Anatomiskt realistiska Neonatal hjärtat modell för användning i Neonatal patienten simulatorer

Neonatal patient simulators (NPS) are artificial patient surrogates used in the context of medical simulation training. Neonatologists and nursing staff ...

Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury

Musmodell av trycksår efter ryggmärgsskada

Pressure ulcers (PUs) are common debilitating complications of traumatic spinal cord injury (SCI) and tend to occur in soft tissues around bony ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Mätning av globala Cellular Matrix metalloproteinas och metabolisk aktivitet i 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Methods for In Vivo Biomechanical Testing on Brachial Plexus in Neonatal Piglets

Metoder för in vivo biomekaniska tester på brachial plexus i neonatal smågrisar

Neonatal brachial plexus palsy (NBPP) is a stretch injury that occurs during the birthing process in nerve complexes located in the neck and shoulder ...

Optical Imaging of Isolated Murine Ventricular Myocytes

Optisk avbildning av isolerade murina ventrikulär myocyter

The ability to isolate adult cardiac myocytes has permitted researchers to study a variety of cardiac pathologies at the single cell level. While advances ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Mönster av geometrin hos humana embryonala stamcells kolonier på överensstämmande substrat för att kontrollera vävnadsnivå mekanik

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...

Evaluation of Left Ventricular Structure and Function using 3D Echocardiography

Utvärdering av vänster ventrikulär struktur och funktion med hjälp av 3D-ekokardiografi

Three-dimensional (3D) quantification of the left ventricle (LV) provides significant added value in terms of diagnostic accuracy and precise risk ...

Measuring 3D In-vivo Shoulder Kinematics using Biplanar Videoradiography

Mätning av 3D In-vivo Shoulder Kinemas med biplanar videoradiografi

The shoulder is one of the human body's most complex joint systems, with motion occurring through the coordinated actions of four individual joints, ...