Name: endothelial cell co-culture mediates maturation of human embryonic stem cell to pancreatic insulin producing cells in a directed differentiation approach
Uploaded: 2012-03-27T13:00:00
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우리는 116,520 DP2와 ORAU 랄프 포웨 주니어 학부 향상 수상 NIH 새로운 혁신 상을로부터 지원을 인정합니다.

1. 세포 유지 보수 <ol><li> 미디어가 매일 변화와 H1의 hESC (WiCell)는 mTeSR1 미디어 hESC 자격 matrigel 코팅 우물을 유지했다. F12을 : 웰스는 DMEM의 25 ML에 hESC의 matrigel 300 μl를 추가하여 준비 묽은 matrigel 솔루션에 의해 덮여 있었다. 이 matrigel 솔루션 1 ML은 여섯 잘 접시의 각 음에 추가하거나, 400 μl는 12 잘 접시의 각도에 추가하고 실온에서 1 시간 코트에 허용되었다. 전지는 기계들이 1 일, 직경 1.5mm에 도?...

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	<li>De Vos, J., Assou, S., Tondeur, S., Dijon, M., Hamamah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Les+cellules+souches+embryonnaires+humaines+:+de+la+transgression+de+l'embryon+humain+&#225;+la+m&#233;decine+r&#233;g&#233;n&#233;ratrice+de+demain.">Les cellules souches embryonnaires humaines : de la transgression de l'embryon humain &#225; la m&#233;decine r&#233;g&#233;n&#233;ratrice de demain.</a> Gyn&#233;cologie Obst&#233;trique &#38; Fertilit&#233;. 37, 620-626 (2009).</li><li>Murtaugh, L. C., Melton, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genes,+Signals,+and+Lineages+in+Pancreas+Development.">Genes, Signals, and Lineages in Pancreas Development.</a> Annual Review of Cell and Developmental Biology. 19, 71-89 (2003).</li><li>Kubo, A., Shinozaki, K., Shannon, J. M., Kouskoff, V., Kennedy, M., Woo, S., Fehling, H. J., Keller, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+definitive+endoderm+from+embryonic+stem+cells+in+culture.">Development of definitive endoderm from embryonic stem cells in culture.</a> Development. 131, 1651-1662 (2004).</li><li>D'Amour, K. A., Bang, A. G., Eliazer, S., Kelly, O. G., Agulnick, A. D., Smart, N. G., Moorman, M. A., Kroon, E., Carpenter, M. K., Baetge, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+pancreatic+hormone-expressing+endocrine+cells+from+human+embryonic+stem+cells.">Production of pancreatic hormone-expressing endocrine cells from human embryonic stem cells.</a> Nat. Biotech. 24, 1392-1401 (2006).</li><li>Zhang, D., Jiang, W., Liu, M., Sui, X., Yin, X., Chen, S., Shi, Y., Deng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+differentiation+of+human+ES+cells+and+iPS+cells+into+mature+pancreatic+insulin-producing+cells.">Highly efficient differentiation of human ES cells and iPS cells into mature pancreatic insulin-producing cells.</a> Cell Res. 19, 429-438 (2009).</li><li>Basma, H., Soto-Guti&#233;rrez, A., Yannam, G. R., Liu, L., Ito, R., Yamamoto, T., Ellis, E., Carson, S. D., Sato, S., Chen, Y., Muirhead, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+and+Transplantation+of+Human+Embryonic+Stem+Cell-Derived+Hepatocytes.">Differentiation and Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Hepatocytes.</a> Gastroenterology. 136, 990-999 (2009).</li><li>Phillips, B. W., Hentze, H., Rust, W. L., Chen, Q. -. P., Chipperfield, H., Tan, E. -. K., Abraham, S., Sadasivam, A., Soong, P. L., Wang, S. T., Lim, R., Sun, W., Colman, A., Dunn, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+Differentiation+of+Human+Embryonic+Stem+Cells+into+the+Pancreatic+Endocrine+Lineage.">Directed Differentiation of Human Embryonic Stem Cells into the Pancreatic Endocrine Lineage.</a> Stem Cells and Development. 16, 561-578 (2007).</li><li>Kim, S. K., Melton, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreas+development+is+promoted+by+cyclopamine,+a+Hedgehog+signaling+inhibitor.">Pancreas development is promoted by cyclopamine, a Hedgehog signaling inhibitor.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 95, 13036-13041 (1998).</li><li>Docherty, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+and+development+of+the+islets+of+Langerhans:+implications+for+the+treatment+of+diabetes+mellitus.">Growth and development of the islets of Langerhans: implications for the treatment of diabetes mellitus.</a> Current Opinion in Pharmacology. 1, 641-649 (2001).</li><li>Nikolova, G., Jabs, N., Konstantinova, I., Domogatskaya, A., Tryggvason, K., Sorokin, L., F&#228;ssler, R., Gu, G., Gerber, H. -. P., Ferrara, N., Melton, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Vascular+Basement+Membrane:+A+Niche+for+Insulin+Gene+Expression+and+[beta]&gt;+Cell+Proliferation.">The Vascular Basement Membrane: A Niche for Insulin Gene Expression and [beta]&gt; Cell Proliferation.</a> Developmental Cell. 10, 397-405 (2006).</li><li>Yoshitomi, H., Zaret, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cell+interactions+initiate+dorsal+pancreas+development+by+selectively+inducing+the+transcription+factor+Ptf1a.">Endothelial cell interactions initiate dorsal pancreas development by selectively inducing the transcription factor Ptf1a.</a> Development. 131, 807-817 (2004).</li><li>Osafune, K., Caron, L., Borowiak, M., Martinez, R. J., Fitz-Gerald, C. S., Sato, Y., Cowan, C. A., Chien, K. R., Melton, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marked+differences+in+differentiation+propensity+among+human+embryonic+stem+cell+lines.">Marked differences in differentiation propensity among human embryonic stem cell lines.</a> Nat. Biotech. 26, 313-315 (2008).</li><li>Banerjee, I., Sharma, N., Yarmush, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+co-culture+on+pancreatic+differentiation+of+embryonic+stem+cells.">Impact of co-culture on pancreatic differentiation of embryonic stem cells.</a> J. Tissue Eng. Regen. Med. 5, 313-323 (2010).</li></ol>

췌장 개발 과정, 차별 췌장 세포는 대동맥의 내피 세포와 근접 거리에 있습니다, 또한, 췌장 islets은 혈당과 섬 호르몬의 신속한 교환을 촉진하기 위해 밀도가 높은 vascularized 있습니다. 이러한 사실을 감안할 때, 그것은 내피 세포가 췌장 organogenesis의 과정에서 중요한 역할을하는 놀라운 일이 아닙니다. 췌장 개발하는 동안 내피 세포의 중요성이 점점 더 높이 평가되는 반면 배아 세포의 시험 관...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 농도 </td></tr><tr><td> mTeSR1 (보충제 포함) </td><td> 셀 기술을 막기 </td><td> 5850 </td><td></td></tr><tr><td> hESC 자격 matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354,277 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM : F12 </td><td> Invitrogen </td><td> 11330-032 </td><td></td></tr><tr><td> MCDB-131 </td><td> Invitrogen </td><td> 10372019 </td><td></td></tr><tr><td> MCDB-131 (완료) </td><td> VEC 기술 </td><td> MCDB-131 </td><td></td></tr><tr><td> B27 보충 </td><td> Invitrogen </td><td> 17504044 </td><td></td></tr><tr><td> 를 Activin </td><td> R &amp; D </td><td> <a href="http://www.rndsystems.com/pdf/338-ac.pdf">338-AC</a> </td><td> 100ng/ml </td></tr><tr><td> Wortmannin </td><td> Invitrogen </td><td> W3144 </td><td> 1μM </td></tr><tr><td> KAAD-Cyclopamie </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> C4116 </td><td> 0.2μM </td></tr><tr><td> 모든 거래 Retinoic 산성 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> R2625 </td><td> 2μM </td></tr><tr><td> DAPT </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> D5942 </td><td> 30μM </td></tr><tr><td> 니코틴 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> N0636 </td><td> 10 MM </td></tr><tr><td> 나트륨 Selenite </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> S5261 </td><td> 30 NM </td></tr><tr><td> 인슐린 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> I1882 </td><td> 25 μg / ML </td></tr><tr><td> 트랜스페린 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> T8158 </td><td> 50 μg / ML </td></tr><tr><td> EGF </td><td> R &amp; D </td><td> <a href="http://www.rndsystems.com/pdf/236-eg.pdf">236-EG</a> </td><td> 10ng/ml </td></tr><tr><td> EndoGro </td><td> VEC 기술 </td><td> ENDOGRO </td><td> 10mg </td></tr><tr><td> 헤파린 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> H3149 </td><td> 90μg/ml </td></tr><tr><td> 하이드로코티손 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> H0888 </td><td> 1μg/ml </td></tr><tr><td> NucleoSpin RNA II </td><td> Macherey Nagel </td><td> 740,955 </td><td></td></tr><tr><td> ImProm II의 역방향 전송 시스템 </td><td> Promega </td><td> A3800 </td><td></td></tr><tr><td> 똑똑 II SYBR 녹색 QPCR 마스터 믹스 </td><td> Straragene </td><td> 600,548 </td><td></td></tr><tr><td> Sox17 염소 polyclonal IgG </td><td> 산타 크루즈 </td><td> SC-17355 </td><td> 500분의 1 </td></tr><tr><td> PDX1 염소 polyclonal IgG </td><td> 산타 크루즈 </td><td> SC-14662 </td><td> 500분의 1 </td></tr><tr><td> polyclonal C-펩타이드의 토끼 </td><td> 세포 시그널링 </td><td> 4593 </td><td> 500분의 1 </td></tr><tr><td> 알렉사 형석 488 당나귀 안티 - 토끼 IgG </td><td> Invitrogen </td><td> -21206 </td><td> 1,000분의 1 </td></tr><tr><td> 알렉사 형석 647 당나귀 안티 산양 IgG </td><td> Invitrogen </td><td> -21447 </td><td> 1,000분의 1 </td></tr></tbody></table> 표 2. 시약 및 키트.

endothelial cell co-culture mediates maturation of human embryonic stem cell to pancreatic insulin producing cells in a directed differentiation approach

배아 줄기 세포 (ESC)는 두 가지 주요 특징이있다 : 그들은 무기한 따라서 여러 lineages으로 차별화하는 잠재력을 가지고, undifferentiated 상태로 체외에서 증식들이 pluripotent가 될 수 있습니다. 이러한 속성은 세포 기반 치료 및 재생 치료에 응용 1 ESCs 매우 매력적합니다. 그러나 실현하기위한 잠재력을 위해 전지 발굴 작업입니다 성숙하고 기능적인 phenotypes,로 구분해야합니다. 세포 분화를 유도에서 유망한 접근 방법은 밀접하게 관련 체외 환경에서 organogenesis의 경로를 모방하는 것입니다. 췌장 개발은 간, 췌장 등 여러 장기,로 개발할 수 endoderm,로 시작하는 구체적인 단계 2에서 발생하는 것으로 알려져 있습니다. Endoderm 유도는 여러 가지 성장 요인 4-7과 함께 3 Activin의 추가를 통해 결절 통로의 변조에 의해 달성될 수 </&gt;를 한모금. 최종 endoderm 세포 그러면 cyclopamine 8 이외에 의해 체외로 얻을 수있는 소닉 고슴도치 억제의 억제에 의해 췌장 약속을 받고있다. 췌장 성숙은 노치 신호 전달의 억제 등 여러 병렬 이벤트에 의해 매개되며 췌장 progenitors의 집합 3-dimentional 클러스터로, vascularization의 유도, 몇 이름을 지정합니다. 지금까지 가장 성공적인 ESC 파생 췌장 전구 세포의 체외의 성숙에 의해 DAPT의 보완 9 신호를 노치의 억제를 통해 달성되었습니다. 성공 있지만, 기능 제한이있는 성숙한 표현형의 낮은 수확량이 발생합니다. 덜 연구 영역은 점점 더 인 - 생체내 췌장 섬의 성숙 10,11에 중요한 기여 요인으로 평가되고 췌장 성숙에 신호 내피 세포의 효과입니다. 현재의 연구는 endothel 같은 효과를 탐구ial 세포는 섬 같은 세포를 생산하는 인슐린으로 인간의 Esc를 파생 췌장 전구 세포의 성숙에 신호. 우리가 인간 ESCs 처음 PI3K 경로의 억제와 함께를 Activin하여 endoderm 향해 유도되는 다단 감독 차별 프로토콜을보고합니다. endoderm 세포의 췌장 사양 Retinoic 산성의 추가에 의해 retinoid 유도와 함께 Cyclopamine에 의한 음파 고슴도치 신호의 억제에 의해 이루어진다. 성숙의 마지막 단계는 공동 문화 구성에 의해 달성될 내피 세포 신호에 의해 유도된다. 여러 내피 세포가 공동 문화에 테스트한 동안 본 우리는 주로 분석의 용이성을 위해, 쥐 심장 microvascular 내피 세포 (RHMVEC)와 함께 우리의 데이터를 제시.

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Endothelial Cell Co-culture Mediates Maturation of Human Embryonic Stem Cell to Pancreatic Insulin Producing Cells in a Directed Differentiation Approach

현재의 연구는 인간 배아 줄기 세포를 췌장 분화를 유도으로 이동 차별화 접근 방식에 대해 설명합니다. 큰 의미 중 인슐린을 표현하는 세포로 췌장 progenitors을 얻은​​ 인간 배아 줄기 세포를 찾는 것이 내피 세포 공동 배양 mediates의 성숙입니다.

인간 배아의 내피 세포 공동 배양 Mediates의 성숙은 감독 차별화 접근법에서 췌장 인슐린 생산 세포로 세포를 줄기

Embryonic stem cells (ESC) have two main characteristics: they can be indefinitely propagated in vitro in an undifferentiated state and they are ...

Research

JoVE Journal

Biology

Derivation of Hematopoietic Stem Cells from Murine Embryonic Stem Cells

Murine 배아 줄기 세포로부터 조혈 줄기 세포의 유도

A stem cell is defined as a cell with the capacity to both self-renew and generate multiple differentiated progeny.  Embryonic stem cells (ESC) are ...

연구

생물학

Derivation of Human Embryonic Stem Cells by Immunosurgery

Immunosurgery에 의해 인간 배아 줄기 세포의 유도

The ability of human embryonic stem cells to self-renew and differentiate into all cell types of 
the body suggests that they hold great promise for both ...

Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia

Hindlimb 국소 빈혈의 치료를위한 배아 줄기 세포 유래 내피 세포

Peripheral arterial disease (PAD) results from narrowing of the peripheral arteries that supply oxygenated blood and nutrients to the legs and feet, This ...

Isolation and Large Scale Expansion of Adult Human Endothelial Colony Forming Progenitor Cells

분리 및 성인 인간 내피 콜로니 형성 전구 세포의 대규모 확장

This paper introduces a novel recovery strategy for endothelial colony forming progenitor cells (ECFCs) from heparinized but otherwise unmanipulated adult ...

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

인간 탯줄의 분리 및 동물 혈청 무료 확장 Mesenchymal Stromal 세포 (MSCS)와 내피 콜로니 형성 전구 세포 (ECFCs)을 유래

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Video Bioinformatics Analysis of Human Embryonic Stem Cell Colony Growth

비디오 생물 정보학 인간의 배아 줄기 세포 콜로니 성장 분석

Because video data are complex and are comprised of many images, mining information from video material is difficult to do without the aid of computer ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

Oligodendrocyte 엽 성의 전구 물질로 배아 줄기 세포의 분화

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Fate Mapping of Human Embryonic Stem Cells by Teratoma Formation

기형 종의 형성에 의해 인간 배아 줄기 세포의 운명 매핑

Human embryonic stem cells (hESCs) have an unlimited capacity for self-renewal, and the ability to differentiate into cells derived from all three ...

Efficient Derivation of Human Cardiac Precursors and Cardiomyocytes from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

작은 분자와 유도 Pluripotent 인간 배아 줄기 세포로부터 인간 심장 엽 성의 전구 물질과 Cardiomyocytes의 효율 유도

To date, the lack of a suitable human cardiac cell source has been the major setback in regenerating the human myocardium, either by cell-based ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

GFP와 Retroviral 벡터를 사용하여 유도 Pluripotent 줄기 세포 (iPSCs)로 인간 체세포를 프로그래밍

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...