Name: radioactive in situ hybridization for detecting diverse gene expression patterns in tissue
Uploaded: 2012-04-27T13:00:00
Duration: 17 min 38 s
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저자는 수년 동안 프로토콜을 향상 모든 자비스 실험실 구성원을 감사드립니다.

<ol>
	<li>Clayton, D. F., Huecas, M. E., Sinclair-Thompson, E. Y., Nastiuk, K. L., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probes+for+rare+mRNAs+reveal+distributed+cell+subsets+in+canary+brain.">Probes for rare mRNAs reveal distributed cell subsets in canary brain.</a> Neuron. 1, 249-261 (1988).</li><li>Wada, K., Sakaguchi, H., Jarvis, E. D., Hagiwara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression+of+glutamate+receptors+in+avian+neural+pathways+for+learned+vocalization.">Differential expression of glutamate receptors in avian neural pathways for learned vocalization.</a> J. Comp. Neurol. 476, 44-64 (2004).</li><li>Haesler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FoxP2+expression+in+avian+vocal+learners+and+non-learners.">FoxP2 expression in avian vocal learners and non-learners.</a> J. Neurosci. 24, 3164-3175 (2004).</li><li>Jarvis, E. D., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor-driven+gene+expression.">Motor-driven gene expression.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 4097-4102 (1997).</li><li>Holzenberger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expression+of+insulin-like+growth+factor+II+in+the+songbird+brain.">Selective expression of insulin-like growth factor II in the songbird brain.</a> J. Neurosci. 17, 6974-6987 (1997).</li><li>Mahmood, R., Mason, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-situ+hybridization+of+radioactive+riboprobes+to+RNA+in+tissue+sections.">In-situ hybridization of radioactive riboprobes to RNA in tissue sections.</a> Methods Mol. Biol. 461, 675-686 (2008).</li><li>Wilkinson, D. G., Nieto, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+messenger+RNA+by+in+situ+hybridization+to+tissue+sections+and+whole+mounts.">Detection of messenger RNA by in situ hybridization to tissue sections and whole mounts.</a> Methods Enzymol. 225, 361-373 (1993).</li><li>Acloque, H., Wilkinson, D. G., Nieto, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+analysis+of+chick+embryos+in+whole-mount+and+tissue+sections.">In situ hybridization analysis of chick embryos in whole-mount and tissue sections.</a> Methods Cell Biol. 87, 169-185 (2008).</li><li>Moorman, A. F., Houweling, A. C., de Boer, P. A., Christoffels, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitive+nonradioactive+detection+of+mRNA+in+tissue+sections:+novel+application+of+the+whole-mount+in+situ+hybridization+protocol.">Sensitive nonradioactive detection of mRNA in tissue sections: novel application of the whole-mount in situ hybridization protocol.</a> J. Histochem. Cytochem. 49, 1-8 (2001).</li><li>Horita, H., Wada, K., Rivas, M. V., Hara, E., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dusp1+immediate+early+gene+is+regulated+by+natural+stimuli+predominantly+in+sensory+input+neurons.">The dusp1 immediate early gene is regulated by natural stimuli predominantly in sensory input neurons.</a> J. Comp. Neurol. 518, 2873-2901 (2010).</li><li>Braissant, O., Wahli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+in+situ+hybridization+protocol+using+non-radioactively+labelled+probes+to+detect+abundant+and+rare+mRNAs+on+tissue+sections.">A simplified in situ hybridization protocol using non-radioactively labelled probes to detect abundant and rare mRNAs on tissue sections.</a> Biochemica. 1, 10-16 (1998).</li><li>Kubikova, L., Wada, K., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+receptors+in+a+songbird+brain.">Dopamine receptors in a songbird brain.</a> J. Comp. Neurol. 518, 741-769 (2010).</li><li>Wada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+neuroethological+approach+for+identifying+and+characterizing+a+cascade+of+behaviorally+regulated+genes.">A molecular neuroethological approach for identifying and characterizing a cascade of behaviorally regulated genes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 15212-15217 (2006).</li><li>Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avian+brains+and+a+new+understanding+of+vertebrate+brain+evolution.">Avian brains and a new understanding of vertebrate brain evolution.</a> Nat. Rev. Neurosci. 6, 151-159 (2005).</li><li>Hoke, K. L., Ryan, M. J., Wilczynski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+cues+shift+functional+connectivity+in+the+hypothalamus.">Social cues shift functional connectivity in the hypothalamus.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 10712-10717 (2005).</li><li>Burmeister, S. S., Jarvis, E. D., Fernald, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+behavioral+and+genomic+responses+to+social+opportunity.">Rapid behavioral and genomic responses to social opportunity.</a> PLoS. Biol. 3, e363 (2005).</li><li>Jarvis, E. D., Schwabl, H., Ribeiro, S., Mello, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+gene+regulation+by+territorial+singing+behavior+in+freely+ranging+songbirds.">Brain gene regulation by territorial singing behavior in freely ranging songbirds.</a> Neuroreport. 8, 2073-2077 (1997).</li><li>Jarvis, E. D., Scharff, C., Grossman, M. R., Ramos, J. A., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=For+whom+the+bird+sings:+context-dependent+gene+expression.">For whom the bird sings: context-dependent gene expression.</a> Neuron. 21, 775-788 (1998).</li><li>Feenders, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mapping+of+movement-associated+areas+in+the+avian+brain:+a+motor+theory+for+vocal+learning+origin.">Molecular mapping of movement-associated areas in the avian brain: a motor theory for vocal learning origin.</a> PLoS One. 3, e1768 (2008).</li><li>Chen, C. C., Fernald, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributions+of+two+gonadotropin-releasing+hormone+receptor+types+in+a+cichlid+fish+suggest+functional+specialization.">Distributions of two gonadotropin-releasing hormone receptor types in a cichlid fish suggest functional specialization.</a> J. Comp. Neurol. 495, 314-323 (2006).</li></ol>

우리는 공개 할게 없다.

mRNA의 표현의 원위치 하이브리드화의 방사성 널리 지방 조직 조직, 세포 유형과 뇌의 기능적 활동 2-5,10,12-14 공부를 포함하여 여러 용도에 사용됩니다. 나중에 사용할 누구의 mRNA 표현 뇌의 신경 활동이 증가, 종종 불리는 활동 종속적인 유전자 또는 즉각 조기 유전자에 따라 좌우 유전자에 있습니다. hatchlings / neonates, 청소년을 포함한 여러 연령대, 여러 조직에서, 뇌, 피부 및 근육을 포함하여, 이러한 용도로, 우리의 방법은 포유류 (예 : 인간), 생선 및 양서류, 조류를 포함한 여러 종류에 걸쳐 적용되었습니다 , 성인, 그리고 이곳 전체 배아 부분에 2,3,5,15-17. 우리의 프로토콜의 특징은 다음과 같습니다 : (1) 그것은 해부 학적 특이성과 양적 특이성 사이의 균형을 생산하고 있습니다. x-선 필름에서 유전자 발현을 계량하기 위해, 우리는 이미지의 디지털 사진 (. 예 : 그림 1A 및 1B)를 받아, 검사하고 사진에게 사용관심 지역에서 픽셀 밀도를 측정하고 조직 외부 필름에 배경 수준을 빼야하지만 여전히 유리 슬라이드 2,4에서하는 toshop (어도비) 히스토그램 기능. 세포 수준에서 표현을 계량하기 위해, 우리는 높은 배율 (; 그림 4 40-100X)에서 세포를 통해 실버 곡물의 이미지 가져가라. 우리는 다음 유리 슬라이드에 세포가없이 유사한 영역에서 배경 카운트를 뺍니다, 이미지에 은색 알갱이의 수를 계산하기 위해 NIH에서 웨인 Rasband하여 이미지 J의 문턱 및 측정 기능을 이용, 세포의 숫자로 나누면 셀 당 표현. 4,18의 값 (2) 그것은 동시에 100-200 슬라이드 처리를 허용, 미네랄 오일 목욕 만든 긴밀한 coverslip 인감으로 인해 상대적으로 높은 처리량이 될 수 있습니다. 구하는 표준의 원위치 하이브리드화 방법 parafilm, 매니큐어, 그리고 슬라이드는 공간을 많이 차지 다른 방법과 슬라이드를 봉인하는 데 오래 걸립니다 (3) 그것은 아주이다Dextran 황산과 하이브리드화 버퍼 2,13의 Denhardt의 솔루션으로 인해 낮은 풍요의 성적에 대한 민감한 (4) darkfield의 이미징 접근법은 4,5 해부 현미경에 darkfield 조명 아래에서 사진을 찍고으로 인해 높은 명암 이미지를 얻을. 또한,이 같은 활동에 의존 유전자 발현에서와 같이 유전자 발현의 작은 변화의 민감한 검출 19 특정 행동의 인식 및 생산 기간 동안 활성화된 특정 뇌 영역을 식별할 수 있습니다. 비 방사성 프로토콜에 상대적으로 제한 후자는 세포 해상도와 세포 내에서 mRNA의 위치에 명확하다고하며, 유제와 협력하는 것은 조작과 빛을 매우 민감합니다. 이 같은 조직 10,17,20에서 하나 이상의 유전자의 mRNA 발현에 레이블을 위해 현장 하이브리드화 이러한 비 방사성 등 다른 방식으로 우리의 방법을 결합하는 것이 가능합니다. 그것은 immunocytochemistry와 조합하여 사용할 수 있습니다위해서는 동일한 시료에 RNA와 단백질 표현 모두에 레이블을 특정 세포 유형 10와 mRNA가 공동 집중하다. 이러한 이중 라벨 실험에 필요한 프로토콜 수정은 인용된 참고 문헌에 설명되어 있습니다. 요약하면, 우리의 접근 방법은 지역 조직, 조직 기능적 활동 및 유전자 기능을 이해하기 위해 타이밍과 유전자 발현의 세포 위치의 이해를 용이하게합니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 아세트산 무수물 </td><td> VWR </td><td> MK242002 </td><td></td></tr><tr><td> 클로로포름 </td><td> VWR </td><td> BDH1109 </td><td></td></tr><tr><td> Cresyl 보라색 아세트산 </td><td> 시그마 </td><td> C5042 </td><td></td></tr><tr><td> 그라 이오 스탯 </td><td> 써모 과학 </td><td> Microm HM550 </td><td></td></tr><tr><td> Deionized 포름 아미드 </td><td> 시그마 </td><td> F9037 </td><td></td></tr><tr><td> DTT </td><td> Promega </td><td> P1171 </td><td> 100mM </td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> 시그마 </td><td> ED </td><td></td></tr><tr><td> 금형을 포함 </td><td> VWR </td><td> 15160-215 </td><td></td></tr><tr><td> 피셔 브랜드 Superfrost 플러스 슬라이드 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 22-034-979 </TD&gt; <td></td></tr><tr><td> 포름 알데히드 </td><td> VWR </td><td> BDH0506-4LP </td><td></td></tr><tr><td> 포름 아미드 </td><td> 시그마 </td><td> F7508 </td><td></td></tr><tr><td> GENECLEAN 키트 </td><td> Q-바이오 유전자 </td><td> 1001-200 </td><td></td></tr><tr><td> 코닥 BioMax MR 필름 </td><td> 시그마 </td><td> Z350370 </td><td></td></tr><tr><td> 코닥 NTB 에멀젼 </td><td> Carestream 건강 </td><td> 8,895,666 </td><td></td></tr><tr><td> 코닥 프로 페셔널 개발자 D19 </td><td> 코닥 </td><td> 1,462,593 </td><td></td></tr><tr><td> 코닥 전문 해결사 </td><td> 코닥 </td><td> 1,971,746 </td><td></td></tr><tr><td> β-메르 캅 토 에탄올 </td><td> Calbiochem </td><td> 444,203 </td><td></td></tr><tr><td> 미네랄 오일 </td><td> VWR </td><td> IC15169491 </td><td></td></tr><tr><td> NaOH </td><td> VWR </td><td> SX0600-1 </td><td></td></tr><tr><td> Paraformaldehyde </td><td> 시그마 </td><td> 76,240 </td><td></td></tr><tr><td> 폴리 </td><td> Invitrogen </td><td> POLYA.GF </td><td></td></tr><tr><td> rATP </td><td> Promega </td><td> P1132 </td><td> 10mM </td></tr><tr><td> rCTP </td><td> Promega </td><td> P1142 </td><td> 10mM </td></tr><tr><td> rGTP </td><td> Promega </td><td> P1152 </td><td> 10mM </td></tr><tr><td> RNasin </td><td> Promega </td><td> N2111 </td><td> 40Units/μl </td></tr><tr><td> S 35 UTP </td><td> PerkinElmer </td><td> NEG039C001MC </td><td></td></tr><tr><td> 안전 해결 솔루션 </td><td> 안전 연구 제품 국제 해결 </td><td> 111,177 </td><td></td></tr><tr><td> 아세트산 나트륨 </td><td> 시그마 </td><td> S7899 </td><td> 3M </td></tr><tr><td> 나트륨 인산염 이염 </td><td> 시그마 </td><td> S3264 </td><td></td></tr><tr><td> 나트륨 인산염 일염기의 </td><td> 시그마 </td><td> S3139 </td><td></td></tr><tr><td> SP6RNA 중합 효소의 </td><td> Promega </td><td> P1085 </td><td></td></tr><tr><td> 금속 선반을 염색법 </td><td> 전자 현미경 과학 </td><td> 70312-54 </td><td></td></tr><tr><td> T7 RNA 중합 효소의 </td><td> Promega </td><td> P2075 </td><td></td></tr><tr><td> 조직 - 테크 10월 </td><td> 사쿠라 </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> 5 배 전사 버퍼 </td><td> Promega </td><td> P1181 </td><td></td></tr><tr><td> Triethanolamine </td><td> VWR </td><td> IC15216391 </td><td></td></tr><tr><td> 트리스-HCL (1 M, 산도 8.0) </td><td> VWR </td><td> 101449-446 </td><td></td></tr><tr><td> tRNA </td><td> 로슈 </td><td> 10109509001 </td><td></td></tr></tbody></table> 솔루션 : <ol><li> riboprobes로 만들기위한 시약 : 1.5 μl의 DNA 템플릿 (0.2-0.3 μg / μl), 5 배 최적화된 전송 버퍼의 2 μl, 100mM DTT 1 μl (Promega에서 중합 효소와 함께 제공, 믹스잘 상온에서), RNasin의 0.3 μl (40 대 / μl), AGC ribonucleotide 믹스 솔루션, S 35 UTP 3.5 μl, 1 μl RNA 중합 효소의 1.5 μl. nuclease없는 물을 갖춘 10 μl까지 와요. </li><li> AGC의 ribonucleotide 믹스 솔루션 : 10mM ATP, GTP와 함께 CTP의 동일한 금액을 섞는다. </li><li> 40 μl RNase와 DNase 무료 물, 3M의 아세트산 나트륨 및 100 % EtOH 125 μl의 5 μl : 무료 S 35 UTP를 제거하는 EtOH 침전에 대한 아세트산 나트륨 용액. </li><li> 하이브리드화 버퍼 (10ml 주식) : 100 % deionized 포름 아미드, 5M NaCl 600 μl, 1M 트리스-HCL (산도가 = 8.0)의 5 ML, 0.5M EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) 240 μl (산도 = 8.0), 100x Denhart의 솔루션 100 μl, 1M DTT, 20mg/ml tRNA, 20 밀리그램 / ML 폴리 125 μl, 그리고 나트륨 Dextran 황산의 1g 250 μl의 100 μl. 10 ML에 대한 전체 볼륨을 가지고 DEPC-처리된 물을 추가합니다. 모든 나트륨 dextran 황산이 녹아 때까지 55 ° C에서 부화 후 적극적으로 흔들. 에 하이브리드화 버퍼를 저장~ 6 개월 좋다 -20 ° C,. </li><li> 4 % paraformaldehyde 용액을 버퍼 : paraformaldehyde를 위해 지정, 50 ~ 열이 ° C 따뜻한 접시에 감동하면서 플라스크에 760 ML 증류수에 paraformaldehyde 40 G를 추가합니다. paraformaldehyde를 해산하기 위해 10N NaOH 320 μl를 추가합니다. (~ 10 분) 용해 후, 10X PBS 100 ML을 추가하고 1리터 때까지 증류수로 볼륨을 제기하셨습니다. 저어과 paraformaldehyde가 해소되기 전까지 솔루션을 가열. 산도는 7.4이어야합니다. </li><li> 아세틸화 버퍼 : triethanolamine의 13.6 ML 플러스 증류수 1 리터에 아세트산 무수물의 2.52 ML. </li><li> 20x SSPE 솔루션 : 3M NaCl, 200 MM 아뇨 2 PO 4-H 2 O 및 증류수 200 밀리미터 EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산). 10N NaOH로 pH를 7.4에 대한 해결 방법을 조정합니다. </li><li> 10X PBS 버퍼 : NaCl의 80g, KCl의 2.0g, 나 2 HPO 4 14.4g과 KH 2 2.4g 증류수에 PO 4. 산도 7.0에 대한 솔루션을 조정하고 1 라이트로 전체 볼륨을 가지고R. </li><li> 두번째 세차 솔루션 : 0.1 % β-메르 캅 토 에탄올과 2X SSPE에서 50 %의 포름 아미드 </li><li> Cresyl 바이올렛 아세트산 용액 : 수돗물의 3% cresyl 보라색 아세트산 (증류수 좋은 염색법을 방지), 실온에서 플라스크에 감동과 함께 하룻밤 해산. 1mm 워트 먼지 필터 종이와 Buchner 퍼널을 통해 진공 흡입으로 필터링합니다. </li></ol>

radioactive in situ hybridization for detecting diverse gene expression patterns in tissue

유전자가 표현되는 타이밍, 레벨, 세포 현지화 및 세포 유형을 안다는 건 유전자의 기능에 대한 우리의 이해에 기여한다. 이러한 기능을 각각의 세포 내에서 mRNAs에 원위치 하이브리드화에서 함께 수행할 수 있습니다. 여기 클레이튼 외. (1988) 1, 특히 성인 척추 두뇌 2-5 위해, 여러 해 동안 우리가 실험실에서 성공적으로 작동되었습니다에서 수정된 원위치 하이브리드화 방법에 방사성을 제시. 대상 시퀀스로 긴 보완 RNA (cRNA) 프로브는 낮은 풍요의 성적 6,7의 검출을 허용합니다. cRNA 프로브로 방사성 세포핵의 설립이 낮은 풍부한 성적 증명서 및 정량 분석​​에 대한 검출 감도를 허용 역시 가벼운 민감한 X 선 필름이나 조직을 통해 코팅 에멀젼에 의해. 이러한 검색 방법은 타겟 유전자 표현의 장기 기록을 제공합니다. 비 방사능 탐사 필로폰과 비교이러한 쫄지마-라벨 등 ODS, 방사성 프로브 하이브 리다이 제이션 방식은 낮은 풍요로움의 성적 증명서를 감지할 수 HRP-항체 및 / 또는 TSA 키트를 사용하여 여러 증폭 단계를 필요로하지 않습니다. 따라서이 방법은 정량 분석​​을위한 신호 강도와 타겟 mRNA 금액 사이의 선형 관계를 제공합니다. 그것은 동시에 100-200 슬라이드를 처리하실 수 있습니다. 그것은 배아의 여러 발달 단계를 위해 잘 작동합니다. 배아 세포가 어려운 조직 섹션에있는 세포 집단 사이의 경계를 확인하고, 세포 사이에 덜 결합으로, 어른 조직보다 더 깨지기 때문에 유전자 발현의 대부분은 발달 연구 부분에 전체 배아 및 비 - 방사성 방법 8,9를 사용합니다. 반대로 감성의 더 큰 범위로 인해 우리의 방사성 접근은 쉽게 인구 사이의 경계를 확인하고, 조직 지역 간의 유전자 발현의 해상도에서 높은 콘트라스트를 얻을 수 있습니다. 이 방법을 사용하여 연구자가 속한새로 확인된 유전자의 가능한 의미, 그리고 더 관심이 유전자의 기능을 예측했다.

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Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

이 프로토콜이 성공적으로 양적 척추 종의 여러 조직 유형의 수준과 mRNA의 표현의 공간적 패턴을 감지하는 데 사용됩니다. 방법은 낮은 풍요로움의 성적 증명서를 감지하고 동시에 슬라이드 수백 처리 가능합니다. 우리는 예제와 같은 조류 배아 뇌의 형성의 표현 프로파일을 사용하여이 프로토콜을 제시한다.

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