Name: radioactive in situ hybridization for detecting diverse gene expression patterns in tissue
Uploaded: 2012-04-27T13:00:00
Duration: 17 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить всех Джарвис лаборатории членов, которые улучшили протокол на протяжении многих лет.

<ol>
	<li>Clayton, D. F., Huecas, M. E., Sinclair-Thompson, E. Y., Nastiuk, K. L., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probes+for+rare+mRNAs+reveal+distributed+cell+subsets+in+canary+brain.">Probes for rare mRNAs reveal distributed cell subsets in canary brain.</a> Neuron. 1, 249-261 (1988).</li><li>Wada, K., Sakaguchi, H., Jarvis, E. D., Hagiwara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression+of+glutamate+receptors+in+avian+neural+pathways+for+learned+vocalization.">Differential expression of glutamate receptors in avian neural pathways for learned vocalization.</a> J. Comp. Neurol. 476, 44-64 (2004).</li><li>Haesler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FoxP2+expression+in+avian+vocal+learners+and+non-learners.">FoxP2 expression in avian vocal learners and non-learners.</a> J. Neurosci. 24, 3164-3175 (2004).</li><li>Jarvis, E. D., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor-driven+gene+expression.">Motor-driven gene expression.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 4097-4102 (1997).</li><li>Holzenberger, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expression+of+insulin-like+growth+factor+II+in+the+songbird+brain.">Selective expression of insulin-like growth factor II in the songbird brain.</a> J. Neurosci. 17, 6974-6987 (1997).</li><li>Mahmood, R., Mason, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-situ+hybridization+of+radioactive+riboprobes+to+RNA+in+tissue+sections.">In-situ hybridization of radioactive riboprobes to RNA in tissue sections.</a> Methods Mol. Biol. 461, 675-686 (2008).</li><li>Wilkinson, D. G., Nieto, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+messenger+RNA+by+in+situ+hybridization+to+tissue+sections+and+whole+mounts.">Detection of messenger RNA by in situ hybridization to tissue sections and whole mounts.</a> Methods Enzymol. 225, 361-373 (1993).</li><li>Acloque, H., Wilkinson, D. G., Nieto, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+analysis+of+chick+embryos+in+whole-mount+and+tissue+sections.">In situ hybridization analysis of chick embryos in whole-mount and tissue sections.</a> Methods Cell Biol. 87, 169-185 (2008).</li><li>Moorman, A. F., Houweling, A. C., de Boer, P. A., Christoffels, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitive+nonradioactive+detection+of+mRNA+in+tissue+sections:+novel+application+of+the+whole-mount+in+situ+hybridization+protocol.">Sensitive nonradioactive detection of mRNA in tissue sections: novel application of the whole-mount in situ hybridization protocol.</a> J. Histochem. Cytochem. 49, 1-8 (2001).</li><li>Horita, H., Wada, K., Rivas, M. V., Hara, E., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dusp1+immediate+early+gene+is+regulated+by+natural+stimuli+predominantly+in+sensory+input+neurons.">The dusp1 immediate early gene is regulated by natural stimuli predominantly in sensory input neurons.</a> J. Comp. Neurol. 518, 2873-2901 (2010).</li><li>Braissant, O., Wahli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+in+situ+hybridization+protocol+using+non-radioactively+labelled+probes+to+detect+abundant+and+rare+mRNAs+on+tissue+sections.">A simplified in situ hybridization protocol using non-radioactively labelled probes to detect abundant and rare mRNAs on tissue sections.</a> Biochemica. 1, 10-16 (1998).</li><li>Kubikova, L., Wada, K., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+receptors+in+a+songbird+brain.">Dopamine receptors in a songbird brain.</a> J. Comp. Neurol. 518, 741-769 (2010).</li><li>Wada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+neuroethological+approach+for+identifying+and+characterizing+a+cascade+of+behaviorally+regulated+genes.">A molecular neuroethological approach for identifying and characterizing a cascade of behaviorally regulated genes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 15212-15217 (2006).</li><li>Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avian+brains+and+a+new+understanding+of+vertebrate+brain+evolution.">Avian brains and a new understanding of vertebrate brain evolution.</a> Nat. Rev. Neurosci. 6, 151-159 (2005).</li><li>Hoke, K. L., Ryan, M. J., Wilczynski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+cues+shift+functional+connectivity+in+the+hypothalamus.">Social cues shift functional connectivity in the hypothalamus.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 10712-10717 (2005).</li><li>Burmeister, S. S., Jarvis, E. D., Fernald, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+behavioral+and+genomic+responses+to+social+opportunity.">Rapid behavioral and genomic responses to social opportunity.</a> PLoS. Biol. 3, e363 (2005).</li><li>Jarvis, E. D., Schwabl, H., Ribeiro, S., Mello, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+gene+regulation+by+territorial+singing+behavior+in+freely+ranging+songbirds.">Brain gene regulation by territorial singing behavior in freely ranging songbirds.</a> Neuroreport. 8, 2073-2077 (1997).</li><li>Jarvis, E. D., Scharff, C., Grossman, M. R., Ramos, J. A., Nottebohm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=For+whom+the+bird+sings:+context-dependent+gene+expression.">For whom the bird sings: context-dependent gene expression.</a> Neuron. 21, 775-788 (1998).</li><li>Feenders, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mapping+of+movement-associated+areas+in+the+avian+brain:+a+motor+theory+for+vocal+learning+origin.">Molecular mapping of movement-associated areas in the avian brain: a motor theory for vocal learning origin.</a> PLoS One. 3, e1768 (2008).</li><li>Chen, C. C., Fernald, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributions+of+two+gonadotropin-releasing+hormone+receptor+types+in+a+cichlid+fish+suggest+functional+specialization.">Distributions of two gonadotropin-releasing hormone receptor types in a cichlid fish suggest functional specialization.</a> J. Comp. Neurol. 495, 314-323 (2006).</li></ol>

Нам нечего раскрывать.

Радиоактивные в гибридизация мРНК выражение широко используется для различных целей, в том числе для изучения региональной организации ткани, типах клеток и мозга функциональной активности 2-5,10,12-14. Последующего использования на гены, экспрессия мРНК в мозге зависит от повышенной нервной деятельности, которую часто называют деятельность зависит от генов или немедленного ранних генов. С учетом этих целей, наш метод был применен на несколько видов, в том числе птиц, млекопитающих (например, человека), рыб и земноводных, во многих тканях, включая мозг, кожу и мышцы, и несколько веков, в том числе птенцов / новорожденных, подростков , взрослые, а вот в целые разделы эмбриона 2,3,5,15-17. Особенность нашего протокола, включают: (1) дает баланс между анатомическим специфику и количественные специфику. Для количественной оценки экспрессии генов на рентгеновской пленке, мы принимаем цифровые фотографии изображений (например: Рис. 1А и 1В), используйте Photoshop (Adobe) функция гистограммы для измерения плотности пикселей в регионах, представляющих интерес и вычитание фона на пленке вне ткани, но по-прежнему на стекле 2,4. Для количественного выражения на клеточном уровне, мы принимаем изображения зерен серебра на клетки при большом увеличении (40-100X; рис. 4). Затем мы используем порог и меру функции изображения J Уэйн Rasband в NIH для подсчета количества зерен серебра в образ, вычесть из счета фона в аналогичной области без клеток на стекле, разделите на количество клеток, чтобы получить значение выражения в клетке. 4,18 (2) может быть относительно высокой пропускной способностью, что позволяет обработку 100-200 слайдов одновременно, из-за уплотнения покровное созданы ванны минеральные масла. Стандартный на месте методы гибридизации занимает больше времени, чтобы запечатать слайды с парафильмом, лак для ногтей и других средств, где слайды занимают много места (3) Вполнечувствительна к низким стенограммы из-за обилия декстран сульфата и решение Денхардта в гибридизации буфер 2,13; (4) изображение подход в темном поле дает изображения с высоким контрастом благодаря съемке с освещением темного поля на вскрытии 4,5 микроскопом. Кроме того, это позволяет чувствительны обнаружения небольших изменений в экспрессии генов, таких, как зависимого от активности экспрессии генов для выявления конкретных областей мозга активируется при восприятии и производстве конкретного поведения 19. Ограничения относительно нерадиоактивных протоколов, что последние являются более ясной в клеточном разрешение и расположение мРНК в клетке, и работа с эмульсией очень чувствительны к манипуляциям и света. Можно объединить наш метод с другими методами, такими как нерадиоактивных в гибридизация маркировать экспрессию мРНК более чем одного гена в той же ткани 10,17,20. Это может быть объединена с иммуноцитохимиипометить как РНК и белка выражение того же образца, с тем чтобы совместно локализации мРНК с определенными типами клеток 10. Протокол изменения, необходимые для такой двойной маркировки эксперименты описаны в цитированной литературы. Таким образом, наш подход облегчает понимание о сроках и месте сотовый экспрессии генов для того, чтобы понимание региона организацию, функциональную активность тканей и функции гена.

<table border="1"><tbody><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td> Ангидрида уксусной кислоты </td><td> VWR </td><td> MK242002 </td><td></td></tr><tr><td> Хлороформ </td><td> VWR </td><td> BDH1109 </td><td></td></tr><tr><td> Крезиловый ацетат фиолетовый </td><td> Сигма </td><td> C5042 </td><td></td></tr><tr><td> Криостат </td><td> Thermo Scientific </td><td> Microm HM550 </td><td></td></tr><tr><td> Деионизированная формамида </td><td> Сигма </td><td> F9037 </td><td></td></tr><tr><td> DVB-T </td><td> Promega </td><td> P1171 </td><td> 100mM </td></tr><tr><td> ЭДТА </td><td> Сигма </td><td> ED </td><td></td></tr><tr><td> Вложение формы </td><td> VWR </td><td> 15160-215 </td><td></td></tr><tr><td> Фишер бренда SuperFrost плюс слайд </td><td> Fisher Scientific </td><td> 22-034-979 </TD&gt; <td></td></tr><tr><td> Формальдегид </td><td> VWR </td><td> BDH0506-4LP </td><td></td></tr><tr><td> Формамид </td><td> Сигма </td><td> F7508 </td><td></td></tr><tr><td> Geneclean комплект </td><td> Q-Био ген </td><td> 1001-200 </td><td></td></tr><tr><td> Kodak BioMax MR фильм </td><td> Сигма </td><td> Z350370 </td><td></td></tr><tr><td> Kodak НТБ эмульсии </td><td> Carestream здравоохранения </td><td> 8895666 </td><td></td></tr><tr><td> Kodak Professional Разработчик D19 </td><td> Кодак </td><td> 1462593 </td><td></td></tr><tr><td> Kodak профессионального Fixer </td><td> Кодак </td><td> 1971746 </td><td></td></tr><tr><td> β-меркаптоэтанол </td><td> Calbiochem </td><td> 444203 </td><td></td></tr><tr><td> Минеральное масло </td><td> VWR </td><td> IC15169491 </td><td></td></tr><tr><td> NaOH </td><td> VWR </td><td> SX0600-1 </td><td></td></tr><tr><td> Параформальдегид </td><td> Сигма </td><td> 76240 </td><td></td></tr><tr><td> Поли </td><td> Invitrogen </td><td> POLYA.GF </td><td></td></tr><tr><td> RATP </td><td> Promega </td><td> P1132 </td><td> 10 мМ </td></tr><tr><td> rCTP </td><td> Promega </td><td> P1142 </td><td> 10 мМ </td></tr><tr><td> rGTP </td><td> Promega </td><td> P1152 </td><td> 10 мМ </td></tr><tr><td> RNasin </td><td> Promega </td><td> N2111 </td><td> 40Units/μl </td></tr><tr><td> S 35 UTP </td><td> PerkinElmer </td><td> NEG039C001MC </td><td></td></tr><tr><td> Безопасность-Решите решение </td><td> Безопасность Решите исследований Products International </td><td> 111177 </td><td></td></tr><tr><td> Ацетат натрия </td><td> Сигма </td><td> S7899 </td><td> 3М </td></tr><tr><td> Фосфат натрия двузамещенный </td><td> Сигма </td><td> S3264 </td><td></td></tr><tr><td> Фосфат натрия однозамещенный </td><td> Сигма </td><td> S3139 </td><td></td></tr><tr><td> SP6РНК-полимеразы </td><td> Promega </td><td> P1085 </td><td></td></tr><tr><td> Окрашивание металла стойки </td><td> Электронная микроскопия наук </td><td> 70312-54 </td><td></td></tr><tr><td> Т7 РНК-полимеразы </td><td> Promega </td><td> P2075 </td><td></td></tr><tr><td> Ткань-Tek октября </td><td> Сакура </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> 5x буфера Транскрипция </td><td> Promega </td><td> P1181 </td><td></td></tr><tr><td> Триэтаноламин </td><td> VWR </td><td> IC15216391 </td><td></td></tr><tr><td> Трис-HCl (1 М, рН 8,0) </td><td> VWR </td><td> 101449-446 </td><td></td></tr><tr><td> тРНК </td><td> Roche </td><td> 10109509001 </td><td></td></tr></tbody></table> Решения: <ol><li> Реагенты для изготовления riboprobes: 1,5 мкл ДНК-матрицы (0,2-0,3 мкг / мкл), 2 мкл 5x оптимизированный буфер транскрипцию, 1 мкл 100 мМ DTT (поставляется с полимеразной от Promega, смесьи при комнатной температуре), 0,3 мкл RNasin (40 ед / мкл), 1,5 мкл AGC рибонуклеотид решение смеси, 3,5 мкл S 35 UTP, и 1 мкл РНК-полимеразы. Подогреть до 10 мкл с нуклеазы без воды. </li><li> AGC рибонуклеотид смесь решение: смешать равное количество 10 мМ АТФ, ГТФ и CTP вместе. </li><li> Ацетат натрия раствор этанола для осаждения для удаления свободного S 35 UTP: 40 мкл РНКазы и ДНКазы свободной воды, 5 мкл 3М ацетата натрия, и 125 мкл 100% этанола. </li><li> Гибридизация буфера (10 мл сырье): 5 мл на 100% деионизированной формамида, 600 мкл 5М NaCl, 1М Трис-HCl (рН = 8,0), 240 мкл 0,5 М ЭДТА (рН = 8,0), 100 мкл раствора 100x Denhart, в 100 мкл 1М DTT, 250 мкл 20mg/ml тРНК, 125 мкл 20 мг / мл поли, и 1 г сульфата натрия декстрана. Добавить DEPC обработанных водой довести объем до 10 мл. Встряхивать и инкубировать при 55 ° С, пока все декстран сульфата натрия растворяется. Хранить гибридизации буфер-20 ° C, что является благом для ~ 6 месяцев. </li><li> 4% буферном параформальдегид решение: добавить 40 г параформальдегида в 760 мл дистиллированной воды в колбе, предназначенных для параформальдегида, тепла до 50 ° C на горячей плите при перемешивании. Добавить 320 мкл 10N NaOH, чтобы помочь растворить параформальдегида. После растворения (~ 10 мин), добавить 100 мл 10х PBS, и довести объем до дистиллированной водой до 1 л. Перемешать и нагревать раствор до параформальдегид растворяется. РН должен быть 7,4. </li><li> Ацетилирование буфера: 13,6 мл триэтаноламина плюс 2,52 мл уксусного ангидрида в 1 л дистиллированной воды. </li><li> 20x ГНПП решение: 3M NaCl, 200 мМ NaH 2 PO 4-H 2 O и 200 мМ ЭДТА в дистиллированной воде. Настройте решение рН 7,4 с 10N NaOH. </li><li> 10х буфера PBS: 80 г NaCl, 2,0 г хлорида калия, 14.4g из Na 2 HPO 4, 2,4 из KH 2 PO 4 в дистиллированной воде. Настройте решение рН 7,0 и довести общий объем до 1 облегченныйр. </li><li> Второй промывочного раствора: 0,1% β-меркаптоэтанол и 50% формамида в 2x ГНПП </li><li> Крезиловый раствор ацетата фиолетовый: 3% крезиловый ацетат фиолетовый в водопроводной воде (дистиллированная вода предотвращает хорошее окрашивание), растворенные ночь при перемешивании в колбе при комнатной температуре. Фильтр с вакуумного отсоса через 1 мм Whatman фильтровальной бумагой и воронкой Бюхнера. </li></ol>

radioactive in situ hybridization for detecting diverse gene expression patterns in tissue

Знание сроков, уровня, сотовые локализации и типа клеток, что ген экспрессируется в способствует более глубокому пониманию функции гена. Каждая из этих функций может быть достигнуто с в гибридизация с мРНК в клетках. Здесь мы представляем на месте радиоактивного метода гибридизации изменение от Clayton и соавт. (1988) 1, который успешно работает в нашей лаборатории в течение многих лет, особенно для взрослых позвоночных мозг 2-5. Долго комплементарной РНК (кРНК) зондов для целевой последовательности позволяет для обнаружения низких стенограммы изобилие 6,7. Включение радиоактивных нуклеотидов в кРНК зондов позволяет дальнейшее чувствительность обнаружения низкого стенограммы изобилия и количественного анализа, либо светочувствительных рентгеновской пленки или эмульсии покрытие на ткани. Эти методы обнаружения обеспечивают долгосрочную целевую запись экспрессии генов. По сравнению с нерадиоактивных зонд методамиОРВ, таких как DIG-маркировки, радиоактивный метод гибридизации зонда не требует несколько этапов усиления использования HRP-антитела и / или TSA набор для обнаружения низких стенограммы изобилия. Таким образом, этот метод обеспечивает линейную зависимость между интенсивностью сигнала и количество целевых мРНК для количественного анализа. Это позволяет обрабатывать 100-200 слайдов одновременно. Он хорошо работает на разных стадиях развития эмбрионов. Большинство развития изучении экспрессии генов использовать все эмбрионы и нерадиоактивных подходы 8,9, отчасти потому, что эмбриональная ткань более хрупкая, чем у взрослых ткани, с меньшим количеством сцепление между клетками, что делает его трудно увидеть границу между клеточной популяции с срезах тканей. В отличие от наших радиоактивных подход, в связи с большим диапазоном чувствительности, может получить более высокую контрастность в резолюции экспрессии гена ткань между регионами, что делает его легче видеть границы между популяциями. Используя этот метод, исследователи смогли выявитьвозможные значения вновь выявленных генов, и в дальнейшем прогнозировать функции гена.

Watch this Scientific Journal Video about Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue at JoVE.com

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Этот протокол успешно используется для количественного определения уровня и пространственные закономерности экспрессии мРНК в разных типах тканей через видов позвоночных животных. Этот метод может обнаружить низкий стенограммы изобилия и позволяет обрабатывать сотни слайдов одновременно. Мы представляем этот протокол, используя выражение профилирования птичьего эмбрионального формирование мозга в качестве примера.

Радиоактивный На месте Гибридизации для обнаружения разнообразных шаблонов экспрессии генов в ткани

Knowing the timing, level, cellular localization, and cell type that a gene is expressed in contributes to our understanding of the function of the gene. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

Подготовка первичных гемопоэтических клеточных культур из костного мозга мышей для Электропорация

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

Non-radioactive in situ Hybridization Protocol Applicable for Norway Spruce and a Range of Plant Species

Нерадиоактивные На месте Гибридизация Протокола, применяемыми для Норвегии ель и диапазон видов растений

The high-throughput expression analysis technologies available today give scientists an overflow of expression profiles but their resolution in terms of ...

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

Использование автоматизированных счетчиков сотовый для упрощения исследования экспрессии генов: миРНК Нокдаун ИЛ-4 зависимости экспрессии генов в клетках Namalwa

The use of siRNA mediated gene knockdown is continuing to be an important tool in studies of gene expression.  siRNA studies are being conducted not only ...

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

В пробирке восстановление активность Т. castaneum Теломераза

Efforts to isolate the catalytic subunit of telomerase, TERT, in sufficient quantities for structural studies, have been met with limited success for more ...

A High Throughput in situ Hybridization Method to Characterize mRNA Expression Patterns in the Fetal Mouse Lower Urogenital Tract

A High Throughput in situ Hybridization Method to Characterize mRNA Expression Patterns in the Fetal Mouse Lower Urogenital Tract

Высокая пропускная способность На месте Гибридизация метод для характеристики Шаблоны экспрессии мРНК в фетальных Мышь Нижняя урогенитального тракта

Development of the lower urogenital tract (LUT) is an intricate process. This complexity is evidenced during formation of the prostate from the fetal male ...

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

Анализ одноклеточных транскрипции гена РНК-флуоресцентный<em&gt; В Situ</em&gt; Гибридизация (FISH)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Визуализации и анализа молекул мРНК с помощью флуоресцентной<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в<em&gt; Saccharomyces CEREVISIAE</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

High Resolution Whole Mount In Situ Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

High Resolution Whole Mount In Situ Hybridization within Zebrafish Embryos to Study Gene Expression and Function

Высокое разрешение Всего горе<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в Эмбрионы рыбок данио изучить экспрессию генов и функции

This article focuses on whole-mount in situ hybridization (WISH) of zebrafish embryos. The WISH technology facilitates the assessment of gene expression ...

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

МикроРНК<em&gt; В месте</em&gt; Гибридизация на формалин ткани почки

In this article we describe a method for colorimetric detection of miRNA in the kidney through in situ hybridization with digoxigenin tagged microRNA ...

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

Измерение скорости обмена веществ в<em&gt; Дрозофилы</em&gt; С помощью респирометрии

Metabolic disorders are a frequent problem affecting human health. Therefore, understanding the mechanisms that regulate metabolism is a crucial ...