Name: a simplified technique for in situ excision of cornea and evisceration of retinal tissue from human ocular globe
Uploaded: 2012-06-12T13:00:00
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이 작품은 Regione 베네토 (Ricerca Sanitaria Finalizzata n.292/2008 및 Ricerca Sanitaria Finalizzata 2009)의 보조금을 통해 부분적으로 지원되었다. 저자는 인간의 안구 글로브의 사용에 관한 2,010분의 2,009 요약 데이터에 대한 박사 C. Griffoni 감사드립니다.

1. 각막의 현장 절단에서 안구 글로브에서 <ol><li> 약 15 분 사용 전 판상 공기 흐름 캐비닛 전환합니다. 70% 이소 프로필 알콜을 사용하여 층류 후드를 청소합니다. 이러한 수술 모자와 마스크 같은 개인 보호복 쓰세요. 손과 팔뚝을 스크럽하고 멸균 수건을 사용하여 건조. 무균 기술을 사용하여 무균 장갑과 가운이나 소매를 착용하십시오. </li><li> 무균 멸균 악기 트레이를 배치하여 무균 필?...

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	<li>Fay, A., Goldman, L., Ausiello, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diseases+of+the+visual+system.">Diseases of the visual system.</a> Cecil Medicine. , (2007).</li><li>Parekh, M., Megaw, R., Ray-Chaudhuri, A., Ahmad, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patents+in+Limbal+Stem+Cell+Biology.">Patents in Limbal Stem Cell Biology.</a> Recent patents on Regenerative Medicine. 1, 207-212 (2011).</li><li>Pharm, U. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Eye:+The+physiology+of+human+perception.">The Eye: The physiology of human perception.</a> Britannica educational publishing. 36, 19-27 (2011).</li><li>Lang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ophthalmology: A pocket textbook atlas. , 115-117 .</li><li>Liesbeth, P. e. l. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+Culture:+The+method+of+choice+for+preservation+of+human+donor+corneas.">Organ Culture: The method of choice for preservation of human donor corneas.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 523-525 (1997).</li><li>Meyer, J. S., Howden, S. E., Wallace, K. A., Verhoeven, A. D., Wright, L. S., Capowski, E. E., Pinilla, I., Martin, J. M., Tian, S., Stewart, R., Pattnaik, B., Thomson, J., Gamm, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+vesicle-like+structures+derived+from+human+pluripotent+stem+cells+facilitate+a+customized+approach+to+retinal+disease+treatment.">Optic vesicle-like structures derived from human pluripotent stem cells facilitate a customized approach to retinal disease treatment.</a> Stem Cells. , (2011).</li><li>Trifunovic, D., Karali, M., Camposampiero, D., Ponzin, D., Banfi, S., Marigo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-resolution+RNA+expression+atlas+of+retinitis+pigmentosa+genes+in+human+and+mouse+retinas.">A high-resolution RNA expression atlas of retinitis pigmentosa genes in human and mouse retinas.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2330-2336 (2008).</li><li>Mora, P., Montanini, L., Ferrari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Retina. 30, 1555 (2010).</li><li>Claybon, A., Bishop, A. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+a+Mouse+Eye+for+a+Whole+Mount+of+the+Retinal+Pigment+Epithelium.">Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium.</a> J. Vis. Exp. (48), e2563 (2011).</li><li>Skeie, J. M., Tsang, S. H., Mahajan, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evisceration+of+Mouse+Vitreous+and+Retina+for+Proteomic+Analyses.">Evisceration of Mouse Vitreous and Retina for Proteomic Analyses.</a> J. Vis. Exp. (50), e2795 (2011).</li></ol>

, 정확한 절단 및 각막 및 망막 조직의 적절한 보존 모두 같은 내피 손상 또는 descemet의 폴드의 높은 숫자 등 사소한 결함이 그래프트 온도 변경 반면 각막의 장애 또는 mishandling 것은 망막 조직의 무결성을 손상 수로 이어질 수있는 등의 중요합니다. 본 논문의 목적은 각막 및 망막 조직이 이식 또는 연구 목적으로 사용을 침해할 수있는 손해 또는 변경을 유도하지 않고, 최적의 격리 수있는 방법을...

각막 및 망막의 절단을위한 재료. <table border="1"><tbody><tr><td> 제품 설명 </td><td> 치수 </td><td> 회사 소개 / 연구원 </td></tr><tr><td> 경비가 삼엄 메스 일회용 </td><td> 블레이드 사이즈 15 </td><td> 스완 - 모튼 </td></tr><tr><td> 멸균 붕대 </td><td> 5cm는 X 5cm, 8 층, 5 개 </td><td> Artsana </td></tr><tr><td> 멸균 일회용 의료 타올 </td><td> 35 X 50cm </td><td> U.Jet </td></tr><tr><td> 멸균 가위 </td><td> 블레이드 24mm / 전체 길이. 무딘, 95mm 곡선 </td><td> e.janach </td></tr><tr><td> 멸균 포셉 </td><td> 스테인레스 스틸 -100 mm 11 X 2는 0.70 mm 치아에 의해 지배 </td><td> e.janach </td></tr><tr><td> 각막 발톱 - 일회용 의료 기기 </td><td></td><td> NIIOS (Hippocratech) </td></tr&gt; <tr><td></td><td> 준비 </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> [10X] 900 ML D / W (증류수) 100 ML PBS </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td></tr><tr><td> NA-thiosulphate </td><td> PBS [1X] 1 리터 1 GM 나 - thiosulphate </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td></tr><tr><td> I-PVP </td><td> 1리터 D / W 5 GM I-PVP </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td></tr></tbody></table> 표 2. 테이블은 각막 및 망막의 절단과 그들로부터받은 회사를 위해 사용되는 재료에 대해 설명합니다. 저장 매체에 대한 자료 (2000 ML). <table border="1"><tbody><tr><td> 구성 요소 </td><td> 공급 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 집중 </td><td> 양 </td></tr><tr><td> MEM(1X) 액체 </td><td> Invitrogen </td><td> 32360-034 </td><td></td><td> 1900 ML </td></tr><tr><td> 나트륨 pyruvate </td><td> Invitrogen </td><td> 11360-039 </td><td> 1mM (10ml / L) </td><td> 20 ML </td></tr><tr><td> L-글루타민 </td><td> Invitrogen </td><td> 25030-032 </td><td> 2mM (10ml / L) </td><td> 20 ML </td></tr><tr><td> antimycotic / 항생제 </td><td> 시그마 - 올드 리치 </td><td> A5955-20ML </td><td> 10ml / L </td><td> 20 ML </td></tr><tr><td> 갓 태어난 송아지 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 26010-74 </td><td> 2퍼센트 (20 ML / L) </td><td> 40 ML </td></tr></tbody></table> 표 3. 저장 매체에 대한 자료. 저장 매체의 작성 항아리에 위에 주어진대로 특정 농도를 사용하는 모든 재료를 넣고 잘 섞는다. 그들을 필터링연동 펌프의 도움으로 0.2 미크론 필터의 기공 크기 (Millipore, 밀라노, 이탈리아)을 사용합니다. RT에서 병에 매체를 보존. 전송 매체에 대한 자료 (2000 ML). <table border="1"><tbody><tr><td> 구성 요소 </td><td> 공급 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 집중 </td><td> 양 </td></tr><tr><td> MEM (1X) 액체 </td><td> Invitrogen </td><td> 32360-034 </td><td></td><td> 1800 ML </td></tr><tr><td> 나트륨 pyruvate </td><td> Invitrogen </td><td> 11360-039 </td><td> 1mM (10 ML / L) </td><td> 20ml </td></tr><tr><td> L-글루타민 </td><td> Invitrogen </td><td> 25030-032 </td><td> 2mM (10 ML / L) </td><td> 20ml </td></tr><tr><td> 갓 태어난 송아지 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 26010-74 </td><td> 2퍼센트 (20 ML / L) </tD&gt; <td> 40 ML </td></tr><tr><td> Dextran t500 </td><td> Pharmacosmos </td><td> 551005004007 </td><td> 6% (60 GM / 리터) </td><td> 120g / L </td></tr></tbody></table> 표 4. 전송 매체를위한 자재. 전송 매체의 준비 MEM의 ~ 1.5 리터에 Dextran 6 % 추가하고 밤새 그것을 두십시오. 미디어 성분의 나머지 부분을 추가하고 진공 펌프를 사용하여 0.2 미크론 필터 (Millipore, 밀라노, 이탈리아)를 사용하여 필터링합니다. RT에서 병에 매체를 보존.

a simplified technique for in situ excision of cornea and evisceration of retinal tissue from human ocular globe

핵의 제거는 세계의 나머지 부분은 그대로두고 시체 같은 기증자로부터 눈의 세계를 검색하는 과정입니다. 절단은 안구 세계에서 그것이 별도의 가공하여 안구 조직, 특히 각막의 검색을 말합니다. 내장 적출은 망막으로 여기 언급된 내장을 제거하는 과정입니다. 안구 지구본이 각막, 공막엔, 유리 몸, 렌즈, 홍채, 망막, 맥락막, 근육 등 (Suppl. 그림 1)으로 구성되어 있습니다. 환자가 각막 손상을 앓고되면 각막은 제거되어야하고 건강한 한 keratoplastic 수술로 이식해야합니다. 유전 질환이나 망막의 기능 결함은 상상력을 위태롭게 수 있습니다. 인간 안구 글로브 같은 눈 뱅킹, 인간 각막이나 공막엔 이식과 안구 조직에 관한 연구 등 다양한 수술 절차에 사용될 수 있습니다. 그러나, 인간의 각막 및 망막 절단에서 사용할 약간의 정보는 아마도 리터에 의한있다인간의 조직에 imited 접근성. 유사한 절차를 설명하는 연구의 대부분은 동물 모델에서 수행됩니다. 연구 과학자들은 인간의 눈 개발, 항상성 및 기능에 대한 지식을 확장하기 위해 적절하게 해부하고 잘 보존되어 안구 조직의 가용성에 의존하고 있습니다. 우리는 그들 중 약 40 % (표 1) 연구 목적으로 사용되는 들락 거 렸고 안구 글로브의 높은 금액을받을 수 있으므로, 소비세에 기술을 정의하고 이러한 조직에서 실험의 엄청난 금액을 수행하고 정기적으로 그것을 보존하실 수 있습니다. 각막은 망막에 빛의 전송을 가능하게하고이 ​​목적을 위해 항상 투명성 좋은 정도를 유지한다 avascular 조직이다. 각막 내에 줄기 세포의 저수지입니다 limbus 지역은 상피 세포의 재건을 도움이 각막 투명성과 선명도를 유지하는 결막의 전면에 자라난을 제한합니다. 크기와 일<html> 그 중 하나의 변화가 산만, 불분명 비전으로 이어질 수로 각막의 ickness는 분명한 비전에 대한 중요합니다. 각막은 5 층의 구성, 내피) 상피, B) 보먼의 계층, C) 기질, D) Descemet의 멤브레인 및 전자). 모든 레이어는 분명한 비전에게 4,5,6을 보장하기 위해 제대로 작동해야합니다. 맥락막은 Bruch의 막에 의해 내부에 묶여 공막엔와 망막 사이의 중간 튜닉,하고 눈을 혈액의 흐름을 책임지고 있습니다. 맥락막은 또한 망막 5,6의 바깥 레이어로 온도 및 공급 영양 조절하는 데 도움이됩니다. photoreceptive 부분과 아닌 부분 수용 : 망막은 안구 세계 (Suppl. 그림 1)의 뒤쪽을 커버하고 두 부분으로 구성되어 신경 조직의 계층입니다. 망막은 각막과 렌즈로부터 빛을 수신하는 데 도움이 결국 시신경 5,6의 도움을 받아 뇌로 전달 화학 에너지로 변환합니다. 이러한 조직이 목표로 연구 목적을 위해 불가 결한대로 ove_content은 &quot;&gt; 본 논문의 목적은 인간의 안구 글로브에서 각막 및 망막 조직의 해부를 위해 프로토콜을 제공하는 것은. 인접 조직과 교차 오염 방지와 RNA의 무결성을 보존하는 것은 기본적인 중요하다 에서는 (i) 안구 조직의 transcriptome, (2)를 특성화 재생 의료 프로젝트를 위해 줄기 세포를 분리, 그리고 (iii) 영향 / 일반 과​​목에서 조직 간의 histological 차이를 평가. 본 논문에서 우리는 기술을 설명하는 현재 제거하는 데 사용할 각막, 안구 세계에서 맥락막과 망막 조직은. 자 인간 안구 지구본과 각막 및 망막 조직의 절단의 절개를 위해 상세한 프로토콜을 제공합니다. 첨부된 동영상은 연구자들이 검색을 위해 적절한 기술을 배우는 데 도움이됩니다 정기적으로 찾기 어려운 귀한 인간의 조직.

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A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

신문은 인간의 시체 같은 기증자의 안구 세계에서 망막 조직을 내장을 들어낸하는 간단한 소비세 각막에 대한 기술과 설명합니다. 기술은 안구 세계의 다른 조직을 손상시키지 않고 이식, 수술이나 연구 목적을 위해 사용되는 소비세 양질의 조직에 도움이됩니다 여기서 설명했다.

위한 간편한 기법<em&gt; 현장에서</em인간 안구 글로브에서 각막 및 망막 조직의 내장 적출의&gt; 절단

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

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의학

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