Name: a simplified technique for in situ excision of cornea and evisceration of retinal tissue from human ocular globe
Uploaded: 2012-06-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe at JoVE.com

Bu çalışma Regione Veneto (Ricerca Sanitaria Finalizzata n.292/2008 ve Ricerca Sanitaria Finalizzata 2009) hibe yoluyla kısmen desteklenmiştir. Yazarlar, insan oküler küreler kullanımı 2009/2010 özet verileri için, Dr C. Griffoni teşekkür ederim.

1. Kornea in situ olarak eksizyonu Oküler Küre gelen <ol><li> Yaklaşık 15 dakika kullanmadan önce laminar hava akımı kabini açın. % 70 izopropil alkol kullanarak laminar akım temizleyin. Bu tür cerrahi kap ve maske gibi kişisel koruyucu giysiler giyin. El ve ön kol fırçalayın ve steril bir havlu ile kurulayın. Aseptik teknik kullanarak steril eldiven ve önlük veya kollu giyin. </li><li> Aseptik olarak steril bir alet tepsisine yerleştirerek steril alan ayarlayın. Aletler steril olduğunda...

<ol>
	<li>Fay, A., Goldman, L., Ausiello, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diseases+of+the+visual+system.">Diseases of the visual system.</a> Cecil Medicine. , (2007).</li><li>Parekh, M., Megaw, R., Ray-Chaudhuri, A., Ahmad, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patents+in+Limbal+Stem+Cell+Biology.">Patents in Limbal Stem Cell Biology.</a> Recent patents on Regenerative Medicine. 1, 207-212 (2011).</li><li>Pharm, U. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Eye:+The+physiology+of+human+perception.">The Eye: The physiology of human perception.</a> Britannica educational publishing. 36, 19-27 (2011).</li><li>Lang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ophthalmology: A pocket textbook atlas. , 115-117 .</li><li>Liesbeth, P. e. l. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+Culture:+The+method+of+choice+for+preservation+of+human+donor+corneas.">Organ Culture: The method of choice for preservation of human donor corneas.</a> Br. J. Ophthalmol. 81, 523-525 (1997).</li><li>Meyer, J. S., Howden, S. E., Wallace, K. A., Verhoeven, A. D., Wright, L. S., Capowski, E. E., Pinilla, I., Martin, J. M., Tian, S., Stewart, R., Pattnaik, B., Thomson, J., Gamm, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+vesicle-like+structures+derived+from+human+pluripotent+stem+cells+facilitate+a+customized+approach+to+retinal+disease+treatment.">Optic vesicle-like structures derived from human pluripotent stem cells facilitate a customized approach to retinal disease treatment.</a> Stem Cells. , (2011).</li><li>Trifunovic, D., Karali, M., Camposampiero, D., Ponzin, D., Banfi, S., Marigo, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-resolution+RNA+expression+atlas+of+retinitis+pigmentosa+genes+in+human+and+mouse+retinas.">A high-resolution RNA expression atlas of retinitis pigmentosa genes in human and mouse retinas.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 49, 2330-2336 (2008).</li><li>Mora, P., Montanini, L., Ferrari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Retina. 30, 1555 (2010).</li><li>Claybon, A., Bishop, A. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+a+Mouse+Eye+for+a+Whole+Mount+of+the+Retinal+Pigment+Epithelium.">Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium.</a> J. Vis. Exp. (48), e2563 (2011).</li><li>Skeie, J. M., Tsang, S. H., Mahajan, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evisceration+of+Mouse+Vitreous+and+Retina+for+Proteomic+Analyses.">Evisceration of Mouse Vitreous and Retina for Proteomic Analyses.</a> J. Vis. Exp. (50), e2795 (2011).</li></ol>

Doğru eksizyon ve kornea kalınlığı ve retina dokularında uygun korunması, gerekse bu endotel hasarı veya Descemet kıvrım sayısı yüksek gibi küçük kusurları greft sıcaklık değişimlerinin ise korneanın hatası veya yanlış ele retina dokuların bütünlüğünü tehlikeye atabilir yol açabilir gibi kritik öneme sahiptir. Bu yazının amacı, kornea kalınlığı ve retina dokularında transplantasyon veya araştırma amaçlı kullanım tehlikeye hasar veya tadilat neden olmadan, en iyi şekilde iz...

Kornea ve retinanın eksizyonu için malzemeler. <table border="1"><tbody><tr><td> Ürün tanımı </td><td> Boyutlar </td><td> Firma / Kurum </td></tr><tr><td> Güvenlikli neşter atılabilir </td><td> Blade boyutu 15 </td><td> Swann-Morton </td></tr><tr><td> Steril bandajlar </td><td> 5 cm X 5 cm, 8 katlı, 5 adet </td><td> Artsana </td></tr><tr><td> Steril tek kullanımlık tıbbi havlu </td><td> 35 X 50 cm </td><td> U.Jet </td></tr><tr><td> Steril makas </td><td> Bıçakları 24 mm / toplam uzunluk. Künt, 95 mm kavisli </td><td> e.janach </td></tr><tr><td> Steril forseps </td><td> Paslanmaz çelik -100 mm 11 X 2 0.70 mm diş tarafından yönetildi </td><td> e.janach </td></tr><tr><td> Kornea pençe - Tek kullanımlık tıbbi cihaz </td><td></td><td> NIIOS (Hippocratech) </td></tr&gt; <tr><td></td><td> Hazırlıklar </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> [10x] 900 ml d / w (saf su) 100 ml PBS </td><td> Sigma-Aldrich </td></tr><tr><td> Na-tiyosülfat </td><td> PBS [1x] 1 litre 1 gr Na-tiyosülfat </td><td> Sigma-Aldrich </td></tr><tr><td> I-PVP </td><td> 1 litre d / w 5 gm I-PVP </td><td> Sigma-Aldrich </td></tr></tbody></table> Tablo 2. Tablosu kornea ve retina çıkarılması ve bunların alınan şirket için kullanılan malzemeler açıklanmaktadır. Depolama ortamı için malzeme (2000 mL). <table border="1"><tbody><tr><td> Bileşenleri </td><td> Satıcı </td><td> Katalog numarası </td><td> Konsantrasyon </td><td> Miktar </td></tr><tr><td> MEM(1X) sıvı </td><td> Invitrogen </td><td> 32360-034 </td><td></td><td> 1900 ml&#39;lik </td></tr><tr><td> Sodyum piruvat </td><td> Invitrogen </td><td> 11360-039 </td><td> 1mM (10ml / l) </td><td> 20 ml </td></tr><tr><td> L-glutamin </td><td> Invitrogen </td><td> 25030-032 </td><td> 2mm (10ml / l) </td><td> 20 ml </td></tr><tr><td> Antimikotik / Antibiyotik </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A5955-20ML </td><td> 10 ml / l </td><td> 20 ml </td></tr><tr><td> Yeni doğan buzağı serumu </td><td> Invitrogen </td><td> 26010-74 </td><td> 2 (% 20 ml / l) </td><td> 40 ml </td></tr></tbody></table> Tablo 3. Depolama ortamı için malzemeler. Depolama ortamı hazırlanması Bir kavanozun içinde yukarıda verildiği gibi belirli konsantrasyonları kullanılarak tüm malzemeyi ekleyin ve iyice karıştırın. Onları filtrelemeperistaltik bir pompa yardımı ile 0.2 mikron filtre gözenek büyüklüğüne (Millipore, Milan, İtalya) kullanarak. Oda sıcaklığında şişe içinde orta muhafaza. Taşıma ortamı için malzeme (2000 mL). <table border="1"><tbody><tr><td> Bileşenleri </td><td> Satıcı </td><td> Katalog numarası </td><td> Konsantrasyon </td><td> Miktar </td></tr><tr><td> MEM (1X) sıvı </td><td> Invitrogen </td><td> 32360-034 </td><td></td><td> 1800 ml&#39;lik </td></tr><tr><td> Sodyum piruvat </td><td> Invitrogen </td><td> 11360-039 </td><td> 1mM (10 ml / l) </td><td> 20ml </td></tr><tr><td> L-glutamin </td><td> Invitrogen </td><td> 25030-032 </td><td> 2mm (10 ml / l) </td><td> 20ml </td></tr><tr><td> Yeni doğan buzağı serumu </td><td> Invitrogen </td><td> 26010-74 </td><td> 2 (% 20 ml / l) </td&gt; <td> 40 ml </td></tr><tr><td> Dekstran T500 </td><td> Pharmacosmos </td><td> 551005004007 </td><td> % 6 (60 g / L) </td><td> 120 g / l </td></tr></tbody></table> Tablo 4. Taşıma ortamı için malzeme. Taşıma ortamı hazırlanması MEM ~ 1.5 litre Dekstran% 6 ekleyin ve gece boyunca bekletin. Medyada geri kalan malzemeleri ekleyin ve bir vakum pompası ile 0.2 mikron filtre (Millipore, Milan, İtalya) kullanarak filtre. Oda sıcaklığında şişe içinde orta muhafaza.

a simplified technique for in situ excision of cornea and evisceration of retinal tissue from human ocular globe

Enükleasyon dünyanın geri kalanı rahat bırakmak, bir kadavra donörden oküler dünyanın alma işlemidir. Eksizyon oküler dünya onu ayrı keserek, oküler dokularda, özellikle kornea alma anlamına gelir. Eviserasyon retina gibi burada sözü edilen iç organlarının çıkarılması işlemidir. Oküler dünya kornea, sklera, vitreus, lens, iris, retina, koroid, kaslar vb (Ek Şekil 1) oluşur. Bir hasta kornea hasarı sorunum olduğunda, kornea kaldırılması gerekiyor ve sağlıklı bir keratoplastic ameliyatları tarafından nakledilen gerekir. Genetik bozukluklar veya retinal fonksiyon kusurları görme bozabilir. İnsan göz küreleri göz gibi bankacılık, insan kornea veya sklera nakli ve oküler dokular üzerinde araştırma gibi çeşitli cerrahi işlemler için kullanılabilir. Ancak, insan kornea kalınlığı ve retina eksizyon pek fazla bilgi Muhtemelen, l nedeni varinsan dokularına imited erişilebilirlik. Benzer prosedürler açıklayan çalışmaların çoğu hayvan modelleri üzerinde gerçekleştirilir. Araştırma bilim adamları, insan göz gelişimi, homeostasis ve işlevine bilgilerini genişletmek için uygun bir şekilde diseke ve iyi korunmuş oküler dokuların durumu güveniyor. Biz bunların yaklaşık% 40 (Tablo 1) araştırma amaçlı kullanılan vardır out oküler küreler yüksek miktarda aldıkça, tüketim teknikleri tanımlayarak, bu dokular üzerindeki deneylerin büyük miktarda gerçekleştirmek ve bunları düzenli olarak muhafaza edebiliyoruz. Kornea retina üzerine ışık iletimi sağlar ve bu amaçla her zaman şeffaflık iyi derecede tutmalıdır avasküler bir dokudur. Kornea içinde, kök hücrelerin bir rezervuar olduğu limbus bölgede, epitel hücrelerinin yeniden yardımcı olur ve kornea şeffaflık ve açıklık korumak konjonktiva aşırı kısıtlar. Boyutu ve th<html> bunlardan birini değişiklikler dalıp, belirsiz vizyon yol açabileceği gibi korneanın ickness, net görüş için önemlidir. Kornea 5 katmandan oluşur; endotelyum a) epitel, b) Bowman tabakası, c) stroma, d) Descemet membran ve E). Tüm katmanları net bir vizyon 4,5,6 sağlamak için düzgün çalışması gerekir. Koroid Bruch membranı ile iç sınırlanmış sklera ve retina arasındaki ara tunik, ve gözün kan akışından sorumludur. Koroidin da retinanın 5,6 dış tabakaları için sıcaklık ve malzeme besleme düzenleyen yardımcı olur. Bir photoreceptive parçası olmayan bir alıcı parçası: retinanın oküler küre (Ek Şekil 1) arka kapsar ve iki bölümden oluşur sinir dokusunun bir katmandır. Retina, kornea ve lens gelen ışığı almak için yardımcı olur ve sonunda optik sinir 5,6 yardımı ile beyne iletilir kimyasal enerjiye dönüştürür. bu doku amaçlayan araştırma amaçlı vazgeçilmez olarak ove_content &quot;&gt; Bu yazının amacı, insan oküler küreler gelen kornea kalınlığı ve retina dokuların diseksiyonu için bir protokol sağlamaktır. komşu dokuları ile çapraz bulaşmayı önleme ve RNA bütünlüğünün korunması temel bir öneme sahiptir (i) oküler dokuların transcriptome, (ii) karakterize rejeneratif tıp projeleri için kök hücre izolasyonu, ve (iii) etkilenen / Normal bireylerden dokular arasındaki histolojik farklılıkları değerlendirmek. Bu yazıda tekniği tarif şu anda kaldırmak için kullanabileceğiniz kornea, bir göz Dünya&#39;dan koroid ve retina dokularında. Burada insan göz küresi ve kornea kalınlığı ve retina dokularının eksize diseksiyonu için ayrıntılı bir protokol sağlar. beraberindeki Video araştırmacılar alımı için uygun bir tekniği öğrenmek için yardımcı olacak düzenli bulması zor değerli insan dokularının.

Watch this Scientific Journal Video about A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe at JoVE.com

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

Kağıt kadavra donör oküler Dünya&#39;dan retina dokuları içini temizlemek için basitleştirilmiş bir tüketim kornea tekniği ve açıklar. Tekniği oküler dünyanın diğer dokulara zarar vermeden nakli, cerrahi veya araştırma amaçlı kullanılmak üzere özel tüketim kaliteli dokular için yardımcı olacaktır Burada anlatılan.

Için Basitleştirilmiş Tekniği<em&gt; Yerinde</emİnsan Oküler Globe gelen Kornea ve Retina Doku Eviserasyon of&gt; eksizyonu

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue

Technique to Collect Fungiform Taste Papillae from Human Tongue

İnsan Dil Mantar (Tat) papilla toplayın Tekniği

The sense of taste is critical for human life. It informs the body about the quality of food that will be potentially ingested and stimulates metabolic ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Bir İskemik Yara Model üretmek için Basitleştirilmiş Tekniği

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Multi-electrode Array Recordings of Human Epileptic Postoperative Cortical Tissue

İnsan Epileptik Ameliyat sonrası Kortikal Doku Çok elektrot Dizi Kayıtlar

Epilepsy, affecting about 1% of the population, comprises a group of neurological disorders characterized by the periodic occurrence of seizures, which ...

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Establishment of Human Epithelial Enteroids and Colonoids from Whole Tissue and Biopsy

Tüm Doku ve Biyopsi İnsan Epitelyal Enteroids ve Colonoids kurulması

The epithelium of the gastrointestinal tract is constantly renewed as it turns over. This process is triggered by the proliferation of intestinal stem ...

Working with Human Tissues for Translational Cancer Research

Translational Kanser Araştırma İnsan Doku ile Çalışma

Medical research for human benefit is greatly impeded by the necessity for human tissues and subjects. However, upon obtaining consent for human ...

3D Ultrasound Imaging: Fast and Cost-effective Morphometry of Musculoskeletal Tissue

3D ultrason görüntüleme: hızlı ve uygun maliyetli morfometri kas-iskelet dokusunun

The developmental goal of 3D ultrasound imaging (3DUS) is to engineer a modality to perform 3D morphological ultrasound analysis of human muscles. 3DUS ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Effect of Artificial Tear Formulations on the Metabolic Activity of Human Corneal Epithelial Cells after Exposure to Desiccation

Yapay Gözyaşı Formülasyonlarının Desiccation'a Maruz Kalma sonrası İnsan Kornea Epitel Hücrelerinin Metabolik Aktivitesi Üzerine Etkisi

Artificial lipid-containing tear formulations are developed to reduce tear evaporation by the restoration of a deficient tear lipid layer. Artificial tear ...

Characterization of a Novel Human Organotypic Retinal Culture Technique

Yeni bir İnsan Organotipik Retina Kültürü Tekniğinin Karakterizasyonu

Previous human organotypic retinal culture (HORC) models have utilized detached retinas; however, without the structural support conferred by retinal ...