Name: synthesis of an in vivo mri-detectable apoptosis probe
Uploaded: 2012-07-31T12:00:00
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건강, NHLBI 국립 연구소 (R &amp; D, PY, PS). 미국 심장 협회 (JL). 스탠포드 대학 VPUE 그랜트 (JL).

이전 연구 1에서 적응. 1. SPIO에 Annexin V의 활용 <ol><li> 2 : 0.15 M 나트륨 periodate (NaIO 4) (중량 비율 4시 1분 무게)와 솔루션 어둠 속에서 20 1 시간을위한 SPIO 입자 (오션 나노기술 주식 회사, 5 밀리그램 / ML) ° C를 산화. </li><li> 20 ° C.에 0.15 M 나트륨 borate (나 2 B 4 O 7 10H 2 O)에 : ANX 단백질을 (체중 1시 1분 비율, 체중) 정화와 ?...

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	<li>Dash, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+MRI+probe+to+detect+treatment+of+cardiac+apoptosis+in+vivo.">A molecular MRI probe to detect treatment of cardiac apoptosis in vivo.</a> Magn. Reson. Med. , (2011).</li><li>Khym, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reaction+of+methylamine+with+periodate-oxidized+adenosine+5'-phosphate.">The reaction of methylamine with periodate-oxidized adenosine 5'-phosphate.</a> Biochemistry. 2, 344-350 (1963).</li><li>Liu, Y. Y., Yu, Y., Zhang, G. B., Tang, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation,+characterization,+and+controlled+release+of+novel+nanoparticles+based+on+MMA/beta-CD+copolymers.">Preparation, characterization, and controlled release of novel nanoparticles based on MMA/beta-CD copolymers.</a> Macromol. Biosci. 7, 1250-1257 (2007).</li><li>Seo, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FeCo/graphitic-shell+nanocrystals+as+advanced+magnetic-resonance-imaging+and+near-infrared+agents.">FeCo/graphitic-shell nanocrystals as advanced magnetic-resonance-imaging and near-infrared agents.</a> Nat. Mater. 5, 971-976 (2006).</li><li>Hsiao, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+nanoparticle+labeling+of+mesenchymal+stem+cells+without+transfection+agent:+cellular+behavior+and+capability+of+detection+with+clinical+1.5+T+magnetic+resonance+at+the+single+cell+level.">Magnetic nanoparticle labeling of mesenchymal stem cells without transfection agent: cellular behavior and capability of detection with clinical 1.5 T magnetic resonance at the single cell level.</a> Magn. Reson. Med. 58, 717-724 (2007).</li><li>Zhao, M., Beauregard, D. A., Loizou, L., Davletov, B., Brindle, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+detection+of+apoptosis+using+magnetic+resonance+imaging+and+a+targeted+contrast+agent.">Non-invasive detection of apoptosis using magnetic resonance imaging and a targeted contrast agent.</a> Nat. Med. 7, 1241-1244 (2001).</li><li>van Tilborg, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Internalization+of+annexin+A5-functionalized+iron+oxide+particles+by+apoptotic+Jurkat+cells.">Internalization of annexin A5-functionalized iron oxide particles by apoptotic Jurkat cells.</a> Contrast Media Mol. Imaging. 4, 24-32 (2009).</li><li>Sosnovik, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+of+cardiomyocyte+apoptosis+with+a+novel+magneto-optical+nanoparticle.">Magnetic resonance imaging of cardiomyocyte apoptosis with a novel magneto-optical nanoparticle.</a> Magn. Reson. Med. 54, 718-724 (2005).</li><li>Sosnovik, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+MRI+detects+low+levels+of+cardiomyocyte+apoptosis+in+a+transgenic+model+of+chronic+heart+failure.">Molecular MRI detects low levels of cardiomyocyte apoptosis in a transgenic model of chronic heart failure.</a> Circ. Cardiovasc. Imaging. 2, 468-475 (2009).</li><li>Dumont, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiomyocyte+death+induced+by+myocardial+ischemia+and+reperfusion:+measurement+with+recombinant+human+annexin-V+in+a+mouse+model.">Cardiomyocyte death induced by myocardial ischemia and reperfusion: measurement with recombinant human annexin-V in a mouse model.</a> Circulation. 102, 1564-1568 (2000).</li><li>Blankenberg, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+detection+and+imaging+of+phosphatidylserine+expression+during+programmed+cell+death.">In vivo detection and imaging of phosphatidylserine expression during programmed cell death.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95, 6349-6354 (1998).</li><li>Schellenberger, E. A., Sosnovik, D., Weissleder, R., Josephson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magneto/optical+annexin+V,+a+multimodal+protein.">Magneto/optical annexin V, a multimodal protein.</a> Bioconjug. Chem. 15, 1062-1067 (2004).</li></ol>

Annexin V로 SPIO를 링크에 대한 설명 활용 방법은 Annexin의 측면 체인 아민 그룹과 SPIO의 nanoparticle의 카르 복실 moieties을 이용. 구체적인 산화 환원 단계를 통해, 이들 화합물의 공유 결합 결합을 얻을 수 있고, 결과로 작용 nanoparticle을 격리 수 있습니다. 이 방법은 다른 단백질과 관심의 nanoparticles에 일반 수 있습니다. 가장 중요한 단계는 적절한 온도와 부드러운 믹싱으로 수행 ?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 # </td></tr><tr><td> Superparamagnetic의 철 산화물 </td><td> 오션 나노기술 주식 회사 </td><td> ICK - 40-005 </td></tr><tr><td> Doxorubicin </td><td> 시그마 </td><td> D1515-10MG </td></tr><tr><td> 구분자 SuperMag </td><td> 오션 나노기술 주식 회사 </td><td> N / A </td></tr><tr><td> Zetasizer 나노 DL을 기계 </td><td> Malvern, INC </td><td> N / A </td></tr></tbody></table>

synthesis of an in vivo mri-detectable apoptosis probe

세포 apoptosis는 많은 질병들의 두드러진 특징이며, 질병의 임상 발현은 증거들이 이전에 프로그램된 세포 죽음이 발생합니다. 그것의 초기, 가역 단계에서 apoptosis를 감지하는 수단은 예방이나 치료 조치는 영구적인 손상으로부터 심장을 보호하기 위해 취한 수있는 동안 미리 임상 &#39;창&#39;을 감당할 것입니다. 우리는 본 MRI-감지 대비 에이전트 역할 superparamagnetic 철 산화물 (SPIO) nanoparticles에 avidly apoptosis의 초기, 가역 단계에서 세포에 바인딩 인간 Annexin V (ANX)를, 어원이 같은 말하는 간단하고 강력한 방법을 제시. 활용 방법은 SPIO의 다당류의 껍질에서 카르 복실 그룹을 산화 SPIO의 nanoparticles의 산화로 시작합니다. ANX 단백질 투석을하는 것은 다음 줄이는 버퍼에 SPIO로 ANX의 공유 결합 상호 작용을 촉진하기 위하여 나트륨 borate 솔루션의 설정에 추가됩니다. 나트륨 borohydrid와 최종 감속 단계전자는 감소를 완료하기 위해 수행되는 다음 반응은 침묵하고 있습니다. Unconjugated ANX는 microcentrifuge 여과에 의한 믹스에서 제거됩니다. ANX-SPIO 제품의 크기와 순도는 동적 광 산란 (DL을)에 의해 확인됩니다. 이 방법의 외에도, 또는 수정을 요구하지 않는 등 교차 연결된 철 산화물 입자 활용 방법이나 비오틴-라벨 nanoparticles에 반대 다당류 SPIO 껍질. 따라서이 방법은 관심의 다른 단백질의 활용으로 연장될 수있다 간단 강력한 접근 방식을 나타냅니다.

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Synthesis of an In vivo MRI-detectable Apoptosis Probe

apoptosis의 조기 발견은 질병의 다양한 위험에 처한 세포 인구를 식별할 수 있습니다. 여기 MRI-감지 철 산화물 nanoparticle (SPIO)에 조기 apoptosis 검출 단백질 (Annexin V)를 연결하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 MRI를 - 감지 분자 이미징 프로브를 생성하는 관심의 다른 단백질로 연장될 수있다.

의 합성<em&gt; 생체내에서</em&gt; MRI-감지 Apoptosis 프로브

Cellular apoptosis is a prominent feature of many diseases, and this programmed cell death typically occurs before clinical manifestations of disease are ...

Research

JoVE Journal

Biology

Synthesis of an In vivo MRI-detectable Apoptosis Probe

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연구

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생체</em에서 단백질 복합체를 분리> 가교 접근 초파리 태아

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