Name: measurement of cellular chemotaxis with ecis/taxis
Uploaded: 2012-04-01T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Cellular Chemotaxis with ECIS/Taxis at JoVE.com

وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة (ES07408 وEB00208).

1. ECIS / سيارات الأجرة الكهربائي التحضير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> واستقر لأول مرة سطح الذهب من الصفيف القطب ECIS / سيارات الأجرة (التي تتكون من 8 غرف لكل شريحة) من خلال ما قبل المعالجة العقيمة مع السيستين 10 مليمتر في ماء منزوع الأيونات (DH 2 O) لم?...

<ol>
	<li>Boyden, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemotactic+effect+of+mixtures+of+antibody+and+antigen+on+polymorphonuclear+leucocytes.">The chemotactic effect of mixtures of antibody and antigen on polymorphonuclear leucocytes.</a> J. Exp. Med. 115, 453-466 (1962).</li><li>Lauffenburger, D. A., Tranquillo, R. T., Zigmond, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+gradients+of+chemotactic+factors+in+chemotaxis+assays.">Concentration gradients of chemotactic factors in chemotaxis assays.</a> Methods Enzymol. 162, 85-101 (1988).</li><li>Nelson, R. D., Quie, P. G., Simmons, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemotaxis+under+agarose:+a+new+and+simple+method+for+measuring+chemotaxis+and+spontaneous+migration+of+human+polymorphonuclear+leukocytes+and+monocytes.">Chemotaxis under agarose: a new and simple method for measuring chemotaxis and spontaneous migration of human polymorphonuclear leukocytes and monocytes.</a> J. Immunol. 115, 1650-1650 (1975).</li><li>Newton-Nash, D. K., Tonellato, P., Swiersz, M., Abramoff, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+chemokinetic+behavior+of+inflammatory+lung+macrophages+in+a+linear+under-agarose+assay.">Assessment of chemokinetic behavior of inflammatory lung macrophages in a linear under-agarose assay.</a> J. Leukoc. Biol. 48, 297-305 (1990).</li><li>Giaever, I., Keese, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+fibroblast+behavior+in+tissue+culture+with+an+applied+electric+field.">Monitoring fibroblast behavior in tissue culture with an applied electric field.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81, 3761-374 (1984).</li><li>Keese, C. G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Whole+Cell+Biosensor+bsed+on+Cell-Substrate+Interactions.">A Whole Cell Biosensor bsed on Cell-Substrate Interactions.</a> IEEE Engineering in Medicine and Biology Society. 12, 500-501 (1990).</li><li>Laevsky, G., Knecht, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-linking+of+actin+filaments+by+myosin+II+is+a+major+contributor+to+cortical+integrity+and+cell+motility+in+restrictive+environments.">Cross-linking of actin filaments by myosin II is a major contributor to cortical integrity and cell motility in restrictive environments.</a> J. Cell. Sci. 116, 3761-3770 (2003).</li><li>Condeelis, J., Bresnick, A., Demma, M., Dharmawardhane, S., Eddy, R., Hall, A. L., Sauterer, R., Warren, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+amoeboid+chemotaxis:+an+evaluation+of+the+cortical+expansion.">Mechanisms of amoeboid chemotaxis: an evaluation of the cortical expansion.</a> 11, 5-6 (1990).</li><li>Hadjout, N., Laevsky, G., Knecht, D. A., Lynes, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+real-time+measurement+of+chemotactic+cell+motility.">Automated real-time measurement of chemotactic cell motility.</a> Biotechniques. 31, 1130-1138 (2001).</li><li>Hadjout, N., Yin, X., Knecht, D. A., Lynes, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+real-time+measurements+of+leukocyte+chemotaxis.">Automated real-time measurements of leukocyte chemotaxis.</a> J. Immunol. Methods. 320, 70-80 (2007).</li><li>Yin, X., Knecht, D. A., Lynes, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metallothionein+mediates+leukocyte+chemotaxis.">Metallothionein mediates leukocyte chemotaxis.</a> BMC Immunol. 6, 21-21 (2005).</li><li>Lundien, M. C., Mohammed, K. A., Nasreen, N., Tepper, R. S., Hardwick, J. A., Sanders, K. L., Van Horn, R. D., Antony, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+MCP-1+expression+in+airway+epithelial+cells:+role+of+CCR2+receptor+in+airway+epithelial+injury.">Induction of MCP-1 expression in airway epithelial cells: role of CCR2 receptor in airway epithelial injury.</a> J. Clin. Immunol. 22, 144-152 (2002).</li><li>Zudaire, E., Cuesta, N., Murty, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+aryl+hydrocarbon+receptor+repressor+is+a+putative+tumor+suppressor+gene+in+multiple+human+cancers.">The aryl hydrocarbon receptor repressor is a putative tumor suppressor gene in multiple human cancers.</a> J. Clin. Invest. 118, 640-650 (2008).</li><li>Opp, D., Wafula, B., Lim, J., Huang, E., Lo, J. C., Lo, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+electric+cell-substrate+impedance+sensing+to+assess+in+vitro+cytotoxicity.">Use of electric cell-substrate impedance sensing to assess in vitro cytotoxicity.</a> Biosens. Bioelectron. 24, 2625-269 (2009).</li><li>Foxman, E. F., Kunkel, E. J., Butcher, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrating+conflicting+chemotactic+signals.+The+role+of+memory+in+leukocyte+navigation.">Integrating conflicting chemotactic signals. The role of memory in leukocyte navigation.</a> J. Cell. Biol. 147, 577-588 (1999).</li><li>Heit, B., Tavener, S., Raharjo, E., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+intracellular+signaling+hierarchy+determines+direction+of+migration+in+opposing+chemotactic+gradients.">An intracellular signaling hierarchy determines direction of migration in opposing chemotactic gradients.</a> J. Cell. Biol. 159, 91-102 (1999).</li></ol>

خصائص رواية للفحص ECIS / سيارات الأجرة وتشمل قدرتها على أتمتة عملية جمع البيانات في الوقت الحقيقي وخلايا الاستجابة للجاذب كيميائي. في حين أن تطبيق معظم شائعا لهذه التكنولوجيا هو قياس الاستجابات الخلوية لالتدرجات الكيميائي الفردية، أو إلى التدرجات تتكون من خليط من ناه...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم الكاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> ECIS Zθ </td><td> التطبيقية الفيزياء الحيوية </td><td></td><td> <a href="http://www.biophysics.com/prodducts_Ecisz0.php">http://www.biophysics.com/prodducts_Ecisz0.php</a> </td></tr><tr><td> ECIS الكهربائي صفيف </td><td> التطبيقية الفيزياء الحيوية </td><td> 8W الانجذاب الكيميائي </td><td> <a href="http://www.biophysics.com/cultureware.php">http://www.biophysics.com/cultureware.php</a> </td></tr><tr><td> Seakem GTG الاغاروز </td><td> تطبيقات BioWhittaker الجزيئية </td><td> 50070 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI1640 </td><td> Cellgro </td><td> 10-040 </td><td></td></tr><tr><td> HyClone مصل بقري جنيني </td><td> الحرارية العلمية </td><td> SH300703 </td><td></td></tr><tr><td> PEnicillin / الستربتوميسين </td><td> النائب Biomedicals </td><td> 1670049 </td><td> بنسلين 5000 وحدة دولية / مل؛ الستربتوميسين 5 ملغ / مل </td></tr><tr><td> HEPES الواق </td><td> النائب Biomedicals </td><td> 1688449 </td><td> حل 1M ثقافة الخلية، الصف </td></tr><tr><td> 14 المقياس الفولاذ المقاوم للصدأ قنية (2) 4 بوصة </td><td> عام مختبر التموين </td><td> 5-8365-1 </td><td> كليل نقطة </td></tr></tbody></table>

measurement of cellular chemotaxis with ecis/taxis

حركة الخلوية في استجابة للمؤثرات الخارجية أمر أساسي لكثير من العمليات الخلوية بما في ذلك التئام الجروح، والالتهابات، واستجابة للعدوى. وهناك طريقة شائعة لقياس الكيميائي هو فحص غرفة بويدن، حيث يتم فصل الخلايا وجاذب كيميائي بواسطة غشاء مسامي. كما تهاجر الخلايا من خلال غشاء نحو جاذب كيميائي، كانوا متمسكين السفلي من الغشاء، أو الوقوع في وسائل الإعلام الأساسية، وملطخة في وقت لاحق وعدها بصريا 1. في هذه الطريقة، تتعرض الخلايا لالانحدار 1 جاذب كيميائي حاد وعابر، والتي يعتقد أن يكون تمثيل الفقراء من التدرجات وجدت في الأنسجة 2. آخر نظام الفحص، وكيل الاغاروز الكيميائي فحص، 3، 4 حركة الخلية عبر تدابير ركيزة صلبة في الفيلم المائية التي تشكل رقيقة تحت طبقة الاغاروز. الانحدار الذي يتطور في الاغاروز ضحلة، ويعتقد أن يكون التطبيقropriate تمثيل طبيعيا التدرجات. ويمكن تقييم الكيميائي عن طريق التصوير المجهري للالمسافة المقطوعة. وعادة ما يتم تكوين كلا من الدائرة بويدن الفحص وفحص تحت الاغاروز كما المقايسات نقطة النهاية. الآلي ECIS / سيارات الأجرة نظام يجمع بين نهج وكيل الاغاروز مع الكهربائية الاستشعار عن الممانعة الخلوي الركيزة (ECIS) 5 و 6. في هذا الاختبار، وتقع الأقطاب هدف في كل من 8 غرف. وقال كبير لمكافحة قطب كهربائي يعمل من خلال كل دائرة من الدوائر 8 (الشكل 2). يتم تعبئة كل غرفة مع الاغاروز واثنين من الآبار الصغيرة هي قطع في الاغاروز على جانبي القطب الهدف. واحد جيد مليء اختبار سكان الخلية، في حين أن الآخر يحمل مصادر جاذب كيميائي نشرها (الشكل 3). ويمكن استخدام الحالي مرت من خلال نظام لتحديد التغير في المقاومة التي تحدث باسم خلايا تمر فوق القطب الهدف. electrod الخلايا على الهدفه زيادة المقاومة للنظام 6. وبالإضافة إلى ذلك، والتقلبات السريعة في المقاومة تمثل تغيرات في تفاعلات الخلايا التي تحتوي على سطح القطب وتدل على التغيرات الجارية شكل الخلوية. لا يمكن للنظام ECIS / سيارات الأجرة قياس حركة السكان الخلية في الوقت الحقيقي على مدى فترات طويلة من الزمن، ولكن أيضا حساسة بما يكفي للكشف عن وصول خلية واحدة في القطب الهدف. ومن المعروف Dictyostelium discoidium للهجرة في وجود حمض الفوليك التدرج 7 و 8، ويمكن ردها الكيميائي تقاس بدقة بواسطة ECIS / سيارات الأجرة 9. الكيميائي الكريات البيض، واستجابة لSDF1α والخصوم الكيميائي كما تم قياسه مع ECIS / سيارات الأجرة 10 و 11. ويرد مثال على استجابة الكريات البيض إلى SDF1α في الشكل 1.

Watch this Scientific Journal Video about Measurement of Cellular Chemotaxis with ECIS/Taxis at JoVE.com

Measurement of Cellular Chemotaxis with ECIS/Taxis

نظام ECIS / سيارات الأجرة هو الآلي، في الوقت الحقيقي فحص الكيميائي الذي يقيس الخلوية. في هذا الاختبار، وخلايا تتحرك تحت طبقة من الاغاروز للوصول إلى القطب الهدف. ويتم قياس حركة الخليوي عن ظهور المقاومة إلى 0 ميلان الحالي.

قياس من الانجذاب الكيميائي الخلوي مع ECIS / سيارات الأجرة

Cellular movement in response to external stimuli is fundamental to many cellular processes including wound healing, inflammation and the response to ...

Research

JoVE Journal

Biology

Studies of Bacterial Chemotaxis Using Microfluidics - Interview

دراسات لاستخدام الانجذاب الكيميائي الجرثومي على microfluidics -- مقابلة

A Microfluidic Device with Groove Patterns for Studying Cellular Behavior

جهاز ميكروفلويديك مع أنماط Groove لدراسة السلوك الخليوي

We describe a microfluidic device with microgrooved patterns for studying cellular behavior.  This microfluidic platform consists of a top fluidic channel ...

Making Patch-pipettes and Sharp Electrodes with a Programmable Puller

جعل التصحيح ، وماصات أقطاب شارب مع بولير برمجة

Glass microelectrodes (also called pipettes) have been a workhorse of electrophysiology for decades.  Today, such pipettes are made from glass capillaries ...

Identification of protein complexes with quantitative proteomics in S. cerevisiae

تحديد بروتين المجمعات مع كمية البروتينات في البيرة س.

Lipids are the building blocks of cellular membranes that function as barriers and in compartmentalization of cellular processes, and recently, as ...

Imaging Exocytosis in Retinal Bipolar Cells with TIRF Microscopy

إيماس التصوير في خلايا الشبكية مع القطبين الميكروسكوب TIRF

Total internal reflectance fluorescence (TIRF) microscopy is a technique that allows the study of events happening at the cell membrane, by selective ...

Measurement Of Neuromagnetic Brain Function In Pre-school Children With Custom Sized MEG

قياس وظائف المخ Neuromagnetic في مرحلة ما قبل المدرسة والأطفال MEG الحجم مخصص

Magnetoencephalography is a technique that detects magnetic fields associated with cortical activity [1]. The electrophysiological activity of the brain ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

جهاز ميكروفلويديك الانجذاب الكيميائي لقياس تركيز البكتيريا في التدرجات مستقرة

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Imaging G-protein Coupled Receptor (GPCR)-mediated Signaling Events that Control Chemotaxis of Dictyostelium Discoideum

Imaging G-protein Coupled Receptor GPCR-mediated Signaling Events that Control Chemotaxis of Dictyostelium Discoideum

التصوير G - مستقبلات البروتين يقترن (GPCR) بوساطة الأحداث يشير إلى أن التحكم في الانجذاب الكيميائي Dictyostelium Discoideum</em

Many eukaryotic cells can detect gradients of chemical signals in their environments and migrate accordingly 1.  This guided cell migration is referred as ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

قياس عمر في<em&gt; ذبابة الفاكهة الدروسوفيلا</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

C. elegans Chemotaxis Assay

C. elegans Chemotaxis Assay

C. ايليجانس الانجذاب الكيميائي الفحص

Many organisms use chemotaxis to seek out food sources, avoid noxious substances, and find mates.  Caenorhabditis elegans has impressive chemotaxis ...