Name: use of artificial sputum medium to test antibiotic efficacy against pseudomonas aeruginosa in conditions more relevant to the cystic fibrosis lung
Uploaded: 2012-06-05T12:00:00
Duration: 7 min 46 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung at JoVE.com

אנו מכירים את תמיכתם של בריטניה המכון הלאומי לחקר הבריאות, ד&quot;ר Hadwen אמון למחקר להומניות, מובילה הצדקה רפואית בבריטניה למימון מחקר בלעדי שאינם מהחי שיטות מחקר כדי להחליף ניסויים בבעלי חיים, ואת האמון Wellcome (גרנט 089215). כמו כן, אנו מכירים נוברטיס פרמצבטיקה בריטניה בע&quot;מ (בלתי מוגבל החינוך מענק).

<ol>
	<li>Andrews, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BSAC+standardized+disc+susceptibility+testing+method+(version+8).">BSAC standardized disc susceptibility testing method (version 8).</a> J. Antimicrob. Chemother. 64, 454-489 (2009).</li><li>Worlitzsch, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+reduced+mucus+oxygen+concentration+in+airway+Pseudomonas+infections+of+cystic+fibrosis+patients.">Effects of reduced mucus oxygen concentration in airway Pseudomonas infections of cystic fibrosis patients.</a> J. Clin. Invest. 109, 317-325 (2002).</li><li>Smith, A. L., Fiel, S. B., Mayer-Hamblett, N., Ramsey, B., Burns, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+testing+of+Pseudomonas+aeruginosa+isolates+and+clinical+response+to+parenteral+antibiotic+administration:+lack+of+association+in+cystic+fibrosis.">Susceptibility testing of Pseudomonas aeruginosa isolates and clinical response to parenteral antibiotic administration: lack of association in cystic fibrosis.</a> Chest. 123, 1495-1502 (2003).</li><li>Sriramulu, D. D., Lunsdorf, H., Lam, J. S., Romling, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcolony+formation:+a+novel+biofilm+model+of+Pseudomonas+aeruginosa+for+the+cystic+fibrosis+lung.">Microcolony formation: a novel biofilm model of Pseudomonas aeruginosa for the cystic fibrosis lung.</a> J. Med. Microbiol. 54, 667-676 (2005).</li><li>Garbe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+JG024,+a+pseudomonas+aeruginosa+PB1-like+broad+host+range+phage+under+simulated+infection+conditions.">Characterization of JG024, a pseudomonas aeruginosa PB1-like broad host range phage under simulated infection conditions.</a> BMC Microbiol. 10, 301 (2010).</li><li>Naughton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+AES-1+exhibits+increased+virulence+gene+expression+during+chronic+infection+of+cystic+fibrosis+lung.">Pseudomonas aeruginosa AES-1 exhibits increased virulence gene expression during chronic infection of cystic fibrosis lung.</a> PLoS One. 6, e24526 (2011).</li><li>Moskowitz, S. M., Foster, J. M., Emerson, J. C., Gibson, R. L., Burns, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Pseudomonas+biofilm+susceptibilities+to+assign+simulated+antibiotic+regimens+for+cystic+fibrosis+airway+infection.">Use of Pseudomonas biofilm susceptibilities to assign simulated antibiotic regimens for cystic fibrosis airway infection.</a> J. Antimicrob. Chemother. 56, 879-886 (2005).</li><li>Field, T. R., White, A., Elborn, J. S., Tunney, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+oxygen+limitation+on+the+in+vitro+antimicrobial+susceptibility+of+clinical+isolates+of+Pseudomonas+aeruginosa+grown+planktonically+and+as+biofilms.">Effect of oxygen limitation on the in vitro antimicrobial susceptibility of clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa grown planktonically and as biofilms.</a> Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 24, 677-687 (2005).</li><li>Bjarnsholt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+in+the+respiratory+tract+of+cystic+fibrosis+patients.">Pseudomonas aeruginosa biofilms in the respiratory tract of cystic fibrosis patients.</a> Pediatr. Pulmonol. 44, 547-558 (2009).</li><li>Hill, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibiotic+susceptibilities+of+Pseudomonas+aeruginosa+isolates+derived+from+patients+with+cystic+fibrosis+under+aerobic,+anaerobic,+and+biofilm+conditions.">Antibiotic susceptibilities of Pseudomonas aeruginosa isolates derived from patients with cystic fibrosis under aerobic, anaerobic, and biofilm conditions.</a> J. Clin. Microbiol. 43, 5085-5090 (2005).</li><li>Fung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+of+Pseudomonas+aeruginosa+in+a+mucin-containing+synthetic+growth+medium+mimicking+cystic+fibrosis+lung+sputum.">Gene expression of Pseudomonas aeruginosa in a mucin-containing synthetic growth medium mimicking cystic fibrosis lung sputum.</a> J. Med. Microbiol. 59, 1089-1100 (2010).</li><li>Andrews, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BSAC+standardized+disc+susceptibility+testing+method+(version+8).">BSAC standardized disc susceptibility testing method (version 8).</a> The Journal of antimicrobial chemotherapy. 64, 454-489 (2009).</li><li>Rybtke, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+implication+of+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+in+infections.">The implication of Pseudomonas aeruginosa biofilms in infections.</a> Inflamm Allergy Drug Targets. 10, 141-157 (2011).</li><li>Moreau-Marquis, S., Stanton, B. A., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+formation+in+the+cystic+fibrosis+airway.">Pseudomonas aeruginosa biofilm formation in the cystic fibrosis airway.</a> Pulm. Pharmacol. Ther. 21, 595-599 (2008).</li><li>Ahmed, S. A., Gogal, R. M., Walsh, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rapid+and+simple+non-radioactive+assay+to+monitor+and+determine+the+proliferation+of+lymphocytes:+an+alternative+to+[3H]thymidine+incorporation+assay.">A new rapid and simple non-radioactive assay to monitor and determine the proliferation of lymphocytes: an alternative to [3H]thymidine incorporation assay.</a> J. Immunol. Methods. 170, 211-224 (1994).</li><li>Fothergill, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+antibiotic+treatment+on+bacteriophage+production+by+a+cystic+fibrosis+epidemic+strain+of+Pseudomonas+aeruginosa.">Effect of antibiotic treatment on bacteriophage production by a cystic fibrosis epidemic strain of Pseudomonas aeruginosa.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 55, 426-428 (2011).</li><li>Singh, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quorum-sensing+signals+indicate+that+cystic+fibrosis+lungs+are+infected+with+bacterial+biofilms.">Quorum-sensing signals indicate that cystic fibrosis lungs are infected with bacterial biofilms.</a> Nature. 407, 762-764 (2000).</li><li>Mowat, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+Aeruginosa+Population+Diversity+and+Turnover+in+Cystic+Fibrosis+Chronic+Infections.">Pseudomonas Aeruginosa Population Diversity and Turnover in Cystic Fibrosis Chronic Infections.</a> Am. J. Respir. Crit. Care. Med. , (2011).</li><li>Fothergill, J. L., Mowat, E., Ledson, M. J., Walshaw, M. J., Winstanley, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+in+phenotypes+and+genotypes+within+populations+of+Pseudomonas+aeruginosa+in+the+cystic+fibrosis+lung+during+pulmonary+exacerbations.">Fluctuations in phenotypes and genotypes within populations of Pseudomonas aeruginosa in the cystic fibrosis lung during pulmonary exacerbations.</a> J. Med. Microbiol. 59, 472-481 (2010).</li><li>Fouhy, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible+signal+factor-dependent+cell-cell+signaling+and+virulence+in+the+nosocomial+pathogen+Stenotrophomonas+maltophilia.">Diffusible signal factor-dependent cell-cell signaling and virulence in the nosocomial pathogen Stenotrophomonas maltophilia.</a> J. Bacteriol. 189, 4964-4968 (2007).</li><li>Winstanley, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+introduced+genomic+prophage+islands+are+critical+determinants+of+in+vivo+competitiveness+in+the+Liverpool+Epidemic+Strain+of+Pseudomonas+aeruginosa.">Newly introduced genomic prophage islands are critical determinants of in vivo competitiveness in the Liverpool Epidemic Strain of Pseudomonas aeruginosa.</a> Genome Res. 19, 12-23 (2009).</li><li>Carter, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subtype+of+a+Pseudomonas+aeruginosa+cystic+fibrosis+epidemic+strain+exhibits+enhanced+virulence+in+a+murine+model+of+acute+respiratory+infection.">A subtype of a Pseudomonas aeruginosa cystic fibrosis epidemic strain exhibits enhanced virulence in a murine model of acute respiratory infection.</a> J. Infect. Dis. 202, 935-942 (2010).</li></ol>

אין ניגוד עניינים הצהיר.

במחקר זה השתמשנו במודל חוץ גופית הרומן מבוסס על ASM לשכפל פ biofilm aeruginosa התנאים בתוך 4 ריאות CF. מודל שונה בהצלחה בדיקות בקנה מידה קטן תפוקה גבוהה, של סוכני מיקרוביאלית. השלבים הקריטיים של assay זה הם: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנה עקבית של התקשורת ASM ועקרות שמירה. אנחנו הקדישו שעות רבות כדי לייעל את האופן שבו כל רכיב נוסף כדי להשיג תוצאות לשחזור בכל פעם. סינון של ASM איטי אבל עדיף מעוקר, אשר עלול לגרום נזק מרכיב mucin. אנחנו לא ממליצים על תוספת של אנטיביוטיקה, כפי שהוצע על ידי אחרים 11, כיוון שהדבר עלול להטיל לחצים בררניים ניכרים, מוטציות מניעות, לגרום תמוגה prophage 16 ו לשנות באופן משמעותי את הביטוי של גנים חיידקים רבים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Assay צריך להיות מותאם על פי נפח Oו ASM בשימוש. מהירויות רועדות מוגדלים עבור אמצעי אחסון קטנות יותר biofilm מחזור חיים קצר יותר הוא ציין. </li></ol> היישום הברור של דגם בקנה מידה קטן biofilm ASM היא קביעה מציאותית יותר של רגישויות biofilm מיקרוביאלית (BSMIC 90). נישות אנאירוביים ו microaerophilic נמצאים ריאות CF ויש ראיות לכך חמצן מוגבל עמוק בתוך biofilms בוגרת 2, 17. כאן אנו מראים כי 10/14 פ קליני מבודד aeruginosa מ CF המטופלת ספוטה התערוכה רב (4 - ≥ 128 לקפל) ירידה רגישות tobramycin בתנאים microaerophilic ב ASM. תוצאות המחקר הזה מצביעים על כך אנטיביוטיקה, כגון tobramycin, עשוי להיות פחות יעיל נגד פ aeruginosa דלקות ריאות CF מכפי שצוין על ידי שיטות בדיקה המקובלות הרגישות. תוצאות אלו משקפות מחקרים קודמים על הרגישות מיקרוביאלית של biofilms 10. קטןמבחני ASM בקנה מידה ובכך לספק פלטפורמה פשוטה תפוקה גבוהה ליצירת משמעות הנתונים הרגישות אנטיביוטיות כדי ליידע טוב יותר החלטות טיפוליות. Assay מוגבל באותו אופן כמו בדיקה רגילה רגישות אנטיביוטיקה כי מושבות בודדות נקטפים להקרנה כי לא יכול להיות מייצג של האוכלוסייה כולה. עם זאת, אנו מאמינים כי הגישה (א) שימוש לא לפני השטח צמיחה biofilm המצורף (ב) החל על תנאים microaerophilic, מהווה חלופה ברורה שיפור פוטנציאל השיטות הקיימות. אנו מסיקים כי assay הזה הוא מודל מתאים ללמוד פ &#39; biofilm aeruginosa אוכלוסיות. בדיקות נוספות במסגרות קליניות היה לברר אם רגישויות אנטיביוטיות על בסיס biofilm, גדל פ aeruginosa יכול להוביל לבחירות אנטיביוטיות שונות עם תוצאות מיקרוביולוגיות וקליניים שיפור פוטנציאלי. חקירות דומות תוך שימוש במודלים הקלאסיים biofilm הראו כי ערכי BSMIC להובילהמלצות שונות לטיפול אנטיביוטי 5,17. בנוסף בדיקת היעילות של אנטי זיהומיות סוכנים, מערכת ASM מייצג אלטרנטיבה זולה, פשוטה לשחזור כדי בבעלי חיים ללימודים כגון אלה להבנת פיזור פ aeruginosa אוכלוסיות. ראינו הטרוגניות רב האוכלוסיות הטבעיות של פ &#39; aeruginosa התאושש CF המטופלת ספוטה 18, 19. גיוון פנוטיפי ו genotypic דומה ניתן לראות במהלך הצמיחה ASM 4 (נתונים שלא פורסמו שלנו), מה שהופך אותו אטרקטיבי במודל חוץ גופית התנאים ריאות CF. הפשטות היחסית של המודל ASM מקל לתכנן לטווח ארוך ניסויים התאמה מכוונת, למשל, על ניטור ההשפעות של אנטיביוטיקה או לחצים אחרים על פ &#39; האוכלוסייה aeruginosa סטייה. בנוסף, חיידקים פתוגנים נוספים ניתן לגדלASM. לדוגמה, Fouhy et al. 2007 השתמשו ASM ללמוד היווצרות biofilm ש &#39; maltophillia 20.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> ה-DNA של הזרע דגים </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 74782 </td></tr><tr><td> Mucin מ חזירי הקיבה, סוג ב &#39; </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M2378 </td></tr><tr><td> L-אלאנין </td><td> Acros Organics </td><td> 102830250 </td></tr><tr><td> L-ארגינין </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A5006 </td></tr><tr><td> L (+)-Asparagine מונוהידראט </td><td> Acros Organics </td><td> 175271000 </td></tr><tr><td> L (+), חומצה אספרטית </td><td> Acros Organics </td><td> 105041000 </td></tr><tr><td> L-ציסטאין </td><td> Sigma-Adrich </td><td> 168149 </td></tR&gt; <tr><td> L (+), חומצה גלוטמית </td><td> Acros Organics </td><td> 156211000 </td></tr><tr><td> L-גלוטמין </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G3126 </td></tr><tr><td> גליצין </td><td> Acros Organics </td><td> 220911000 </td></tr><tr><td> L-היסטידין </td><td> Sigma-Adrich </td><td> H8000 </td></tr><tr><td> L-isoleucine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I2752 </td></tr><tr><td> L-לאוצין </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L8000 </td></tr><tr><td> L (+), ליזין monohydrochloride </td><td> Acros Organics </td><td> 125222500 </td></tr><tr><td> L-מתיונין </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M9625 </td></tr><tr><td> L-פנילאלנין </td><td> Acros Organics </td><td> 130310250 </td></tr><tr><td> L-פרולין </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P0380 </td></tr><tr><td> L-סרין </td><td> Acros Organics </td><td> 132660250 </td></tr><tr><td> L-תראונין </td><td> Acros Organics </td><td> 138930250 </td></tr><tr><td> L (-)-טריפטופן </td><td> Acros Organics </td><td> 140590250 </td></tr><tr><td> L-טירוזין </td><td> Acros Organics </td><td> 140641000 </td></tr><tr><td> L-valine </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> V0500 </td></tr><tr><td> Diethylenetriaminepentaacetic חומצה </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 32318 </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> פישר סיינטיפיק </td><td> S/3160/60 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> BDH </td><td> BDH0258 </td></tr><tr><td&gt; KOH </td><td> BDH </td><td> BDH0262 </td></tr><tr><td> חלמון ביצה תחליב </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 17148 </td></tr><tr><td> ME 2 ואקום משאבת דיאפרגמה </td><td> Vacuubrand </td><td> 696126 </td></tr><tr><td> Steritop מסננים (גודל הנקבוביות: 0.22 מיקרומטר, גודל צוואר: 45 מ&quot;מ) </td><td> Millipore </td><td> SCGPT10RE </td></tr><tr><td> לוריא, Bertani בינוני </td><td> סיגמא </td><td> L2897 </td></tr><tr><td> 96-microtitre גם צלחות </td><td> Sarstedt </td><td> 82.1581 </td></tr><tr><td> 24 גם רקמת התרבות שטופלו צלחות </td><td> Iwaki </td><td> 3820-024 </td></tr><tr><td> הדור CampyGen גז חבילות </td><td> Oxoid </td><td> CN0025 </td></tr><tr><td> Microaerophilic קאמרית </td><td> Oxoid </td><td> HP0011 </td></tr><tr><td> Tobramycin סולפט </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T1783 </td></tr><tr><td> Cellulase, החל אספרגילוס ניז&#39;ר </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 22178 </td></tr><tr><td> Resazurin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 199303 </td></tr><tr><td> Citrate.H 2 0 </td><td> BDH </td><td> BDH0288 </td></tr><tr><td> Fluostar אומגה microplate הקורא </td><td> BMG-Labtech </td><td> SPECTROstar אומגה </td></tr></tbody></table>

use of artificial sputum medium to test antibiotic efficacy against pseudomonas aeruginosa in conditions more relevant to the cystic fibrosis lung

גוברת הדאגה לגבי הרלוונטיות של במבחנה הבדיקות הרגישות מיקרוביאלית כשמדובר מבודד של פ &#39; aeruginosa מ סיסטיק פיברוזיס (CF) חולים. שיטות קיימות להסתמך על יחיד או מבודד כמה גדל aerobically ו planktonically. מראש לחתוך-offs רגילים להגדיר האם החיידקים רגישים או עמידים בפני אנטיביוטיקה נתון 1. עם זאת, במהלך דלקות ריאה כרוניות ב CF, פ אוכלוסיות aeruginosa קיימים biofilms ויש ראיות לכך הסביבה היא microaerophilic בעיקר 2. ההבדל שטרק בתנאים בין חיידקים בריאה לבין אלה במהלך בדיקות אבחון בספק את הרלוונטיות אמינות ואפילו של בדיקות אלה 3. בינוני כיח מלאכותית (ASM) היא בינונית התרבות המכיל את מרכיבי כיח החולה CF, כולל חומצות אמינו, mucin ו-DNA חופשי. פ aeruginosa &lt;/ Em&gt; גידול בצמיחה מחקה ASM במהלך זיהומים CF, עם הקמתה של עצמי צבירה מבנים biofilm ו סטייה האוכלוסייה 4,5,6. מטרת מחקר זה הייתה לפתח assay microtitre-הצלחת ללמוד הרגישות מיקרוביאלית של פ &#39; aeruginosa מבוסס על הצמיחה ASM, שהוא החלים על שני התנאים microaerophilic ו אירובית. Assay ASM פותחה בפורמט צלחת microtitre. פ biofilms aeruginosa הורשו לפתח במשך 3 ימים לפני הדגירה עם סוכני מיקרוביאלית בריכוזים שונים עבור 24 שעות. לאחר הפרעה biofilm, כדאיות התא נמדדה על ידי מכתימה עם resazurin. Assay זה נעשה שימוש כדי לקבוע את התא המינימלי נייחים ריכוז מעכבות (SMIC) של tobramycin עבור 15 פ &#39;שונה מבודד aeruginosa בתנאים אירוביים ו microaerophilic וערכים SMIC הושוו לאלו שהושגו עם צמיחה מרק סטנדרטי. בעוד שישראיות עבור ערכים מיקרופון מוגבר מבודד שגודלו ASM בהשוואה לעמיתיהם planktonic שלהם, ההבדלים הגדולים ביותר נמצאו עם חיידקים שנבדקו בתנאים microaerophilic, אשר הראו עמידות מוגברת יותר של עד פי 128&gt;, לקראת tobramycin במערכת ASM כאשר לעומת מבחני שבוצעו בתנאים אירוביים. היעדר קשר בין בדיקות שוטפות שיטות הרגישות ואת התוצאה הקלינית הטיל ספק בתוקפו של השיטות הקיימות 3. כמה במודלים חוץ גופית שימשו בעבר כדי ללמוד פ &#39; aeruginosa biofilms 7, 8. עם זאת, שיטות אלו מבוססות על biofilms משטח המצורפת, בעוד biofilms ASM דומות לאלו שנצפו ריאות CF 9. בנוסף, ריכוז חמצן מופחת ריר הוכח לשנות את אופן הפעולה של פ &#39; aeruginosa 2 ולהשפיע על רגישות לאנטיביוטיקה 10. לכן usinגרם ASM בתנאים microaerophilic יכול לספק סביבה מציאותית יותר שבו ללמוד הרגישות מיקרוביאלית.

Watch this Scientific Journal Video about Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung at JoVE.com

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

בדיקות אבחון רגישות מיקרוביאלית הנוכחי מסתמך על צמיחה של planktonic מבודד ב מזין, עשיר תנאים אירוביים. כאן, אנו מעסיקים בינוני חלופה כיח מלאכותית ללמוד הרגישות מיקרוביאלית של Pseudomonas aeruginosa biofilms תחת שני תנאים אירוביים ו microaerophilic נציג נוסף של הריאה סיסטיק פיברוזיס.

שימוש בינוני כיח מלאכותית לבדיקת יעילות אנטיביוטי נגד<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; בתנאי רלוונטיים יותר ריאות סיסטיק פיברוזיס

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Pseudomonas aeruginosa and Saccharomyces cerevisiae Biofilm in Flow Cells

Pseudomonas aeruginosa ו biofilm Saccharomyces cerevisiae בתוך תאים Flow

Many microbial cells have the ability to form sessile microbial communities defined as biofilms that have altered physiological and pathological ...

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

RNA Isolation of Pseudomonas aeruginosa Colonizing the Murine Gastrointestinal Tract

RNA בידוד Pseudomonas aeruginosa מיישבים את מערכת העיכול Murine

Pseudomonas aeruginosa (PA) infections result in significant morbidity and mortality in hosts with compromised immune systems, such as patients with ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

כרוני לטווח ארוך<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; זיהום דרכי הנשימה בעכברים

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa מושרה ריאות פגיעה דגם

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or A. baumannii

A Robust Pneumonia Model in Immunocompetent Rodents to Evaluate Antibacterial Efficacy against S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa or  A. baumannii

מודל דלקת ריאות חזק במכרסמי immunocompetent להערכת יעילות אנטיבקטריאלי נגד<i&gt; S. pneumoniae</i&gt;,<i&gt; H. אינפלואנזה</i&gt;,<i&gt; K. pneumoniae</i&gt;,<em&gt; P. aeruginosa</em&gt; או<em&gt; A. baumannii</em

Efficacy of candidate antibacterial treatments must be demonstrated in animal models of infection as part of the discovery and development process, ...

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

דגם IL-8 עכבר transgenized חולף עבור<em&gt; בויבו</emמעקב ארוך טווח אחר תגובות דלקתיות

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...

A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens

שיטה לבדיקת יעילות שטיפת הידיים להסרת הפתוגנים המזהמים

Handwashing is widely recommended to prevent infectious disease transmission. However, little comparable evidence exists on the efficacy of handwashing ...

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

Come to the Light Side: In Vivo Monitoring of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Infections in Chronic Wounds in a Diabetic Hairless Murine Model

לצידו. אור: בויוו ניטור של דלקות Biofilm Pseudomonas aeruginosa לפצעים כרוניים במודל מאתר של שיער סוכרתית

The presence of bacteria as structured biofilms in chronic wounds, especially in diabetic patients, is thought to prevent wound healing and resolution. ...

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Overexpression וטיהור האדם<em&gt; Cis</em&gt; פרנליטרונפרפרז ב<em&gt; Escherichia coli</em

Prenyltransferases (PT) are a group of enzymes that catalyze chain elongation of allylic diphosphate using isopentenyl diphosphate (IPP) via multiple ...

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

Methods for Detecting Cytotoxic Amyloids Following Infection of Pulmonary Endothelial Cells by Pseudomonas aeruginosa

שיטות זיהוי ציטוטוקסיות Amyloids הבאים זיהום של אנדותל תאי הריאות על ידי Pseudomonas aeruginosa

Patients who survive pneumonia have elevated death rates in the months following hospital discharge. It has been hypothesized that infection of pulmonary ...