Name: use of artificial sputum medium to test antibiotic efficacy against pseudomonas aeruginosa in conditions more relevant to the cystic fibrosis lung
Uploaded: 2012-06-05T12:00:00
Duration: 7 min 46 s
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Queremos agradecer el apoyo del Reino Unido, el Instituto Nacional de Investigación en Salud, el Dr. Hadwen Fideicomiso para la Investigación Humana, la principal de financiación médica del Reino Unido organización benéfica de investigación exclusivamente técnicas sin animales de investigación para sustituir los experimentos con animales, y el Wellcome Trust (089.215 de subvención). También agradecemos a Novartis Pharmaceuticals UK Ltd (beca educativa sin restricciones).

<ol>
	<li>Andrews, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BSAC+standardized+disc+susceptibility+testing+method+(version+8).">BSAC standardized disc susceptibility testing method (version 8).</a> J. Antimicrob. Chemother. 64, 454-489 (2009).</li><li>Worlitzsch, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+reduced+mucus+oxygen+concentration+in+airway+Pseudomonas+infections+of+cystic+fibrosis+patients.">Effects of reduced mucus oxygen concentration in airway Pseudomonas infections of cystic fibrosis patients.</a> J. Clin. Invest. 109, 317-325 (2002).</li><li>Smith, A. L., Fiel, S. B., Mayer-Hamblett, N., Ramsey, B., Burns, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+testing+of+Pseudomonas+aeruginosa+isolates+and+clinical+response+to+parenteral+antibiotic+administration:+lack+of+association+in+cystic+fibrosis.">Susceptibility testing of Pseudomonas aeruginosa isolates and clinical response to parenteral antibiotic administration: lack of association in cystic fibrosis.</a> Chest. 123, 1495-1502 (2003).</li><li>Sriramulu, D. D., Lunsdorf, H., Lam, J. S., Romling, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcolony+formation:+a+novel+biofilm+model+of+Pseudomonas+aeruginosa+for+the+cystic+fibrosis+lung.">Microcolony formation: a novel biofilm model of Pseudomonas aeruginosa for the cystic fibrosis lung.</a> J. Med. Microbiol. 54, 667-676 (2005).</li><li>Garbe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+JG024,+a+pseudomonas+aeruginosa+PB1-like+broad+host+range+phage+under+simulated+infection+conditions.">Characterization of JG024, a pseudomonas aeruginosa PB1-like broad host range phage under simulated infection conditions.</a> BMC Microbiol. 10, 301 (2010).</li><li>Naughton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+AES-1+exhibits+increased+virulence+gene+expression+during+chronic+infection+of+cystic+fibrosis+lung.">Pseudomonas aeruginosa AES-1 exhibits increased virulence gene expression during chronic infection of cystic fibrosis lung.</a> PLoS One. 6, e24526 (2011).</li><li>Moskowitz, S. M., Foster, J. M., Emerson, J. C., Gibson, R. L., Burns, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Pseudomonas+biofilm+susceptibilities+to+assign+simulated+antibiotic+regimens+for+cystic+fibrosis+airway+infection.">Use of Pseudomonas biofilm susceptibilities to assign simulated antibiotic regimens for cystic fibrosis airway infection.</a> J. Antimicrob. Chemother. 56, 879-886 (2005).</li><li>Field, T. R., White, A., Elborn, J. S., Tunney, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+oxygen+limitation+on+the+in+vitro+antimicrobial+susceptibility+of+clinical+isolates+of+Pseudomonas+aeruginosa+grown+planktonically+and+as+biofilms.">Effect of oxygen limitation on the in vitro antimicrobial susceptibility of clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa grown planktonically and as biofilms.</a> Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 24, 677-687 (2005).</li><li>Bjarnsholt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+in+the+respiratory+tract+of+cystic+fibrosis+patients.">Pseudomonas aeruginosa biofilms in the respiratory tract of cystic fibrosis patients.</a> Pediatr. Pulmonol. 44, 547-558 (2009).</li><li>Hill, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibiotic+susceptibilities+of+Pseudomonas+aeruginosa+isolates+derived+from+patients+with+cystic+fibrosis+under+aerobic,+anaerobic,+and+biofilm+conditions.">Antibiotic susceptibilities of Pseudomonas aeruginosa isolates derived from patients with cystic fibrosis under aerobic, anaerobic, and biofilm conditions.</a> J. Clin. Microbiol. 43, 5085-5090 (2005).</li><li>Fung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+of+Pseudomonas+aeruginosa+in+a+mucin-containing+synthetic+growth+medium+mimicking+cystic+fibrosis+lung+sputum.">Gene expression of Pseudomonas aeruginosa in a mucin-containing synthetic growth medium mimicking cystic fibrosis lung sputum.</a> J. Med. Microbiol. 59, 1089-1100 (2010).</li><li>Andrews, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BSAC+standardized+disc+susceptibility+testing+method+(version+8).">BSAC standardized disc susceptibility testing method (version 8).</a> The Journal of antimicrobial chemotherapy. 64, 454-489 (2009).</li><li>Rybtke, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+implication+of+Pseudomonas+aeruginosa+biofilms+in+infections.">The implication of Pseudomonas aeruginosa biofilms in infections.</a> Inflamm Allergy Drug Targets. 10, 141-157 (2011).</li><li>Moreau-Marquis, S., Stanton, B. A., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+formation+in+the+cystic+fibrosis+airway.">Pseudomonas aeruginosa biofilm formation in the cystic fibrosis airway.</a> Pulm. Pharmacol. Ther. 21, 595-599 (2008).</li><li>Ahmed, S. A., Gogal, R. M., Walsh, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rapid+and+simple+non-radioactive+assay+to+monitor+and+determine+the+proliferation+of+lymphocytes:+an+alternative+to+[3H]thymidine+incorporation+assay.">A new rapid and simple non-radioactive assay to monitor and determine the proliferation of lymphocytes: an alternative to [3H]thymidine incorporation assay.</a> J. Immunol. Methods. 170, 211-224 (1994).</li><li>Fothergill, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+antibiotic+treatment+on+bacteriophage+production+by+a+cystic+fibrosis+epidemic+strain+of+Pseudomonas+aeruginosa.">Effect of antibiotic treatment on bacteriophage production by a cystic fibrosis epidemic strain of Pseudomonas aeruginosa.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 55, 426-428 (2011).</li><li>Singh, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quorum-sensing+signals+indicate+that+cystic+fibrosis+lungs+are+infected+with+bacterial+biofilms.">Quorum-sensing signals indicate that cystic fibrosis lungs are infected with bacterial biofilms.</a> Nature. 407, 762-764 (2000).</li><li>Mowat, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudomonas+Aeruginosa+Population+Diversity+and+Turnover+in+Cystic+Fibrosis+Chronic+Infections.">Pseudomonas Aeruginosa Population Diversity and Turnover in Cystic Fibrosis Chronic Infections.</a> Am. J. Respir. Crit. Care. Med. , (2011).</li><li>Fothergill, J. L., Mowat, E., Ledson, M. J., Walshaw, M. J., Winstanley, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluctuations+in+phenotypes+and+genotypes+within+populations+of+Pseudomonas+aeruginosa+in+the+cystic+fibrosis+lung+during+pulmonary+exacerbations.">Fluctuations in phenotypes and genotypes within populations of Pseudomonas aeruginosa in the cystic fibrosis lung during pulmonary exacerbations.</a> J. Med. Microbiol. 59, 472-481 (2010).</li><li>Fouhy, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusible+signal+factor-dependent+cell-cell+signaling+and+virulence+in+the+nosocomial+pathogen+Stenotrophomonas+maltophilia.">Diffusible signal factor-dependent cell-cell signaling and virulence in the nosocomial pathogen Stenotrophomonas maltophilia.</a> J. Bacteriol. 189, 4964-4968 (2007).</li><li>Winstanley, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+introduced+genomic+prophage+islands+are+critical+determinants+of+in+vivo+competitiveness+in+the+Liverpool+Epidemic+Strain+of+Pseudomonas+aeruginosa.">Newly introduced genomic prophage islands are critical determinants of in vivo competitiveness in the Liverpool Epidemic Strain of Pseudomonas aeruginosa.</a> Genome Res. 19, 12-23 (2009).</li><li>Carter, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+subtype+of+a+Pseudomonas+aeruginosa+cystic+fibrosis+epidemic+strain+exhibits+enhanced+virulence+in+a+murine+model+of+acute+respiratory+infection.">A subtype of a Pseudomonas aeruginosa cystic fibrosis epidemic strain exhibits enhanced virulence in a murine model of acute respiratory infection.</a> J. Infect. Dis. 202, 935-942 (2010).</li></ol>

No hay conflictos de interés declarado.

En este estudio se utilizó un novedoso modelo in vitro sobre la base de ASM para replicar P. condiciones aeruginosa biofilm en el pulmón de la FQ 4. El modelo se ha modificado correctamente a pequeña escala, de alto rendimiento de las pruebas de los agentes antimicrobianos. Los pasos críticos de este ensayo son: <ol><li> La preparación consistente de los medios de comunicación ASM y el mantenimiento de la esterilidad. Se ha dedicado largas horas para optimizar la forma en que se añade cada componente para obtener resultados reproducibles en todo momento. La filtración de la ASM es lento, pero es preferible a tratamiento en autoclave, lo cual puede dañar el componente de mucina. No recomendamos la adición de antibióticos, según lo sugerido por otros 11, porque esto puede imponer considerables presiones selectivas, las mutaciones de unidad, inducir la lisis profago 16 y altera significativamente la expresión de múltiples genes bacterianos. </li><li> El ensayo debe ser optimizado en función del volumen de Of ASM utilizado. Velocidades de agitación se aumentó para los pequeños volúmenes y un biofilm más corto ciclo de vida se observa. </li></ol> Una aplicación obvia del modelo de biofilm a pequeña escala ASM es la determinación más realista de las susceptibilidades a los antimicrobianos (biofilm BSMIC 90). Nichos anaeróbicos y microaerófilos están presentes en el pulmón CF y existe evidencia de que el oxígeno se limita profundamente dentro maduro biopelículas 2, 17. Aquí demostramos que el 10/14 P. clínica aeruginosa aisladas de pacientes con FQ presentan una considerable esputos (4 - ≥ 128 veces) disminución de la sensibilidad a la tobramicina en condiciones de microaerofilia en ASM. Los resultados de este estudio sugieren que los antibióticos, como la tobramicina, podría ser menos eficaz frente a P. infecciones aeruginosa en el pulmón con FQ que los indicados por los métodos convencionales de las pruebas de sensibilidad. Estos resultados reflejan los estudios previos sobre la susceptibilidad antimicrobiana de las biopelículas 10. Pequeñaescala de ensayos ASM por lo tanto ofrecer una plataforma sencilla de alto rendimiento para generar datos significativos de sensibilidad a los antibióticos para informar mejor a las decisiones terapéuticas. El ensayo se limita en la misma forma que las pruebas convencionales de susceptibilidad a los antibióticos en que las colonias individuales se recogen para la detección de que puede no ser representativa de toda la población. Sin embargo, creemos que un enfoque (i) que no se usen de la superficie del crecimiento del biofilm adjunto y (ii) aplicable a las condiciones de microaerofilia, representa una alternativa clara y una mejora potencial de los métodos existentes. Llegamos a la conclusión de que este ensayo es un modelo adecuado para estudiar P. poblaciones aeruginosa biofilm. La prueba adicional en el ámbito clínico que se dilucide si la susceptibilidad a antibióticos sobre la base de biofilm crecido P. aeruginosa podría dar lugar a diferentes opciones de antibióticos con potencial mejora de los resultados microbiológicos y clínicos. Investigaciones similares que utilizan los modelos clásicos de biofilm han demostrado que los valores BSMIC conducirdiferentes a las recomendaciones para el tratamiento con antibióticos 5,17. Además de las pruebas para la efectividad de los agentes anti-infecciosos, el sistema ASM representa una alternativa barata, simple y reproducible a los modelos animales para estudios tales como los destinados a la comprensión de la diversificación de la P. poblaciones aeruginosa. Hemos observado amplia heterogeneidad en las poblaciones naturales de P. aeruginosa recuperado de pacientes con CF esputos 18, 19. La diversificación fenotípica y genotípica similar se puede observar durante el crecimiento en ASM 4 (y nuestros datos no publicados), por lo que es un atractivo modelo in vitro de las enfermedades de los pulmones CF. La relativa simplicidad del modelo ASM facilita el diseño de experimentos a largo plazo de adaptación destinados, por ejemplo, en el seguimiento de los efectos de los antibióticos u otros estreses de la P. aeruginosa divergencia de la población. Además, otros patógenos bacterianos se puede cultivar enASM. Por ejemplo, Fouhy et al. 2007 han utilizado ASM para estudiar la formación del biofilm de S. maltophillia 20.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre de reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> ADN de esperma de pescado </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 74782 </td></tr><tr><td> La mucina del estómago porcino tipo II </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M2378 </td></tr><tr><td> L-Alanina </td><td> Acros Organics </td><td> 102830250 </td></tr><tr><td> L-Arginina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> A5006 </td></tr><tr><td> L (+)-asparagina monohidrato </td><td> Acros Organics </td><td> 175271000 </td></tr><tr><td> L (+)-aspártico ácido </td><td> Acros Organics </td><td> 105041000 </td></tr><tr><td> L-cisteína </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 168149 </td></tr&gt; <tr><td> L (+)-ácido glutámico </td><td> Acros Organics </td><td> 156211000 </td></tr><tr><td> L-glutamina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G3126 </td></tr><tr><td> Glicina </td><td> Acros Organics </td><td> 220911000 </td></tr><tr><td> L-histidina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> H8000 </td></tr><tr><td> L-isoleucina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> I2752 </td></tr><tr><td> L-leucina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> L8000 </td></tr><tr><td> L (+)-lisina monohidrocloruro </td><td> Acros Organics </td><td> 125222500 </td></tr><tr><td> L-Metionina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M9625 </td></tr><tr><td> L-fenilalanina </td><td> Acros Organics </td><td> 130310250 </td></tr><tr><td> L-prolina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P0380 </td></tr><tr><td> L-serina </td><td> Acros Organics </td><td> 132660250 </td></tr><tr><td> L-treonina </td><td> Acros Organics </td><td> 138930250 </td></tr><tr><td> L (-)-triptófano </td><td> Acros Organics </td><td> 140590250 </td></tr><tr><td> L-Tirosina </td><td> Acros Organics </td><td> 140641000 </td></tr><tr><td> L-valina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> V0500 </td></tr><tr><td> Ácido dietilentriaminopentaacético </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 32318 </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> Fisher Scientific </td><td> S/3160/60 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> BDH </td><td> BDH0258 </td></tr><tr><td&gt; KOH </td><td> BDH </td><td> BDH0262 </td></tr><tr><td> La yema de huevo de emulsión </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 17148 </td></tr><tr><td> ME 2 bomba de vacío de diafragma </td><td> Vacuubrand </td><td> 696126 </td></tr><tr><td> Steritop filtros (tamaño de poro: 0,22 m, el tamaño del cuello: 45 mm) </td><td> Millipore </td><td> SCGPT10RE </td></tr><tr><td> Medio Luria-Bertani </td><td> Sigma </td><td> L2897 </td></tr><tr><td> Placas de 96 pocillos de microtitulación </td><td> Sarstedt </td><td> 82.1581 </td></tr><tr><td> De 24 pocillos de cultivo de tejidos tratados con placas </td><td> Iwaki </td><td> 3820-024 </td></tr><tr><td> CampyGen paquetes de generación de gas </td><td> Oxoid </td><td> CN0025 </td></tr><tr><td> Cámara de microaerofílico </td><td> Oxoid </td><td> HP0011 </td></tr><tr><td> Tobramicina sulfato </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> T1783 </td></tr><tr><td> Celulasa, de Aspergillus niger </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 22178 </td></tr><tr><td> Resazurina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 199303 </td></tr><tr><td> Citrate.H 2 0 </td><td> BDH </td><td> BDH0288 </td></tr><tr><td> Fluostar omega lector de microplacas </td><td> BMG-Labtech </td><td> SPECTROstar Omega </td></tr></tbody></table>

use of artificial sputum medium to test antibiotic efficacy against pseudomonas aeruginosa in conditions more relevant to the cystic fibrosis lung

Existe una preocupación creciente acerca de la pertinencia de las pruebas in vitro sensibilidad a los antimicrobianos cuando se aplica a los aislamientos de P. aeruginosa en la fibrosis quística (FQ). Los métodos existentes se basan en una sola o unas pocas cepas cultivadas aeróbicamente y planktonically. Predeterminados valores de corte se utilizan para definir si las bacterias son sensibles o resistentes a cualquier antibiótico que se administra 1. Sin embargo, durante las infecciones crónicas de los pulmones en pacientes con FQ, P. poblaciones aeruginosa existen en biopelículas y existe evidencia de que el medio ambiente es en gran parte microaerofílico 2. La gran diferencia en las condiciones entre las bacterias en el pulmón y los que durante las pruebas de diagnóstico ha puesto en duda la pertinencia fiabilidad e incluso una de estas 3 pruebas. Medio artificial de esputo (ASM) es un medio de cultivo que contiene los componentes de esputo de pacientes con FQ, incluyendo aminoácidos y el ADN, la mucina libre. P. aeruginosa &lt;/ Em&gt; crecimiento en el crecimiento de imitadores ASM durante las infecciones CF, con la formación de estructuras de auto-agregación de biofilm y la divergencia de la población 4,5,6. El objetivo de este estudio fue desarrollar un ensayo de microtitulación de placa para estudiar la susceptibilidad antimicrobiana de P. aeruginosa basado en el crecimiento en ASM, que es aplicable a ambas condiciones microaerófilas y aeróbica. Un ensayo ASM se desarrolló en un formato de placa de microtitulación. P biopelículas aeruginosa se ​​dejaron desarrollar durante 3 días antes de la incubación con los agentes antimicrobianos a diferentes concentraciones durante 24 horas. Después de la interrupción del biofilm, la viabilidad celular se midió mediante la tinción con resazurina. Este ensayo se utilizó para determinar la concentración de células mínima inhibitoria sésiles (SMIC) de tobramicina por 15 diferentes P. aeruginosa bajo condiciones aeróbicas y microaerófilos y valores SMIC se compararon con los obtenidos con el crecimiento caldo estándar. Si bien no fuealguna evidencia de aumento de los valores de CIM para aislamientos cultivados en ASM, en comparación con sus homólogos planctónicas, las mayores diferencias se encontraron con las bacterias ensayadas en condiciones de microaerofilia, que mostraron una resistencia mucho mayor, hasta un&gt; 128 veces, hacia la tobramicina en el sistema de ASM, cuando en comparación con los ensayos llevados a cabo en condiciones aerobias. La falta de asociación entre los actuales métodos de ensayo de la susceptibilidad y la evolución clínica ha puesto en duda la validez de los métodos actuales 3. Varios modelos in vitro se han utilizado previamente para estudiar P. biopelículas aeruginosa 7, 8. Sin embargo, estos métodos se basan en las biopelículas superficie adjuntos, mientras que las biopelículas ASM se asemejan a los observados en el pulmón CF 9. Además, la concentración de oxígeno reducida en el moco se ha demostrado que altera el comportamiento de P. aeruginosa 2 y afectar a la susceptibilidad antibiótica 10. Por lo tanto using ASM en condiciones de microaerofilia puede proporcionar un entorno más realista en el que el estudio de susceptibilidad antimicrobiana.

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Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Las pruebas de diagnóstico actual sensibilidad a los antimicrobianos se basa en el crecimiento de plancton de las cepas en condiciones de nutrientes ricos y aeróbicas. En este caso, contamos con un medio alternativo de esputo artificiales para estudiar la susceptibilidad antimicrobiana de las biopelículas de Pseudomonas aeruginosa, tanto en condiciones aeróbicas y microaerófilos más representativos de la fibrosis quística pulmonar.

Uso de un medio artificial de esputo para probar la eficacia de antibióticos contra la<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; En condiciones más pertinentes a la fibrosis quística pulmonar

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

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Un modelo de neumonía en inmunocompetentes robusta roedores para evaluar Eficacia antibacteriana contra<i&gt; S. pneumoniae</i&gt;,<i&gt; H. influenzae</i&gt;,<i&gt; K. pneumoniae</i&gt;,<em&gt; P. aeruginosa</em&gt; o<em&gt; A. baumannii</em

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