Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

Fipe / HcpA - Fundo de Incentivo ein Fortgeschrittenen-e Eventos Capes - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação Aperfeiçoamento de de de Nivel Superior-Pessoal</a>

1. Protokoll Text <ol><li> Vor dem Sammeln Zebrafisch Blut, ist es notwendig, betäubende Wasser vorzubereiten. Gießen Sie ~ 200 ml Aquarienwasser in einen Behälter mit einem 500-ml Fassungsvermögen. Fügen Sie ~ 200 g Eis-Chips. Die Temperatur sollte etwa 4 ° C liegen Da die Eis-Chips zu schmelzen, wird es notwendig sein, mehr Eisstückchen in den eine konstante Temperatur der Nähe von 4 ° C zu halten </li><li> Als die betäubende Wasser fertig ist, bereitet die Materialien für die Blutentnahme nötig. Setzen ...

<ol>
	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Dieser Beitrag stellt eine einfache Technik, die weiter Blut und Serum-Analyse im Zebrafisch Experimente erlaubt. Diese Technik hat das Potenzial, zukünftige Zebrafisch hämatologische Untersuchungen, die Blut-Parameter-Daten beitragen. Es sollte auch für größere Anwendungen der Zebrafisch als ein experimentelles Modell zu ermöglichen. Diese Technik erfordert keine speziellen Fähigkeiten oder Umsetzung einer präzise Technik. Darüber hinaus ermöglicht es die doppelte Menge von Blut g...

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenzes </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare </td></tr><tr><td> Spitzen mit geringer Retention </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf Zentrifuge 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Nicht mehr </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

Der Zebrafisch ist als Tiermodell für die Untersuchung der verschiedenen menschlichen Krankheiten verwendet. Es kann als leistungsfähige Plattform für die präklinische Studien über die molekularen Ereignisse und therapeutische Strategien sowie für die Auswertung der physiologischen Mechanismen von einigen Pathologien 1 dienen. Es gibt relativ wenige Veröffentlichungen im Zusammenhang mit erwachsenen Zebrafisch Physiologie der Organe und Systeme 2, die führen Forscher zu folgern, dass die grundlegenden Techniken erforderlich, um die Exploration von Zebrafisch-Systeme erlauben es fehlen 3 können. Hämatologische biochemischen Werte des Zebrafisch wurden erstmals im Jahr 2003 von 4 Murtha und Kollegen, die eine Blutentnahme Technik zuerst von Jagadeeswaran und Kollegen im Jahr 1999 beschrieben beschäftigt gemeldet. Kurz gesagt, wurde Blut über eine Mikropipettenspitze durch einen seitlichen Einschnitt gesammelt, etwa 0,3 cm in der Länge, im Bereich der dorsalen Aorta 5. Wegen der winzigen Dimensionen beteiligt sind, diesenist eine hochpräzise Technik, die eine sehr erfahrenen Praktiker. Die gleiche Technik wurde von der gleichen Gruppe in einer anderen Publikation im selben Jahr 6 verwendet. Im Jahr 2010 beurteilt Eames und Kollegen ganze Blutzuckerwerte im Zebrafisch 7. Sie gewannen den Zugriff auf das Blut, indem Enthauptungen mit der Schere und dann Einfügen einer heparinisierten Mikrokapillare Sammlung Schlauch in die Brust Artikulation. Sie erwähnen, die Schwierigkeiten mit Hämolyse mit einem geeigneten Lagertemperatur auf die Arbeit Kilpatrick et al gelöst wurden. 8. Bei dem Versuch, Jagadeeswaran die Technik in unserem Labor verwenden, fanden wir, dass es schwierig war, den Schnitt in genau der richtigen Stelle machen, wie nicht eine erhebliche Menge an Blut verloren, bevor Sammlung begonnen werden konnte werden lassen. Vor kurzem Gupta et al. 9 beschrieben, wie man erwachsene Zebrafisch Organe, Kinkle et al sezieren. 10 beschrieben, wie man intraperiton durchführenEAL Injektionen und Tritt durch et al. 11 beschrieben, wie man retroorbitalen Injektionen durchführen. Allerdings sind weitere Anstrengungen erforderlich, um mehr vollständig zu erforschen grundlegende Techniken für die Forschung im Zebrafisch. Die geringe Größe der Zebrafisch birgt Herausforderungen für die Forscher, sie als ein experimentelles Modell. Des Weiteren sind angesichts dieser Kleinteiligkeit, ist es wichtig, dass einfache Techniken entwickelt werden, damit die Forscher die Vorteile des Zebrafisch-Modell zu untersuchen.

Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Dieser Beitrag stellt eine Methode zur Gewinnung von Blut aus der Aorta dorsalis von Zebrafisch. Es bietet auch Anweisungen für das Abrufen Serum zur Verwendung in biochemischen Analysen, wie etwa Tests zur Bestimmung von Cholesterin und Triglyceriden.

Blutentnahme für Biochemische Untersuchungen an adulten Zebrafisch

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Zebrafisch Gehirn Ventrikel Injection

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Forschung

Biologie

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-Orbital-Injection in Adult Zebrafisch

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In-vivo-Elektroporation von Morpholinos in die Adult Zebrafisch Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In-vivo-Elektroporation von Morpholinos in das Regenerations Adult Zebrafisch Leitwerk

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Adult Zebrafisch

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

Ein Test für Laterallinie Regeneration im erwachsenen Zebrafisch

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Analysis of Nephron Composition and Function in the Adult Zebrafish Kidney

Analyse der Nephron Zusammensetzung und Funktion im erwachsenen Zebrafisch Nieren

The zebrafish model has emerged as a relevant system to study kidney development, regeneration and disease. Both the embryonic and adult zebrafish kidneys ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Wiederholte Blutentnahme für Bluttests in Adult Zebrafisch

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Immunofluoreszenz-Analyse von endogener und exogener Zentromer-Proteine ​​kinetochore

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

In Vivo Surface Elektrokardiographie für erwachsene Zebrafische

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...