Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
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FIPE / HCPA - Fundo de incentivo uno Pesquisa e Eventos CAPES - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação de Aperfeiçoamento de pessoal de Nivel Superior</a>

1. Protocollo di testo <ol><li> Prima di prelevare il sangue zebrafish, è necessario preparare acqua anestetizzante. Versare circa 200 ml di acqua dell&#39;acquario in un contenitore con una capacità di 500 ml. Aggiungi ~ 200 g di cubetti di ghiaccio. La temperatura dovrebbe essere di circa 4 ° C. Poiché i frammenti di ghiaccio sciolgono, sarà necessario aggiungere altri frammenti di ghiaccio per mantenere una temperatura costante vicino 4 ° C. </li><li> Quando l&#39;acqua anestetizzante è pronto, preparare i m...

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	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Questo documento presenta una tecnica semplice che permette un ulteriore analisi del sangue e siero in esperimenti zebrafish. Questa tecnica ha il potenziale per contribuire agli studi futuri zebrafish ematologiche che richiedono i dati dei parametri del sangue. Esso dovrebbe inoltre consentire di maggiori applicazioni del pesce zebra come modello sperimentale. Questa tecnica non richiede competenze particolari o dell&#39;attuazione di una tecnica precisa. Inoltre, essa consente a doppio del...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reattivo </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Comments </td></tr><tr><td> Consigli bassa ritenzione </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Centrifuga Eppendorf 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Fuori </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

Il pesce zebra è stato usato come modello animale per lo studio di varie malattie umane. Può servire come una potente piattaforma preclinico per studi di eventi molecolari e strategie terapeutiche nonché per valutare i meccanismi fisiologici di alcune patologie 1. Ci sono relativamente poche le pubblicazioni relative alla fisiologia zebrafish adulto di organi e sistemi 2, che possono portare i ricercatori a concludere che le tecniche di base necessarie per consentire l&#39;esplorazione di sistemi di zebrafish mancano 3. Ematologiche valori biochimici di zebrafish sono stati segnalati nel 2003 da Murtha e 4 colleghi che hanno impiegato una tecnica di prelievo di sangue prima descritta da Jagadeeswaran e colleghi nel 1999. Brevemente, il sangue è stato raccolto tramite una punta micropipetta attraverso un&#39;incisione laterale, di circa 0,3 cm di lunghezza, nella zona dell&#39;aorta dorsale 5. A causa delle dimensioni minime, anche questoè una tecnica di alta precisione che richiede un operatore molto esperto. La stessa tecnica è stata utilizzata dallo stesso gruppo in un&#39;altra pubblicazione nello stesso anno 6. Nel 2010, Eames e colleghi ha valutato i livelli di glucosio nel sangue intero in zebrafish 7. Hanno ottenuto l&#39;accesso al sangue eseguendo decapitazioni con le forbici e poi l&#39;inserimento di un tubo di raccolta eparinizzata microcapillare nella articolazione pettorale. Essi indicano difficoltà con emolisi che sono stati risolti con una temperatura di conservazione appropriata in base al lavoro Kilpatrick et al. 8. Quando si tenta di usare la tecnica Jagadeeswaran nel nostro laboratorio, abbiamo scoperto che era difficile fare l&#39;incisione in proprio il posto giusto per non permettere una notevole quantità di sangue da perdere prima della raccolta potrebbe essere avviato. Recentemente, Gupta et al. 9 descritto come sezionare organi zebrafish adulto, Kinkle et al. 10 descritta come eseguire intraperitoniniezioni EAL, e Pugach et al 11. descritto come eseguire la retro-orbitali iniezioni. Tuttavia, più lavoro è necessario per esplorare più a fondo le tecniche di base per la ricerca in zebrafish. Le dimensioni ridotte di zebrafish rappresenta una sfida per i ricercatori che lo utilizzano come modello sperimentale. Inoltre, data la piccolezza della scala, è importante che le tecniche semplici sono stati sviluppati per consentire ai ricercatori di esplorare i vantaggi del modello zebrafish.

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Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Questo documento presenta una tecnica per la raccolta di sangue dall&#39;aorta dorsale di Zebrafish. Esso fornisce inoltre le istruzioni per ottenere il siero per l&#39;uso in analisi biochimiche, come i test per determinare i livelli di colesterolo e trigliceridi.

Il prelievo di sangue per l&#39;analisi biochimica in Zebrafish Adult

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Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

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Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

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Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

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Un test per Lateral Rigenerazione Line in Zebrafish adulti

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

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Analisi di Nefrone Composizione e funzione del rene Zebrafish adulti

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Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

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Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Le proteine ​​immunofluorescenza di endogeni ed esogeni Centromere-cinetocoro

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Elettrocarcardio in superficie in vivo per il pesce zebra adulto

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