Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

FIPE / HCPA - Fundo de Incentivo en Pesquisa e Eventos Capes - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nivel Superior</a>

1. Protokoll Tekst <ol><li> Før samle sebrafisk blod, er det nødvendig å forberede bedøvelse vann. Hell ~ 200 ml akvarium vann i en beholder med en 500-ml kapasitet. Legg ~ 200 g is chips. Temperaturen bør være ca 4 ° C. Som isen chips smelter, vil det være nødvendig å legge mer is chips å opprettholde en konstant temperatur nær 4 ° C. </li><li> Når bedøvelse vannet er klart, forberede materialer som trengs for blodprøvetaking. Sett en lav-oppbevaring tips på en P20 pipettor og la pipettor der det let...

<ol>
	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Dette notatet presenterer en enkel teknikk som gjør at ytterligere blod og serum analyse i sebrafisk eksperimenter. Denne teknikken har potensial til å bidra til fremtidige sebrafisk hematologisk studier som krever blod Parameterdataene. Det bør også gi rom for større bruk av sebrafisk som en eksperimentell modell. Denne teknikken krever ikke spesielle ferdigheter eller gjennomføring av en presis teknikk. Dessuten gjør det opp doble mengden blod samles i forhold til andre teknikker, o...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagensen </td><td> Firma </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Lave oppbevaring tips </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf Sentrifuger 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Avviklet </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

Sebrafisk har blitt brukt som en dyremodell for studier av en rekke menneskelige sykdommer. Det kan tjene som en kraftig preklinisk plattform for studier av molekylære hendelser og terapeutiske strategier samt for å evaluere de fysiologiske mekanismene for noen patologi 1. Det er relativt få publikasjoner relatert til voksen sebrafisk fysiologi av organer og systemer 2, som kan føre forskerne å antyde at de grunnleggende teknikkene som trengs for å tillate utforskning av sebrafisk systemer mangler tre. Hematologisk biokjemiske verdier av sebrafisk ble først rapportert i 2003 av Murtha og kolleger 4 som ansatt en blod samling teknikk først beskrevet av Jagadeeswaran og kolleger i 1999. Kort, ble blod samles inn via en mikropipette tips gjennom en lateral snitt, ca 0,3 cm i lengde, i regionen av dorsal aorta 5. På grunn av de ørsmå dimensjoner involvert, detteer en høy presisjon teknikk krever en svært dyktig utøver. Den samme teknikken ble brukt av den samme gruppen i en annen publikasjon i samme år 6. I 2010 vurderte Eames og kolleger hele blodsukkernivået i sebrafisk 7. De fikk tilgang til blodet ved å utføre decapitations med saks og deretter sette inn en heparinisert microcapillary samling rør inn i brystregionen artikulasjon. De nevner problemer med hemolyse som ble løst med en passende lagringstemperatur basert på arbeidet Kilpatrick et al. 8. Når du prøver å bruke Jagadeeswaran teknikk i vårt laboratorium, fant vi at det var vanskelig å gjøre snitt i nøyaktig riktig sted for ikke å tillate en betydelig mengde blod som skal gå tapt før samlingen kunne startes. Nylig, Gupta et al. 9 beskrev hvordan å dissekere voksne sebrafisk organer, Kinkle et al. Ti beskrev hvordan de skal utføre intraperitonEAL injeksjoner, og Pugach m.fl. 11 beskrev hvordan å utføre retro-orbital injeksjoner. Det er imidlertid mer arbeid for å mer fullt utforske grunnleggende teknikker for forskning i sebrafisk. Den lille størrelsen på sebrafisk presenterer utfordringer for forskere som bruker det som en eksperimentell modell. Videre gitt denne smallness av skalaen, er det viktig at enkle teknikker er utviklet for å muliggjøre forskere til å utforske fordelene av sebrafisk-modellen.

Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Dette notatet presenterer en teknikk for innsamling av blod fra dorsal aorta av sebrafisk. Det gir også instruksjoner for å få serum til bruk i biokjemiske analyser, for eksempel tester for å bestemme kolesterol og triglyserid nivå.

Blood Collection for biokjemisk analyse i Voksen sebrafisk

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo electroporation av Morpholinos til Adult sebrafisk Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo electroporation av Morpholinos i Regenerating Adult sebrafisk Halefinner

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Adult Sebrafisk

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

En analyse for Lateral Linje Regeneration i voksen sebrafisk

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Analysis of Nephron Composition and Function in the Adult Zebrafish Kidney

Analyse av Nephron sammensetning og funksjon i voksen Sebrafisk Nyre

The zebrafish model has emerged as a relevant system to study kidney development, regeneration and disease. Both the embryonic and adult zebrafish kidneys ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Gjentatte Blodprøvetaking for blodprøver Adult Sebrafisk

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Immunofluorescensanalyse av Endogene og eksogene cent-kinetochore Proteiner

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

I vivo Surface-elektrokardiografi for voksne sebrafisk

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...