Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

FIPE / HCPA - Fundo de Incentivo à Pesquisa e Eventos CAPES - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior</a>

1. Texto Protocolo <ol><li> Antes de recolha de sangue do peixe-zebra, é necessário para preparar a água anestesiar. Verter ~ 200 ml de água de aquário em um recipiente com uma capacidade de 500 ml. Adicionar ~ 200 g de pedaços de gelo. A temperatura deve ser de cerca de 4 ° C. À medida que os pedaços de gelo derreter, será necessário adicionar mais fichas de gelo para manter uma temperatura constante próximo de 4 ° C. </li><li> Quando a água anestesiar está pronto, preparar os materiais necessários pa...

<ol>
	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Este artigo apresenta uma técnica simples que permite que mais sangue e análise de soro em experimentos de zebrafish. Esta técnica tem o potencial de contribuir para estudos futuros zebrafish hematológicas que exigem dados de parâmetros sanguíneos. Deve também permitir para aplicações maiores do peixe-zebra como um modelo experimental. Esta técnica não exige habilidades especiais ou de aplicação de uma técnica precisa. Além disso, permite-se o dobro da quantidade de sangue a s...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários </td></tr><tr><td> Pontas de baixa retenção </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf Centrífuga 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Descontinuado </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

O peixe-zebra tem sido utilizado como um modelo animal para estudos de várias doenças humanas. Ela pode servir como uma plataforma poderosa pré-clínico para estudos de acontecimentos moleculares e estratégias terapêuticas, bem como para avaliar os mecanismos fisiológicos de cerca de 1 patologias. Há relativamente poucas publicações relacionadas à fisiologia do peixe-zebra adulto de órgãos e sistemas 2, que podem levar os pesquisadores a concluir que as técnicas básicas necessárias para permitir a exploração de sistemas de zebrafish faltam 3. Hematológicas valores bioquímicos do peixe-zebra foram relatados primeiramente em 2003 por Murtha e 4 colegas que empregou uma técnica de coleta de sangue primeiramente descrita por Jagadeeswaran e colegas em 1999. Resumidamente, o sangue foi recolhido através de uma ponta micropipeta através de uma incisão lateral, a aproximadamente 0,3 cm de comprimento, na região da aorta dorsal 5. Devido às dimensões hora envolvidos, estaé uma técnica de alta precisão requerendo um praticante altamente qualificado. A mesma técnica foi utilizada pelo mesmo grupo em outra publicação no mesmo ano 6. Em 2010, Eames e colegas avaliaram os níveis de glucose no sangue em zebrafish 7. Ganharam acesso ao sangue através da realização de decapitações com a tesoura e depois inserir um tubo de colheita heparinizado microcapilar na articulação peitoral. Eles mencionam dificuldades com hemólise que foram resolvidos com uma temperatura de armazenamento adequado com base no trabalho Kilpatrick et al. 8. Ao tentar usar a técnica Jagadeeswaran no nosso laboratório, verificou-se que era difícil de fazer a incisão no lugar precisamente a direita, como para não permitir que uma quantidade significativa de sangue a ser perdido antes da recolha pode ser iniciado. Recentemente, Gupta et al. 9 descreveu como dissecar órgãos zebrafish adulto, nozinho et al 10. Descrito como executar intraperitoninjeções EAL e Pugach et al. 11 descrito como realizar retro-orbital injeções. No entanto, mais estudos são necessários para explorar mais técnicas básicas para a investigação em zebrafish. O pequeno tamanho do zebrafish apresenta desafios para os pesquisadores que o utilizam como modelo experimental. Além disso, dado este pequenez de escala, é importante que as técnicas simples são desenvolvidos para permitir aos investigadores para explorar as vantagens do modelo de peixe-zebra.

Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Este artigo apresenta uma técnica de coleta de sangue da aorta dorsal do peixe zebra. Ele também fornece instruções para a obtenção de soro para uso em análises bioquímicas, tais como testes para determinação dos níveis de colesterol e triglicérides.

Coleta de sangue para análise bioquímica em Zebrafish Adulto

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Zebrafish Injection Ventrículo Cerebral

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Biologia

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-orbital de injeção no Zebrafish Adulto

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Em Eletroporação vivo de Morpholinos na Retina Zebrafish Adulto

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Na eletroporação in vivo de Morpholinos no Adulto Regeneração Zebrafish Cauda Fin

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Zebrafish Adulto

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

Um ensaio para a lateral de Regeneração de Linha em Zebrafish Adulto

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Analysis of Nephron Composition and Function in the Adult Zebrafish Kidney

Análise de Composição Nephron e função no rim adulto Zebrafish

The zebrafish model has emerged as a relevant system to study kidney development, regeneration and disease. Both the embryonic and adult zebrafish kidneys ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Colheita de sangue para testes repetidos de sangue em Zebrafish Adulto

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Proteínas Análise de imunofluorescência de endógenos e exógenos Centromere-cinetócoro

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

Eletrocardiografia de superfície vivo para zebrafish adulto

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...