Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
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FIPE / HCPA - Fundo de Incentivo a Pesquisa e Eventos CAPES - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nivel Superior</a>

1. Protocolo de Texto <ol><li> Antes de la recogida de sangre de pez cebra, es necesario para preparar el agua anestésico. Verter ~ 200 ml de agua del acuario en un recipiente con una capacidad de 500-ml. Añadir ~ 200 g de trozos de hielo. La temperatura debe ser de aproximadamente 4 ° C. Como los trozos de hielo se derriten, será necesario añadir más cubos de hielo para mantener una temperatura constante de alrededor de 4 ° C. </li><li> Cuando el agua anestésico está listo, preparar los materiales necesarios...

<ol>
	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Este trabajo presenta una técnica sencilla que permite a más análisis de sangre y suero en experimentos de pez cebra. Esta técnica tiene el potencial de contribuir a los estudios futuros de pez cebra hematológicas que requieren los datos de los parámetros sanguíneos. También debería permitir mayores aplicaciones del pez cebra como un modelo experimental. Esta técnica no requiere habilidades especiales o la aplicación de una técnica precisa. Además, se permite hasta el doble de l...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> Consejos bajos de retención </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf Centrífuga 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Suspendido </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

El pez cebra se ha utilizado como un modelo animal para estudios de varias enfermedades humanas. Puede servir como una plataforma preclínica potente para los estudios de sucesos moleculares y estrategias terapéuticas, así como para evaluar los mecanismos fisiológicos de unos 1 patologías. Hay relativamente pocas las publicaciones relacionadas con la fisiología del pez cebra adulto de órganos y sistemas 2, que pueden conducir a los investigadores a deducir que las técnicas básicas necesarias para permitir la exploración de los sistemas de pez cebra faltan 3. Hematológicas valores bioquímicos de pez cebra fueron por primera vez en 2003 por Murtha y 4 colegas que empleó una técnica de recogida de sangre descrita por primera vez por Jagadeeswaran y sus colegas en 1999. Brevemente, se recogió sangre a través de una punta de la micropipeta a través de una incisión lateral, aproximadamente 0,3 cm de longitud, en la región de la aorta dorsal 5. Debido a las dimensiones implicadas minuto, estoEs una técnica de alta precisión que requiere un practicante altamente cualificado. La misma técnica fue utilizada por el mismo grupo en otra publicación en ese mismo año 6. En 2010, Eames y sus colegas evaluaron los niveles de glucosa en la sangre enteros en el pez cebra 7. Se tuvo acceso a la sangre mediante la realización de las decapitaciones con unas tijeras y luego insertar un tubo de recogida heparinizado microcapilar en la articulación pectoral. Ellos aluden a la dificultad con la hemólisis que se resolvieron con una temperatura de almacenamiento adecuada basada en el trabajo Kilpatrick et al. 8. Al intentar usar la técnica Jagadeeswaran en nuestro laboratorio, se encontró que era difícil hacer la incisión en el lugar correcto, precisamente como no permitir que una cantidad significativa de sangre que se pierde antes de la recolección se pudo iniciar. Recientemente, Gupta et al. 9 se describe la forma de diseccionar los órganos adultos de pez cebra, la Kinkle et al. 10 se describe cómo llevar a cabo intraperitoninyecciones de EAL, y Pugach et al 11 se describe cómo realizar las inyecciones retro-orbital. Sin embargo, se necesita más trabajo para explorar más a fondo las técnicas básicas para la investigación en el pez cebra. El pequeño tamaño del pez cebra presenta desafíos para los investigadores que lo utilizan como un modelo experimental. Además, dada esta pequeñez de la escala, es importante que las técnicas simples se han desarrollado para permitir a los investigadores a explorar las ventajas del modelo de pez cebra.

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Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Este trabajo presenta una técnica para la recolección de sangre de la aorta dorsal del pez cebra. También proporciona instrucciones para la obtención de suero para uso en los análisis bioquímicos, tales como ensayos para determinar los niveles de colesterol y triglicéridos.

Extracción de sangre para análisis bioquímicos en adultos de pez cebra

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Cerebro del pez cebra ventrículo inyección

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Investigación

Biología

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-orbital de inyección en adultos de pez cebra

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

En electroporación in vivo de Morpholinos en la retina de pez cebra adultos

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

En electroporación in vivo de Morpholinos en la regeneración de adultos de pez cebra Aleta de cola

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavage adultos de pez cebra

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

Un ensayo para la línea lateral de regeneración en adultos de pez cebra

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Analysis of Nephron Composition and Function in the Adult Zebrafish Kidney

Análisis de Composición Nephron y función en el riñón adultos de pez cebra

The zebrafish model has emerged as a relevant system to study kidney development, regeneration and disease. Both the embryonic and adult zebrafish kidneys ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Repetida extracción de sangre para pruebas de sangre en adultos de pez cebra

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Las proteínas Análisis de inmunofluorescencia de endógenos y exógenos Centrómero-cinetocoro

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

Electrocardiografía de superficie In Vivo para pez cebra adulto

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...