Name: blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish
Uploaded: 2012-05-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

FIPE / HCPA - Fundo de Incentivo en Pesquisa e Eventos Capes - <a href="http://www.capes.gov.br/">Coordenação de Aperfeiçoamento de pessoal de Nivel Överlägsen</a>

1. Protokoll text <ol><li> Innan samla zebrafisk blod, är det nödvändigt att utarbeta bedövande vatten. Häll ~ 200 ml akvarium vatten i en behållare med en 500-ml volym. Tillsätt ~ 200 g isbitar. Temperaturen bör vara ca 4 ° C. Eftersom de isbitar smälta, kommer det att vara nödvändigt att lägga till fler isbitar att bibehålla en konstant temperatur nära 4 ° C. </li><li> När bedövande vattnet är klart, förbereda material som behövs för provtagningen. Sätt en låg kvarhållande spets på en P20 p...

<ol>
	<li>Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementa&#231;&#227;o+de+um+novo+modelo+de+experimenta&#231;&#227;o+animal+Zebrafish.">Implementa&#231;&#227;o de um novo modelo de experimenta&#231;&#227;o animal Zebrafish.</a> Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).</li><li>Briggs, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish:+a+new+model+organism+for+integrative+physiology.">The zebrafish: a new model organism for integrative physiology.</a> Am. J. Physiol. Regulatory Integrative Comp. Physiol. 282, 3-9 (2002).</li><li>Menke, A. L., Sptsbergen, J. M., Wolterbeek, A. P. M., Woutersen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+anatomy+and+histology+of+adult+Zebrafish.">Normal anatomy and histology of adult Zebrafish.</a> Toxicologic Pathology. 000, 1-16 (2011).</li><li>Murtha, J. M., Qi, W., Keller, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematologic+and+serum+biochemical+values+for+Zebrafish.">Hematologic and serum biochemical values for Zebrafish.</a> Comp. Med. 53, 37-41 (2003).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P., Craig, F. E., Troyer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+zebrafish+thrombocytes.">Identification and characterization of zebrafish thrombocytes.</a> Br. J. Haematol. 107, 731-738 (1999).</li><li>Jagadeeswaran, P., Sheehan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+blood+coagulation+in+the+zebrafish.">Analysis of blood coagulation in the zebrafish.</a> Blood Cells Mol. Dis. 25, 239-249 (1999).</li><li>Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E., Kinkel, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sugar+measurement+in+zebrafish+reveals+dynamics+of+glucose+homeostasis.">Blood sugar measurement in zebrafish reveals dynamics of glucose homeostasis.</a> Zebrafish. 7, 205-213 (2010).</li><li>Kilpatrick, E. S., Rumley, A. G., Rumley, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+haemolysis+on+blood+glucose+meter+measurement.">The effect of haemolysis on blood glucose meter measurement.</a> Diabet. Med. 12, 341-343 (1995).</li><li>Gupta, T., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+Organs+from+the+Adult+Zebrafish.">Dissection of Organs from the Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (37), e1717 (2010).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+Injection+into+Adult+Zebrafish.">Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (42), e2126 (2010).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+Injection+in+Adult+Zebrafish.">Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (34), e1645 (2009).</li></ol>

Detta dokument presenterar en enkel teknik som tillåter ytterligare blod och serum analys i zebrafisk experiment. Denna teknik har potential att bidra till framtida zebrafisk hematologiska studier kräver uppgifter blod parameter. Det bör också möjliggöra större tillämpningar av zebrafisk som en experimentell modell. Denna teknik kräver inga speciella kunskaper eller genomförande av en exakt teknik. Dessutom möjliggör den upp dubbla mängden blod som skall samlas i förhållande t...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namnet på reagens </td><td> Företaget </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Låga lagring tips </td><td> Applied Biosystems </td><td> 022493020 </td><td></td></tr><tr><td> Eppendorf-centrifug 5415D </td><td> Eppendorf </td><td> Avbrytas </td><td></td></tr></tbody></table>

blood collection for biochemical analysis in adult zebrafish

Zebrafisk har använts som en djurmodell för studier av flera humana sjukdomar. Det kan fungera som en kraftfull prekliniska plattform för studier av molekylära händelser och terapeutiska strategier samt för att utvärdera de fysiologiska mekanismer för vissa sjukdomar 1. Det finns relativt få publikationer relaterade till vuxna zebrafisk fysiologi organ och system 2, vilket kan leda forskarna att dra slutsatsen att de grundläggande tekniker som behövs för att möjliggöra undersökning av zebrafisk system saknas 3. Hematologiska biokemiska värden för zebrafisk först rapporterades 2003 av Murtha och hans kollegor 4 som anställd en teknik blodinsamling först beskrivits av Jagadeeswaran och kollegor i 1999. Kortfattat uppsamlades blod via en mikropipett spets genom en tvärgående incision, ca 0,3 cm i längd, i området för den dorsala aortan 5. På grund av de berörda små dimensioner, dettaär en hög precision teknik som kräver en mycket skicklig utövare. Samma teknik användes av samma grupp i en annan publikation samma år 6. Under 2010 bedömde Eames och kollegor hela blodsockernivåer i zebrafisk 7. De fick tillgång till blodet genom att utföra halshuggningar med sax och sedan sätta in en hepariniserat mikrokapillär uppsamlingsrör i bröstmuskeln artikulation. De nämner svårigheter med hemolys som löses med en lämplig förvaringstemperatur bygger på det arbete Kilpatrick et al. 8. När du försöker använda Jagadeeswaran s teknik i vårt laboratorium, fann vi att det var svårt att göra snittet på precis rätt ställe så att inte tillåta en betydande mängd blod som förloras före insamlingen kunde startas. Nyligen Gupta et al. 9 beskrivs hur man dissekera vuxna zebrafisk organ, Kinkle et al. 10 beskrivs hur du utför intraperitonEAL injektioner och Pugach et al. 11 beskrivs hur man utför retro-orbital injektioner. Dock mer arbete behövs för att mer fullständigt undersöka grundläggande tekniker för forskning i zebrafisk. Den lilla storleken på zebrafisk innebär utmaningar för forskare som använder det som en experimentell modell. Dessutom med tanke på denna litenhet skala är det viktigt att enkla tekniker utvecklats för att ge forskarna möjlighet att undersöka fördelarna med zebrafisk modellen.

Watch this Scientific Journal Video about Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish at JoVE.com

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Detta dokument presenterar en metod för uppsamling av blod från den dorsala aortan hos zebrafisk. Den tillhandahåller också instruktioner för att erhålla serum för användning i biokemiska analyser, såsom tester för bestämning av kolesterol-och triglyceridnivåer.

Blodinsamling för biokemisk analys i vuxen Zebrafish

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Zebrafisk Brain kammare Injection

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-orbital injektionsvätska till vuxna Zebrafish

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo elektroporering av Morpholinos i Adult Zebrafish Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Elektroporering av Morpholinos i Regenerating Adult Zebrafish stjärtfenan

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging vuxna zebrafisk

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

En analys för sidolinje Regeneration i vuxen Zebrafish

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Analysis of Nephron Composition and Function in the Adult Zebrafish Kidney

Analys av Nephron sammansättning och funktion i vuxen Zebrafish Kidney

The zebrafish model has emerged as a relevant system to study kidney development, regeneration and disease. Both the embryonic and adult zebrafish kidneys ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Upprepad Blood Collection för Blodprov i vuxen Zebrafish

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Immunofluorescence Analysis of Endogenous and Exogenous Centromere-kinetochore Proteins

Immunofluorescens Analys av endogena och exogena centromer-kinetochore proteiner

"Centromeres" and "kinetochores" refer to the site where chromosomes associate with the spindle during cell division. Direct visualization of ...

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

In vivo Ytelektrokardiografi för vuxna Zebrafish

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...