Name: on-chip isotachophoresis for separation of ions and purification of nucleic acids
Uploaded: 2012-03-02T13:00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about On-chip Isotachophoresis for Separation of Ions and Purification of Nucleic Acids at JoVE.com

نحن الامتنان على تمويل من ترعاه DARPA مايكرو / نانو التركيز أساسيات Fluidics (MF3) مركز تحت رقم العقد N66001-10-1-4003، ومنحة من داربا N660001-09-C-2082.

<ol>
	<li>Jung, B., Bharadwaj, R., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On-chip+millionfold+sample+stacking+using+transient+isotachophoresis.">On-chip millionfold sample stacking using transient isotachophoresis.</a> Anal. Chem. 78 (7), 2319-2319 (2006).</li><li>Jung, B., Zhu, Y., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+100+am+fluorophores+using+a+high-sensitivity+on-chip+CE+system+and+transient+isotachophoresis.">Detection of 100 am fluorophores using a high-sensitivity on-chip CE system and transient isotachophoresis.</a> Anal. Chem. 79 (1), 345-345 (2007).</li><li>Everaerts, F. M., Beckers, J. L., Verheggen, T. P. E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isotachophoresis:+Theory,+instrumentation,+and+applications.">Isotachophoresis: Theory, instrumentation, and applications.</a> Elsevier Science &#38; Technology. , (1976).</li><li>Khurana, T. K., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preconcentration,+separation,+and+indirect+detection+of+nonfluorescent+analytes+using+fluorescent+mobility+markers.">Preconcentration, separation, and indirect detection of nonfluorescent analytes using fluorescent mobility markers.</a> Anal. Chem. 80 (1), 279-279 (2008).</li><li>Bercovici, M., Kaigala, G. V., Backhouse, C. J., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+carrier+ampholytes+assay+for+portable,+label-free+detection+of+chemical+toxins+in+tap+water.">Fluorescent carrier ampholytes assay for portable, label-free detection of chemical toxins in tap water.</a> Anal. Chem. 82 (5), 1858-1858 (2010).</li><li>Bercovici, M., Kaigala, G. V., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+analyte+identification+using+isotachophoresis+and+a+fluorescent+carrier+ampholyte+assay.">Method for analyte identification using isotachophoresis and a fluorescent carrier ampholyte assay.</a> Anal. Chem. 82 (5), 2134-2134 (2010).</li><li>Kaigala, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+system+for+isotachophoresis+assays.">Miniaturized system for isotachophoresis assays.</a> Lab Chip. 10 (17), 2242-2242 (2010).</li><li>Chambers, R. D., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+and+quantification+of+isotachophoresis+zones+using+nonfocusing+fluorescent+tracers.">Imaging and quantification of isotachophoresis zones using nonfocusing fluorescent tracers.</a> Anal. Chem. 81 (8), 3022-3022 (2009).</li><li>Schoch, R. B., Ronaghi, M., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+selective+extraction,+isolation,+preconcentration,+and+quantitation+of+small+RNAs+from+cell+lysate+using+on-chip+isotachophoresis.">Rapid and selective extraction, isolation, preconcentration, and quantitation of small RNAs from cell lysate using on-chip isotachophoresis.</a> Lab Chip. 9 (15), 2145-2145 (2009).</li><li>Persat, A., Marshall, L. A., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+nucleic+acids+from+whole+blood+using+isotachophoresis.">Purification of nucleic acids from whole blood using isotachophoresis.</a> Anal. Chem. 81 (22), 9507-9507 (2009).</li><li>Bercovici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+of+urinary+tract+infections+using+isotachophoresis+and+molecular+beacons.">Rapid detection of urinary tract infections using isotachophoresis and molecular beacons.</a> Anal. Chem. 83 (11), 4110-4110 (2011).</li><li>Marshall, L. A., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+DNA+from+malaria-infected+erythrocytes+using+isotachophoresis.">Extraction of DNA from malaria-infected erythrocytes using isotachophoresis.</a> Anal. Chem. 83 (24), 9715-9715 (2011).</li><li>Persat, A., Chambers, R. D., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+principles+of+electrolyte+chemistry+for+microfluidic+electrokinetics.+Part+I:+Acid-base+equilibria+and+pH+buffers.">Basic principles of electrolyte chemistry for microfluidic electrokinetics. Part I: Acid-base equilibria and pH buffers.</a> Lab Chip. 9 (17), 2437-2437 (2009).</li><li>Garcia-Schwarz, G., Bercovici, M., Marshall, L. A., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+dispersion+in+isotachophoresis.">Sample dispersion in isotachophoresis.</a> J. Fluid Mech. 1 (1), 1-1 (2011).</li><li>Kohlrausch, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#220;ber+concentrations-verschiebungen+durch+electrolyse+im+inneren+von+l&#214;sungen+und+l&#214;sungsgemischen.">&#220;ber concentrations-verschiebungen durch electrolyse im inneren von l&#214;sungen und l&#214;sungsgemischen.</a> Ann. Phys. 298 (10), 209-209 (1897).</li><li>Alberty, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Moving+boundary+systems+formed+by+weak+electrolytes.+Theory+of+simple+systems+formed+by+weak+acids+and+bases.">Moving boundary systems formed by weak electrolytes. Theory of simple systems formed by weak acids and bases.</a> J. Am. Chem. Soc. 72 (6), 2361-2361 (1950).</li><li>Jovin, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiphasic+zone+electrophoresis.+I.+Steady-state+moving-boundary+systems+formed+by+different+electrolyte+combinations.">Multiphasic zone electrophoresis. I. Steady-state moving-boundary systems formed by different electrolyte combinations.</a> Biochem. 12 (5), 871-871 (1973).</li><li>Persat, A., Santiago, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA+profiling+by+simultaneous+selective+isotachophoresis+and+hybridization+with+molecular+beacons.">MicroRNA profiling by simultaneous selective isotachophoresis and hybridization with molecular beacons.</a> Anal. Chem. , (2011).</li></ol>

ليس لدينا ما يكشف.

قدمت وسائل تمكين ITP هنا الكشف السريع وحساسة وقوية والتعامل مع الجزيئات الأيونية. التحدي الرئيسي في استخدام آي تي ​​بي هو الخيار السليم للمخازن جنيه والشركة المصرية للاتصالات. في آي تي ​​بي أنيوني، نختار عادة كلوريد كما أنيون الرائدة لأنه هو حمض قوي مع الحركة المطلقة عالية جدا، وبالتالي لها خصائص يمكن التنبؤ بها جدا. لذلك، ينخفض ​​عادة خيار عازلة في ITP أنيوني إلى اختيار الشركة المصرية للاتصالات المناسبة وcounterion. لانتقائية تركز التجارب، TE الاختيار أمر بالغ الأهمية لاستبعاد تلويث الأيونات. في التطبيقات حيث لا وجود الملوثات، وانخفاض TE التنقل فعال يؤدي إلى أسرع معدل من التركيز. نوصي باستخدام ما يلي، نسبيا حسن تصرف أنيوني أيونات الشركة المصرية للاتصالات: MES، المماسح، HEPES، tricine. اختيار counterion يؤثر على كل من درجة الحموضة النظام والشركة المصرية للاتصالات تنقل فعالة. counterions شيوعا هي تريس (الباكاف الحمضية 8.1) ومكرر تريس (الباكاف الحمضية 6.4). للفحوصات التي تتطلب درجة الحموضة أقل أو أعلى، فإننا نوصي بيريدين (الباكاف الحمضية 5.25) وإيثانولامين (الباكاف الحمضية 9.5)، على التوالي. في الجدولين 1 و 2، آي تي بي للأنيوني والموجبة، على التوالي، ونحن تلخيص عدة أمثلة العازلة مفيد. نحن نأخذ حمض الهيدروكلوريك كما أيون جنيه أنيوني والصوديوم وأيون جنيه الموجبة، ونحن نفترض 100 قوة الأيونية ملم من المنطقة العازلة جنيه. والقارئ لاحظ أن قوة أيونية عازلة في بروتوكولات لدينا (والجداول 1-2) هي دائما أكبر من أو يساوي 10 مم. بينما في نظرية فيزياء ITP ينطبق على القوة الأيونية أقل من 10 ملم، والملوثات الطبيعية (حامض الكربونيك على سبيل المثال من التفاعل بين الماء وغاز ثاني أكسيد الكربون في الغلاف الجوي) بالقرب من مستوى ملي 1 غالبا ما تحد من الاستخدام العملي للمنخفض مخازن القوة الأيونية. نلاحظ أن لا يقتصر إشارة آلية تنبيغ لفحوصات الواردة في هذا البروتوكول. كما يمكن مناقشتها بإيجاز في الجزء 5، في وضع هضبة تنقية مناطق يمكن اكتشافها من خلال التغييرات في الموصلية المحلية، والأشعة فوق البنفسجية absorبانس، ودرجة الحرارة، أو مؤشر الانكسار. في المجموعة الخاصة بنا، وقمنا بتطوير طريقة التي تستخدم ampholytes الناقل فلوري للكشف عن الحساسية، وتحديد من analytes غير معروف. (5) والتجارب وضع الذروة، ويمكن استخدام مجسات خاصة لتسمية التحاليل تركيزا. في مثال واحد، ونحن نستخدم منارات الجزيئية - تحقيقات قليل النوكليوتيد أن يتألق على تهجين تسلسل إلى هدفهم - للكشف عن الحمض النووي المستهدف أو جزيئات الحمض النووي الريبي مع خصوصية عالية 11،18. في حين ITP قوية نسبيا إلى التشتت الناجم عن الضغط يحركها تدفق وEOF، EOF المفرط يمكن أن يؤدي إلى ركود واجهة ITP، حيث سرعة EOF يعني يصبح مساويا لسرعة ITP. 14 EOF قوي مثل هذا يحدث خصوصا في ظل ظروف ارتفاع درجة الحموضة والقوة الأيونية منخفضة. لهذا السبب، من المستحسن استخدام العازل مع درجة الحموضة (8) أو أقل، ومع القوة الأيونية بناء على أمر من 100 مم إذا مريحة. في تجربتنا، هو PVPمعظم طلاء فعالة لقمع EOF في رقائق البورسليكات. ومع ذلك، لما له من خصائص النخل، قد PVP لا يكون مناسبا لبعض التطبيقات، مثل التركيز الحمض النووي الجيني. في التجارب، ونحن نلاحظ أن إضافة PVP يمكن أن يقلل كثيرا الجينومية التنقل الحمض النووي المطلق (لدرجة أنها لا تركز). في هذه الحالات يمكن للطلاء silanol مثل Sigmacote في الاقتران مع السطحي (مثل تريتون-X 100) أيضا أن تكون فعالة في الحد من EOF. 10 <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td colspan="4"> TE أنيون (الباكاف الحمضية -1) </td></tr><tr><td> التخزين المؤقت counterion (الباكاف الحمضية +1) </td><td> MES (6.10) </td><td> اجتماعات الأطراف (7.20) </td><td> HEPES (7.50) </td><td> tricine (8.15) </td></tr><tr><td> إيثانولامين (9.50) </td><td> 21.41 </td><td> 20.40 </td><td> 17.38 </td><td> 22.85 </td></tr><tr><td> تريس (8.08) </td><td> 21.00 </td><td> 19.23 &lt;/ TD&gt; <td> 15.84 </td><td> 17.56 </td></tr><tr><td> مكرر تريس (6.40) </td><td> 18.22 </td><td> 10.41 </td><td> 7.30 </td><td> 5.23 </td></tr><tr><td> بيريدين (5.18) </td><td> 1.01 </td><td> 3.72 </td><td> 2.42 </td><td> 1.48 </td></tr></tbody></table> الجدول رقم 1. فعال حجم التنقل (× 10 -9 م 2 / V / S) من المعدل منطقة الحليلة نقي في ITP أنيوني حيث هو 100 جنيه حمض الهيدروكلوريك ملم و 200 ملم counterion التخزين المؤقت. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td colspan="4"> TE الكاتيون (الباكاف الحمضية +1) </td></tr><tr><td> التخزين المؤقت counterion (الباكاف الحمضية -1) </td><td> إيثانولامين (9.50) </td><td> تريس (8.08) </td><td> مكرر تريس (6.40) </td><td> بيريدين (5.18) </td></tr><tr><td> MES (6.10) </td><td> 35.57 </td><td> 21.96 </td><td> 16.39 </td><td> 10.45 </td></tr><tr><td> MOPS (7.20) </td><td> 35.47 </td><td> 20.92 </td><td> 9.76 </td><td> 3.93 </td></tr><tr><td> HEPES (7.50) </td><td> 35.35 </td><td> 19.97 </td><td> 7.77 </td><td> 2.88 </td></tr><tr><td> Tricine (8.15) </td><td> 34.77 </td><td> 16.72 </td><td> 4.50 </td><td> 1.44 </td></tr></tbody></table> الجدول 2. الفعال حجم التنقل (× 10 -9 م 2 / V / S) من المعدل منطقة الحليلة نقي في ITP الموجبة حيث هو 100 جنيه الصوديوم ملم و 200 ملم counterion التخزين المؤقت.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td colspan="4"> الكواشف </td></tr><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> الماء المقطر </td><td> GIBCO </td><td> 10977 </td><td> ريبونوكلياز / حرة الدناز </td></tr><tr><td> كلوروكس الترا </td><td> كلوروكس </td><td> 02489CT </td><td></td></tr><tr><td> هيدروكسيد الصوديوم (هيدروكسيد الصوديوم) </td><td> مالينكرودت </td><td> 7708 </td><td></td></tr><tr><td> حمض الهيدروكلوريك (HCL) </td><td> EMD كيماويات </td><td> HX0603-4 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma قاعدة (تريس) </td><td> سيغما الدريخ </td><td> T6066 </td><td></td></tr><tr><td> بوفيدون (PVP) </td><td> Polysciences المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> 06067 </td><td> ميغاواط 1000000 </td></tr><tr><td> HEPES </td><td> سيغما الدريخ </td><td> H-4034 </td><td></td></tr><tr><td> اليكسا فلور 488 حمض الكربوكسيلية </td><td> إينفيتروجن </td><td> A20000 </td><td></td></tr><tr><td> tricine </td><td> سيغما الدريخ </td><td> T-9784 </td><td></td></tr><tr><td> مكرر تريس </td><td> سيغما الدريخ </td><td> B4429 </td><td></td></tr><tr><td> EDTA </td><td> GIBCO </td><td> AM9260G </td><td></td></tr><tr><td> تريتون-X 100 </td><td> سيغما الدريخ </td><td> X100 </td><td></td></tr><tr><td> الليزوزيم </td><td> سيغما الدريخ </td><td> L6876 </td><td></td></tr><tr><td> SYBR الأخضر الثاني </td><td> إينفيتروجن </td><td> S7564 </td><td></td></tr><tr><td> إيثانولامين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> 411000 </td><td></td></tr><tr><td> رودامين 6G </td><td> العضوية Acros (جيل، وبلجيكا) </td><td> CAS 989-38-8 </td><td></td></tr><tr><td> L-الأحماض الأمينية </td><td> سيغما الدريخ </td><td> LAA21 </td><td></td></tr><tr><td> قوة SYBR الأخضر RNA إلى C 1-T الخطوة كيت </td><td> النظم البيولوجية التطبيقية </td><td> 4389986 </td><td></td></tr><tr> &lt;TD&gt; PCR الاشعال </td><td> المتكاملة للتكنولوجيا الحمض النووي </td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4"> معدات </td></tr><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> البورسليكات ميكروفلويديك رقاقة </td><td> الفرجار العلوم الحياتية شركة </td><td> NS12A </td><td> الموردة مع أو بدون علبة من البلاستيك </td></tr><tr><td> فراغ مضخة </td><td> غاست </td><td> DOA-P104-AA </td><td></td></tr><tr><td> Sourcemeter </td><td> شنيعة </td><td> 2410 </td><td> ثابت الجارية والثابتة وسائط تشغيل التيار الكهربائي </td></tr><tr><td> epifluorescent المجهر المقلوب </td><td> أوليمبوس </td><td> IX70 </td><td> استخدام الزئبق مصباح (أوليمبوس) أو الصمام (Thorlabs) للإضاءة </td></tr><tr><td> مرشح مكعب </td><td> أوميغا </td><td> XF115-2 </td><td> الإثارة / الانبعاثات: أزرق / أخضر </td></tr><tr><td> آمنقفل أنابيب microcentrifuge </td><td> إيبندورف </td><td> 022363204 </td><td> سعة 1.5 مل </td></tr><tr><td> نبذ </td><td> إيبندورف </td><td> 5417C </td><td></td></tr></tbody></table> الجدول 3. الكواشف معينة والمعدات.

on-chip isotachophoresis for separation of ions and purification of nucleic acids

تقنيات حركي كهربي هي من دعائم من التطبيقات الميكروسكيل نظرا لقدرتها الفريدة على أداء مجموعة متنوعة من العمليات fluidic والكهربي في النظم، وبسيط التعاقد مع أي أجزاء متحركة. Isotachophoresis (آي تي بي) هي تقنية بسيطة وقوية جدا حركي كهربي التي يمكن أن تحقق الفصل مليون أضعاف 1،2 preconcentration والكفاءة والاستخراج على أساس الحركة الأيونية. 3 على سبيل المثال، أننا أظهرنا تطبيق آي تي بي للانفصال وكشف حساسة من غير المسماة الأيونية جزيئات (السموم على سبيل المثال، الحمض النووي، والريباسي، ميرنا) مع ضئيلة أو معدومة عينة إعداد 4-8، واستخراج وتنقية الأحماض النووية من المصفوفات المعقدة بما في ذلك ثقافة الخلية والبول، والدم. 9-12 ITP يحقق التركيز والفصل باستخدام مجال تطبيق الكهربائية ومخازن 2 ضمن نظام قناة fluidic. لالتحاليل أنيوني، يتم اختيار الشركة الرائدة في مجال المنحل بالكهرباء (LE) العازلة قاوك أن الأنيونات لها أن تكون أعلى التنقل الكهربي فعالية من الأنيونات من المنحل بالكهرباء زائدة (TE) العازلة (التنقل الفعالة ويصف سرعة الانجراف ملاحظتها لايون، ويأخذ في الاعتبار حالة التأين من الأيونات، كما هو موضح بالتفصيل من قبل Persat وآخرون 13). بعد تأسيس حلقة وصل بين الشركة المصرية للاتصالات وجنيه، يتم تطبيق حقل كهربائي بحيث أيونات جنيه الابتعاد عن المنطقة التي تحتلها أيونات الشركة المصرية للاتصالات. يمكن الأيونات عينة من وسيط سباق التنقل فعال قبل الأيونات الشركة المصرية للاتصالات ولكن لا تجاوز أيونات جنيه، وبالتالي فهي تركز على واجهة LE-TE (وتسمى فيما بعد &quot;واجهة آي تي ​​بي&quot;). علاوة على ذلك، الشركة المصرية للاتصالات والمناطق شكل جنيه من الموصلية المنخفضة على التوالي وارتفاع، والذي وضع حاد الانحدار الحقل الكهربائي في واجهة ITP. هذا التدرج حقل preconcentrates الأنواع عينة لأنها تركز. خيار مناسب لنتائج الشركة المصرية للاتصالات وجنيه في التركيز وتنقية من الأنواع المستهدفة من الأنواع غير المركزة الأخرى، وفي نهاية المطاف، والفصل 1د الفصل بين الأنواع عينة. نستعرض هنا ITP المبادئ الفيزيائية التي يقوم عليها، ومناقشة وضعي معيار من العملية: &quot;الذروة&quot; و &quot;الهضبة&quot; وسائط. في وضع الذروة، ويخفف نسبيا الأيونات عينة تركيز معا ضمن تداخل القمم ضيق في واجهة ITP. في وضع هضبة، الأيونات عينة أكثر وفرة التوصل الى تركيز ثابت للدولة وفصل إلى مناطق مثل هضبة مجاورة امر بها الحركة على نحو فعال. الذروة والهضبة وسائط تنشأ من الفيزياء الكامنة نفسه، ولكنها تمثل الأنظمة متميزة تختلف عن تركيز تحليلها الأولي و / أو كمية من الوقت المخصص للتراكم عينة. وصفنا 1 بالتفصيل وضع ذروة تجربة نموذجية وشرح بعد ذلك فحص وضع ذروة لاستخلاص الأحماض النووية من E. كولاي خلية ثقافة. نستنتج من خلال تقديم فحص وضع هضبة، حيث نستخدم عدم التركيز التتبع (NFT) الأنواع لتصور الانفصال ولكلتشكيل الكميات من الأحماض الأمينية.

Watch this Scientific Journal Video about On-chip Isotachophoresis for Separation of Ions and Purification of Nucleic Acids at JoVE.com

On-chip Isotachophoresis for Separation of Ions and Purification of Nucleic Acids

Isotachophoresis (آي تي ​​بي) هو فصل قوي حركي كهربي وتقنية preconcentration مع التطبيقات التي تتراوح بين اكتشاف السم إلى إعداد عينة. نستعرض المبادئ الفيزيائية للITP والمنهجية لتطبيق هذه التقنية لاثنين من التطبيقات مثال محدد: الفصل والكشف عن جزيئات صغيرة وتنقيتها من الأحماض النووية من المحللة ثقافة الخلية.

على رقاقة Isotachophoresis للفصل بين الأيونات والتنقية من الأحماض النووية

Electrokinetic techniques are a staple of microscale applications because of their unique ability to perform a variety of fluidic and electrophoretic ...

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Physics

Bioengineering

Unit 1

Current and Resistance

SCIENTISTS IN ACTION

Fabrication of Electrochemical-DNA Biosensors for the Reagentless Detection of Nucleic Acids, Proteins and Small Molecules

تصنيع أجهزة الاستشعار الكهروكيميائية الدنا للكشف Reagentless من الأحماض النووية والبروتينات والجزيئات الصغيرة

As medicine is currently practiced, doctors send specimens to a central laboratory for testing and thus must wait hours or days to 
receive the results. ...

Lensfree On-chip Tomographic Microscopy Employing Multi-angle Illumination and Pixel Super-resolution

Lensfree الميكروسكوب تصوير الشعاعي الطبقي على رقاقة ويعمل لدى الشركة متعددة زاوية الإضاءة وبكسل سوبر قرار

Tomographic imaging has been a widely used tool in medicine as it can provide three-dimensional (3D) structural information regarding objects of different ...

On-Chip Endothelial Inflammatory Phenotyping

على رقاقة Phenotyping التهاب غشائي

Atherogenesis is potentiated by metabolic abnormalities that contribute to a heightened state of systemic inflammation resulting in endothelial ...

Expression, Isolation, and Purification of Soluble and Insoluble Biotinylated Proteins for Nerve Tissue Regeneration

التعبير، والعزلة، وتنقية القابلة للذوبان وغير القابلة للذوبان البيروكسيديز البروتينات لتجديد الأنسجة العصبية

Recombinant protein engineering has utilized Escherichia coli (E. coli) expression systems for nearly 4 decades, and today E. coli is still the most ...

Synthesis of Hydrogels with Antifouling Properties As Membranes for Water Purification

توليف الهلاميات المائية مع خصائص المضادة للحشف والأغشية لتنقية المياه

Hydrogels have been widely utilized to enhance the surface hydrophilicity of membranes for water purification, increasing the antifouling properties and ...

Dry Film Photoresist-based Electrochemical Microfluidic Biosensor Platform: Device Fabrication, On-chip Assay Preparation, and System Operation

الفيلم الجافة على أساس مقاوم الضوء Biosensor موائع جزيئية الكهروكيميائية منصة: تصنيع الجهاز وإعداد مقايسة على شريحة، ونظام التشغيل

In recent years, biomarker diagnostics became an indispensable tool for the diagnosis of human disease, especially for the point-of-care diagnostics. An ...

Fabrication and Validation of an Organ-on-chip System with Integrated Electrodes to Directly Quantify Transendothelial Electrical Resistance

تلفيق والتحقق من صحة نظام الجهاز على رقاقة مع أقطاب متكاملة لقياس المقاومة الكهربائية ترانسيندوثيليال مباشرة

Organs-on-chips, in vitro models involving the culture of (human) tissues inside microfluidic devices, are rapidly emerging and promise to provide useful ...

Visual Detection of Multiple Nucleic Acids in a Capillary Array

الكشف عن الأحماض النووية متعددة في صفيف شعرية البصرية

Multi-target, short time, and resource-affordable methodologies for the detection of multiple nucleic acids in a single, easy to operate test are urgently ...

Preparation, Purification, and Use of Fatty Acid-containing Liposomes

إعداد وتنقية، واستخدام الدهنية المحتوية على الأحماض الدهنية

Liposomes containing single-chain amphiphiles, particularly fatty acids, exhibit distinct properties compared to those containing diacylphospholipids due ...

Antimicrobial Peptides Produced by Selective Pressure Incorporation of Non-canonical Amino Acids

مضادات الميكروبات الببتيدات ينتجها إدماج الضغط الانتقائي من الأحماض الأمينية غير متعارف عليه

Nature has a variety of possibilities to create new protein functions by modifying the sequence of the individual amino acid building blocks. However, all ...